环境卫生学监测

环境卫生学监测

Environmentalhygienemonitoring医院感染管理科环境卫生学监测的意义一、有助于判定清洁和消毒的有效性。二、有助于判断医院消毒设备是否正常。三、医院感染暴发流行时，通过环境微生物检测，可以及时发现传染源及传播途径。四、环境卫生学监测可作为某些科研的基础研究。环境微生物学检测方法的项目1、空气2、医务人员手3、物体表面4、使用中消毒剂5、无菌物品6、消毒灭菌效能监测7、透析用水和透析液8、内镜消毒灭菌效果的监测9、医院污水的监测一、医务人员手1、采样时间：在接触病人和从事医疗活动前进行采样或消毒后立即采样，特殊监测随时采样。2、采样方法：（1）棉拭子涂抹法（2）不规则的皮肤粘膜处可用棉拭子直接采样或用相应面积的规格板采样。棉拭子涂抹采样法被检人5指并拢。用物：用棉拭子1支（浸有无0.03mol/L的磷酸盐缓冲液或生理盐水）方法：1、在双手指曲面从指跟到指端往返涂擦2次（1只手涂擦面积约30cm2）,并转动棉拭子，2、用无菌方法（可折断）剪去操作者手接触棉拭子部位，将剪下来的棉拭子投入采样试管内（内装10ml无菌液），及时送检。（不得超过2小时）3、将已采样试管振荡80次。送微生物室培养。（放37℃温箱培养24-48小时。）手卫生消毒效果监测频率要求1、每季度一次监测的科室有：手术室、产房、导管室、重症监护病房、供应室、血透室、新生儿室、口腔科、烧伤病房、感染性疾病科等2、当怀疑医院感染暴发与医务人员手卫生有关时，应及时进行监测手卫生消毒效果的质控标准卫生手消毒：≤10cfu/cm2外科手消毒：≤5cfu/cm2WS/T313-2009

《医务人员手卫生规范》二、物体表面卫生学监测采样时间：根据采样目的选择采样时间1、如进行常规物体表面监测，选择消毒处理后进行采样2、如进行暴发流行时的环境微生物学监测，则尽可能对未处理的现场进行采样采样面积：(1)、常规检测时被采面积＜100cm2,取全部面积(2)、≥100cm2,取100cm23、暴发流行时采样不受此限制采样及检测方法棉拭子涂抹法：1、平面物体，用标准灭菌规格板（5cm×5cm），放在被检物体表面，用棉拭子（浸有无菌0.03mol/L的磷酸盐缓冲液或生理盐水）1支在规格板内横竖往返涂抹5次，转动棉拭子，连续采样1∽4个规格板面积。2、将棉拭子折去手接触部分，投入10ml采样液试管内，及时送检。3、对小型物体及不规则物体表面，如水龙头、门把手等，直接用棉拭子涂抹物体，用cfu/件表示。5cm5cm棉拭子规格板采样示意图物体表面消毒效果的判断标准Ⅰ、Ⅱ类环境：细菌总数≤5cfu/cm2Ⅲ、Ⅳ类环境：细菌总数≤10cfu/cm2GB15982-2012中华人民共和国《医院消毒卫生标准》三.空气卫生学监测采样时间：Ⅰ类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样怀疑与医院感染暴发有关时及时采样环境类别Ⅰ类采用空气洁净技术的诊疗场所，分洁净手术部和其他洁净场所。Ⅱ类非洁净手术部、产房、导管室、血液疾病区、烧伤病区等保护性隔离病区、重症监护病区、新生儿室等。Ⅲ类母婴同室、消毒供应中心的检查包装灭菌区和无菌物品存放区、血液透析中心（室）、其他普通住院病区。Ⅳ类普通门（急)诊及其检查、治疗（注射、换药等）、感染性疾病科门诊和病区。根据GB15982-2012中华人民共和国《医院消毒卫生标准》监测部门手术室、产房、介入室、重症监护病房、新生儿室、血液透析中心、烧伤病房监测频度1、每季度进行监测。2、洁净手术室及其他洁净场所，新建与改建验收时以及更换高效过滤器后应进行监测。3、遇医院感染暴发怀疑与空气污染有关时随时进行监测，并进行相应致病微生物的检测。手术室及合理安排每次监测的房间数量，保证每个洁净手术间每年至少监测一次。WS/T368-2012中华人民共和国卫生行业标准《医院空气净化管理规范》平板暴露法（一）布点方法：1、室内面积≤30m2，3点（内、中、外对角线），内、外点应距墙壁1m处2、室内面积＞30m2,设4角及中央5点，4角的布点部位应距墙壁1m处。3、将普通营养琼脂平皿（直径90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m∽1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁。平板暴露法（二）暴露规定时间：1、Ⅰ类环境暴露30min2、Ⅱ类环境暴露15min3、Ⅲ类环境暴露5min

将送检平皿置36℃±1℃恒温箱培养48h，计数菌落数，必要时分离致病性微生物。空气消毒效果的判断标准Ⅰ类环境：细菌菌落总数≤4cfu/(30min·直径9cm平皿);Ⅱ类环境：细菌菌落总数≤4cfu/(15min·直径9cm平皿)Ⅲ、Ⅳ类环境：细菌菌落总数≤4cfu/(5min·直径9cm平皿);必要时分离致病性微生物。注：根据GB15982——2012中华人民共和国《医院消毒卫生标准》四.使用中消毒液染菌量检测采样时间:采取库存消毒剂或更换前使用中的消毒剂;注意事项:正确选用中和剂,采用后4h内检测。使用中消毒液染菌量检查方法用无菌吸管按无菌操作方法吸取1mL被检消毒液，加入9ml中和剂混匀；用无菌吸管吸取一定稀释比例的中和后混合液1ml接种平皿，将冷却至40℃∽45℃的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml-20ml，36℃±1℃恒温箱培养72h,计数菌落数；必要时分离致病性微生物。

-----卫生部《医疗机构消毒技术规范》2012.8.1实施检测标准使用中灭菌用消毒液应无菌生长；使用中皮肤黏膜消毒液染菌量≤10cfu/ml;其他使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml。五.血液和腹膜透析所用的水及透析液的监测采样时间：每月1次。若采样结果超标时，须重复检查；怀疑或确定病人在治疗中有热源反应和菌血症时，应随时检测。一般水处理系统流程：自来水→粗滤→进水加压泵→砂过滤器→活性炭过滤器→水软化器（树脂置换）→反渗透装置→储水罐→出水加压泵→紫外线消毒（透析用水采样点）→输送管道→病人透析机透析用水：即自来水经粗滤、砂过滤器、活性碳过滤器、水软化器（树脂置换）、反渗透装置、储水罐、出水加压泵、紫外线消毒等步骤处理后的水；透析液浓缩溶液：A液含氯化钠、氯化钾、氯化钙、氯化镁及葡萄糖等成分；B液主要是碳酸氢钠，呈弱碱性，因利于细菌生长，容易被污染；透析液：透析用水和透析液浓缩按一定的比例混合后进入透析器的液体（进入人体透析之前的液体）。采样方法反渗水：用含碘消毒剂消毒反渗水管道出口处，然后放水1min，弃去前面一段水，用无菌试管收集出水。透析液：用含碘消毒剂消毒透析器接口处，弃去前面一段水，直接用无菌注射器从接口抽取液体，放入无菌试管中。检测标准处理水所含细菌总数，应不得超过100cfu/ml;在水处理装置的输出端的细菌内毒素，应不得超过1EU/ml；在血液透析装置入口的输送点上的细菌内毒素，应不得超过5EU/ml《血液透析和相关治疗用水》————中华人民共和国医药行业标准六.内镜消毒灭菌效果的监测采样方法：有管道软式内镜：采样部位为内镜的内腔面。用无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的磷酸盐缓冲液，从待检内镜或检口注入，用15ml无菌试管从活检出口收集,及时送检，在2小时内检测。无管道软式内镜采样部位为内镜的外表面，用沾有采样液的棉拭子，涂擦被检内镜插入部的全部外表面2遍，剪去手接触部位，将棉拭子投入到含10ml采样液的采样管中，立即送检。七.医疗器械灭菌效果监测一般采用无菌实验法，但因其操作繁琐，监测周期较长以及受抽样量大等因素的限制，故一般情况下可采用常规监测法评价医疗器械灭菌效果。采样时间：在灭菌处理后，存放有限期内采样。采样及检测方法1、无菌操作下将小件医疗器械如缝合针、针头、手术刀片等分别投入无菌肉汤中，注射器在无菌肉汤中抽吸5次，37℃培养4天2、手术钳、镊子等大件医疗器械用无菌生理盐水棉拭子反复涂擦后将棉拭子投入无菌生理盐水中，振打80次，然后吸取1ml待检样品放于无菌平皿内，加入45℃∽48℃的营养琼脂15∽18ml，置37℃温箱培养48h，计数菌落数3、结果判定：如4天后肉汤管清亮或48h平皿无菌生长为灭菌合格，若肉汤管出现浑浊则转种平皿，鉴定细菌医疗器材检测标准高度危险性医疗器材应无菌。中度危险性医疗器材菌落总数应≤20cfu/件（cfu/c㎡或cfu/100c㎡）,不得检出致病性微生物。八.压力蒸汽灭菌效果监测（生物监测法）生物监测法：指示菌株为耐热的嗜热脂肪杆菌芽孢（ATCC7953或SSIK31株），在121℃

±0.5℃条件下，D值（杀灭微生物达90%所需时间）为1.3min-1.9min,KT值（杀灭时间）≤19min,ST值（存活时间）为≥3.9min经一个灭菌周期后，在无菌条件下，取出标准实验包中的指示菌片，置入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨液培养基中，经56℃

±1℃培养48h观察初步结果，7d后观察最终结果（自含式生物指示管取出后，在56℃培养48h，观察颜色变化）。检测时设阴性对照和阳性对照。结果判定：实验组培养阴性（不变色），同时阴性对照管应阴性，而阳性对照管应阳性（变黄色）判定为灭菌合格；阳性对照管培养阳