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中药复方灰兜巴对糖尿病小鼠模型糖代谢的影响
糖尿病是一种常见的慢性代谢性疾病。据现有数据统计,中国有大约5600名糖尿病患者,每年增长约200万。糖尿病已成为影响人类健康的第三类非感染性疾病。寻找有效的治疗方法尤为重要。中药灰袋巴已经在流行于糖尿病的治疗中已经使用了数百年,但它对糖尿病的治疗效果没有得到科学的验证。因此,通过建立糖尿病动物模型,我们观察到了中药复方灰袋巴对血糖、体重、糖持久和尿量的影响,以及中药复方灰袋巴对糖尿病的影响。1材料和方法1.1实验动物中心提供SPF级昆明种小鼠,雌雄各半,由中国科学院上海实验动物中心提供,合格证编号:SLAC.KMNo.00030001SPF级SD大鼠,雌雄各半,由中国科学院上海实验动物中心提供,合格证编号:SLAC.SDNo.00040021.1.2试剂和培养基中药复方灰兜巴由西南民族大学药理实验室提供;四氧嘧啶、链脲佐菌素购自Sigma-Aldrich公司;GenuineONETOUCH®血糖试纸购自强生公司;糖尿乐胶囊购自河南辅仁堂制药有限公司.酸度计(METTLERTOLEDO公司,美国);Millipore-Q超纯水系统(Millipore公司,美国);强生OneTouch™稳捷基础型血糖仪(强生公司,美国)1.3方法1.3.1糖尿病模型动物的制备取体重在23~33g的昆明小鼠,雌雄各半.造模前禁食16小时(自由饮水)后腹腔注射四氧嘧啶160mg/kg取体重在200~250g的SD大鼠,雌雄各半.造模前禁食12小时(自由饮水)后腹腔注射链脲佐菌素70mg/kg注射72小时后,禁食6h,断尾取血测定各实验动物血糖,取血糖值大于11.1mmol/L者作为糖尿病模型动物.1.3.2各组和给药、糖凝胶电泳取已成模的小鼠(血糖值≥11.1mmol/L)60只,分成阳性对照组、小、中、高剂量组、模型组和预防组,每组10只,按照小剂量组30mg/ml、中剂量组80mg/ml、高剂量组130mg/ml每日3次,每次1ml灌胃给予中药复方灰兜巴治疗,阳性对照组按照糖尿乐的用药说明,换算成小鼠剂量灌胃给药,正常对照组和模型组不予治疗.各组连续给药15天,分别于第7天、第15天禁食6h后用血糖仪断尾采血测定血糖及体重.糖耐量实验在成模后第10天禁食8h后,取对照组、模型组、小、中、高剂量组各10只,按照3g/kg的剂量,灌胃给予50%的葡萄糖,并用血糖仪断尾取血的方法,记录0min(灌胃前)、30min、60min和120min的血糖值.1.3.3中药复方灰兜底巴治疗取已成模的大鼠40只,分成对照组、小、中、高剂量组和模型组,每组8只,按照小剂量组30mg/ml、中剂量组80mg/ml和高剂量组130mg/ml每日3次,每次2ml灌胃给予中药复方灰兜巴治疗,记录各组大鼠入组、成模后第七天及治疗后第15天在24小时内的尿量,并计算尿量增长率.2结果2.1各组随机血糖、糖耐量、随机血糖的比较实验组经过中药复方灰兜巴治疗15天后,阳性对照组、预防组、小剂量组和中剂量组的随机高血糖显著低于模型组(P<0.001),实验数据见表1.在控制体重减轻上,小剂量组、中剂量组与阳性对照组的体重均高于模型组(P<0.05),见表2.糖耐量实验数据见表3,2.2表4显示了中药和灰袋巴对糖尿病大鼠模型尿量的影响3糖尿病模型大鼠血糖控制效果血糖是糖尿病临床诊断的一个主要指标,在实验过程中,治疗组灌胃给予中药复方灰兜巴15天后,各实验组的随机高血糖值均有所下降,阳性对照组、预防组、小剂量组和中剂量组的随机高血糖显著低于模型组(P<0.001),高剂量组的随机高血糖低于小剂量组和中剂量组(P<0.05),阳性对照组与高剂量组无显著差别(P=0.051),高剂量组的治疗效果也优于小剂量组和中剂量组(P<0.05),高剂量组与阳性对照组无显著性差别(P=0.051),说明采用糖尿乐胶囊的阳性对照组和高剂量组在血糖控制上具有近似相同的效果,各治疗组的血糖值均得到很好的控制.糖尿病典型的临床表现为“三多一少”,即多饮、多食、多尿和体重减轻,各实验组经治疗后,小剂量组、中剂量组与阳性对照组的体重均高于模型组(P<0.05),高剂量组的体重高于小剂量组(P<0.05),但与中剂量组(P=0.492)和阳性对照组(P=0.346)相比无显著差异,模型组的体重则进行性下降,说明在对糖尿病小鼠体重减轻程度的控制上,中剂量组为最佳的有效剂量,与市售的阳性对照药相比,也达到了近似的效果.糖尿病模型大鼠的尿量增加经治疗后也有一定程度的控制,中剂量组大鼠7到14天的尿量增长率与入组到第7天相比,从23.60%下降到-0.4%,出现负增长,高剂量组也从20.08%下降到2.25%,接近正常对照组2.80%的正常增长率除对照组外,各组增长率B与模型组相比,均小于模型组(P<0.05).糖耐量试验是一种葡萄糖负荷试验,目的是了解胰岛β细胞功能和机体对糖的调节能力.当胰岛β细胞功能正常时,机体在进食糖类物质后,通过调节机制在2h~3h内可恢复到正常血糖水平,此为耐糖现象.通过对实验数据分析发现,高剂量组与中剂量组在30min、60min和120min均低于模型组(P<0.05),高剂量组的餐前平均高血糖为11.11mmol/L;餐后120min平均高血糖为11.73mmol/L,血糖基本可以维持平稳
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