连锁遗传规律

第六章染色体和连锁群第一节连锁与交换第二节真菌类的遗传学分析第三节人类连锁分析和细胞学图第四节染色体遗传机制在理论上和实践上的意义第一节连锁与交换一、连锁遗传现象1、1906年，英国遗传学家贝特生(Bateson曾经重复过孟德尔实验)和潘耐特（Punnett）在香豌豆杂交中，发现有两个性状遗传不是独立遗传的现象。但未能提出科学的解释。2、1910年由美国学者摩尔根（T.H.Morgan,1910

）通过大量的果蝇方面实验研究，确认了另一种遗传现象，即连锁遗传（遗传学的第三大基本定律)。摩尔根提出连锁遗传规律以及连锁与交换的遗传机理，并创立基因论(theoryofthegene)。组合一：相引相香豌豆(Lathyrusodoratus)两对相对性状杂交试验结果：F1两对相对性状均表现为显性，F2出现四种表现型；两亲本性状组合类型(紫长和红圆)的实际数高于理论数，而两种新性状组合类型(紫圆和红长)的实际数少于理论数。组合二：相斥相结果：F1两对相对性状均表现为显性，F2出现四种表现型；两亲本性状组合类型(紫圆和红长)的实际数高于理论数，而两种新性状组合类型(紫长和红圆)的实际数少于理论数。遗传上把这种原属于同一亲本的两个性状联系在一起遗传的倾向，称连锁遗传（linkageinheritance)。每对相对性状是否符合分离规律？摩尔根认为，两对及多对gene遗传，可以是独立分配，但一定还有另外遗传机制在起作用。随后他一直用果蝇为材料，不懈的努力，终于建立了连锁交换规律，建立了细胞遗传学。为了方便起见，我们用赫钦森(C.B.Hutchinson,1922)玉米测交试验二、连锁现象的解释1、用玉米研究连锁的优点：很多性状可在种子上看到。一棵玉米穗上有几百粒种子，便于计数。容易去雄和杂交因玉米是经济作物，故有些实验结果可直接用在生产上。2、玉米的连锁遗传实验赫钦森(C.B.Hutchinson,1922)玉米测交试验籽粒有色(C)、无色（c）籽粒饱满(Sh)、凹陷(sh)（亲组型97%；重组型的比例只有3%）与自由组合规律不相符，反交试验的结果与此相同理论预期测交试验杂交的结果结论：证明：F1CcShsh产生配子比例不等。C

SHc

shC

SHc

shC

SHc

shC

SHC

SHc

shc

sh这种方式进行减数分裂，只有等型配子。不可能有重组现象发生，即完全连锁（completelinkage)

，它们后代只有亲型个体，自交3∶1测交1∶1。那么，重组是如何发生的？3、完全连锁（completelinkage)C与Sh基因应该为非等位基因(non-allelicgenes).摩尔根说这是由于基因之间的交换（crossingover）产生的。这种连锁，后来叫不完全连锁4、交换——不完全连锁（non-complatelinkage)如果两个位置间发生交换，就导致两个连锁基因的重组，即不完全连锁。发生交换的所产生的配子中，亲本组合和重组合各占50%。如F1性母细胞减数分裂时有6%的发生有效交换，则有3%的重组配子。不完全连锁：连锁基因控制的性状在后代中既有链所又有交换的现象。交换：同源染色体等位基因位置互换的现象。显微镜下，我们看到了减数分裂过程中（细线期）染色体某点上有交叉缠结的图像。5、交换的细胞学证据6、交叉与交换的关系1.区别：交叉指的是一种细胞学现象，在显微镜下可见。交换是一种遗传学的概念，在显微镜下不能看到，只能通过子代的表型来推算它的发生与否。2.联系：交叉是交换的结果（先交换又交叉）。（先交叉）（先交换）（后交叉）①.概念：交换值（重组值）:在测交实验中重组型配子占所有类型配子总数的百分数。

重组值=

一般用测交方法进行重组值=

重组型配子数全部配子总数×100%

测交后代重组型数测交后代总数

100%×100%7、交换值②.交换值的含义：(1)、交换值不可能大于或等于50%。(2)、交换值的大小代表了连锁基因的连锁强度，反映了基因间在色体上的相对距离。0时50%时0-50%时(3)、它反映了发生交换的细胞占细胞总数的百分率。③.连锁与交换规律的实质（自己总结）连锁基因在遗传传递中共同行动而表现出完全连锁；又由于在形成配子中部分细胞的同源染色体之间发生了交换，所以产生了少量重组类型而表现出不完全连锁。（连锁基因在染色体上呈直线排列并在遗传上表现出连锁与交换现象。Morgan1911年的有一天，他说，我突然理解到连锁强度的变化与基因之间的距离的关系。讨论：重组配子<50%当全部孢母细胞发生交换，结果产生1/2亲型配子，1/2重组型配子（等于独立遗传）三、雌雄连锁不同雄果蝇及雌蚕的连锁基因一般不发生交换，表现为完全连锁。四、三点试验（测验）与基因直线排列基因定位：根据杂交实验所得的交换值一确定基因在染色体上的相对距离和排列顺序。单位:图距单位或厘摩（cM）用测交的方法可以测定出任意两个基因之间的交换值。用自交方法也可以测定出任意两个基因之间的交换值。通过一次杂交和一次测交求二对基因间的重组值，确定它们在染色体上的排列顺序互相对距离。1、两点测验Aa、Bb、Cc2、三点试验法用三基因杂合体与三基因的纯隐性个体测交，测定三对基因间相互的重组值，确定它们在染色体上的排列顺序互相对距离。3.果蝇X连锁群三个基因的三点测验突变型ec——棘眼突变型sc——缺少某些胸部刚毛突变型cv——翅上横纹缺失通过杂交，得到三杂合体ec++/+sccv，用这三对基因的纯隐性雄蝇（ecsccv/Y）与之测交结果为：（表6-2）

此处只考虑这二对基因间出现重组的有关数据，而不考虑cv。

ec+(+)810+sc(cv)826ecsc(+)62++(cv)88+sc(+)89ec+(cv)103

1980重组型ec++/+sccvec—sc间的重组值为150/1980＝7.6%，即这二个基因间的遗传距离为7.6。ec—sc的重组值：4.重组值的计算ec

—cv的重组值：同样，此处不考虑基因sc/+：

重组值:（89＋103）/1980=9.7%

故ec

—cv的遗传距离为9.7ec++/+sccv前面已知，ec—sc的遗传距离为7.6，ec—cv

的遗传距离为9.7，这二个数据能确定三个基因在染色体上的连锁关系（顺序、距离）吗？不能，因为按这二个数据，可以推出三个基因间连锁关系的二种情况：哪个正确？看来，不计算sc—cv间的遗传距离，是无法确定的。ec++/+sccvsc—cv的重组值：不考虑ec/+的存在。亲本型重组型重组值为：17.3%此时可以确定三者间的遗传图为：ec++/+sccv前述sceccv三个基因在染色体上的排列顺序及相互间的遗传距离已通过“三点测验”确定。即sc——cv重组值（17.3%）等于sc—ec（7.6%）重组值与ec—cv（9.7%）重组值之和。按摩尔根假设，三个基因在染色体上的这种排列关系就称作直线排列。按前述计算和总结的结果，将“三点测验”的数据重新排列，这样看起来就更好理解了。5、连锁基因的直线排列ec—棘眼ct—截翅cv—横纹缺失将棘眼截翅（ecct+/ecct+）与横纹缺失（＋＋cv/++cv）交配得到三杂合体（ecct+/++cv），用三隐性（ecctcv/Y）与之测交，后代有8种表现型。前述测交试验中得到的是6种表现型，实际上，多数三点测验的后代都是8种表现型。用同样方法得到三点测验的结果：ec—ct重组值：10.1%＋8.3%＝18.4%ec—cv重组值：10.1%＋0.1%＝10.2%ct—cv重组值：8.3%＋0.1%＝8.4%ecct+/++cv×ecctcv/Y

问题：问题Ⅰ：前述三点试验ec—cv的重组值为9.7%，而本试验中这两个连锁基因间的重组值为10.2%，为什么？

因为同样两个基因对间的重组值在不同试验中会有所波动。

问题Ⅱ：从下图可以看出，ec—cv重组值10.2%与cv—ct重组值8.4%之和（实际为18.6）应等于ec—ct的重组值18.4%，但不相等，这是为什么？6.单交换与双交换——ecctcv的测交试验ecctcv的测交试验:ecct+/++cv×ecctcv/Y前述差别出现的原因：+++和ecctcv两种表现型在计算时用到过二次：计算ec—cv的重组值时用到它计算cv—ct的重组值时又用到它但在计算ec—ct的重组值时却没有将其计算在内。哪个正确呢？

右图可以看出：在ec—ct间发生两次交换，等于不交换，既然ec—ct间的双交换对于这两对基因的重组无实际意义，那么，计算它们间的重组值时，就不应考虑双交换的两种表型所占的比例。是正确的。只有cv/+存在使我们才能认出双交换，所以如有双交换存在，在计算间距离时，要加上2倍的双交换即：18.4%+2×0.2%=18.6%三点试验中，两边两个基因对间的重组值一定等于另外两个重组值之和加上两倍的双交换值。重组值一定等于另外两个重组值之和减去两倍的双交换值。本例ec—ct间的重组值为：10.2%＋8.4%－2×0.1%＝18.4%这个法则即为基因直线排列定律。这是Sturtevant斯特蒂文特在1913年确立的。即：当ab+bc=ac时三点在一条直线上在任何三点试验中，测交后代的8种表现型中，个体数最少的两种表现型是双交换的结果。据此，在不计算重组值的情况下，可直接判断三个基因的顺序。继而新改写测交结果的表性。在本试验的组合中，被测基因组合为ecct+/++cv，测交后代数目最少的表现型为+++及ecctcv。这两个表型与亲本比较，可以发现，只有cv/+这对基因发生了交换。故，可以确定cv/+的变化是双交换的结果。三点试验中，判断基因顺序的原则：首先，在数目最少的两种表型中确定其次，与测交亲本相比，发生变化的那对基因便位于另两对基因之间。（1）比两点测交方便、准确。一次三点测交相当于3次两点测交实验所获得的结果；（2）能获得双交换的资料；（3）证实了基因在染色体上是直线排列的。7、三点测交实验的意义五、符合系数（并发率）和干扰1、符合系数（coefficientofcoincidence）：用以衡量两次交换间相互影响的性质和程度。现象：双交换实际发生的频率一般低于预期频率预期频率=两个单交换值之积。计算方法以前述试验为例：ec—cv间的重组值为10.2%cv—ct间的重组值是8.4%预期双交换概率：如果一次交换不影响它的邻近再发生一次交换，那么三点间发生双交换的概率应为：10.2%×8.4%=0.86%。实际的双交换概率：（5＋3）/5318＝0.15%。

并发率＝观察到的双交换百分率/两个次交换百分率的乘积＝0.15%/0.86%=0.17%。在sc—ec—cv试验中，预期双交换百分率为7.6%×9.7%＝0.74；但实际双交换百分率＝0/1980=0。发生一次单交换后，其邻近也发生一次单交换的概率要减少一些，这各现象称干扰。ec—cv—ct试验中：并发率＝0.17%

干扰＝1-0.17%＝0.83sc—ec—cv试验中：并发率＝0；干扰＝1-0＝1并发率愈大，干涉愈小；并发率＝1，表示没有干涉。并发率愈小，干涉愈大；并发率＝0，表示完全干涉。2、干扰（interference)3、符合系数的特征符合系数=0完全干扰；0～1之间有干扰；=1不干扰；>1负干扰；≤1正干扰；干扰的原因：染色体的物理特性，Darlington说是染色体的刚性或韧性。六、连锁群和连锁遗传图1.概念一组相互连锁的性状，组成一个连锁群(linkagegroup)。或者说，位于同一染色体上的所有基因，组成一个连锁群。因此，连锁群的数目等于染色体的对数。用顺序和距离把所有连锁基因标志出来，叫基因定位，标记的图叫连锁遗传图（linkagemap)。遗传图或遗传连锁图是以基因连锁、重组交换值构建的图谱，图距为cM（厘摩），1%交换值为lcM，约相当于1000kb。定位在图上的可以是性状标记（质量性状或数量性状），也可以是分子标记（完整的基因或一段DNA序列）。

构建方法：两点试验、三点试验。果蝇连锁图玉米连锁图2.绘图方法⑴任一基因标为零点，然后向后排列，当发现新的基因在零点外端，交换零点，其余依次重排。任何两个基因间的重组值均在0-50%之间，但遗传学图中会出现大于50个单位的图距离标示。大于50的图距离是各基因重组值的累加，不能与重组值对等。果蝇和玉米的染色体图即为如此排法，并已更改多次。⑵红色面孢霉及一些低等生物，以着丝点为零点。第二节真菌的遗传学分析粗糙链孢霉（Neurosporacrassa）属于真菌门的子囊菌类（Ascomyceles），粗糙链孢霉属于真菌类中的子囊菌，它是遗传分析的好材料，它既有高等生物减数分裂的特点，又有低等生物的特点。

（1）个体小，长得快，易于培养，一次杂交可产生大量后代，所以统计结果易于正确，检出率。

（2）孢子体世代（无性世代）是单倍体，基因型可直接在表现型上反映出来。相当于测交。

（3）进行有性生殖，染色体的结构和功能类似于高等动物。

（4）一次可分析一个减数分裂的产物。

粗糙链孢霉的特点（P178）一、链孢霉的生活史与四分子分析（tetradanalysis）

无性世代：菌丝体→分生孢子→菌丝体。有性世代：

二倍体合子减数分裂形成四个单倍体子囊孢子，也称四分孢子。这四个减数分裂的产物不仅留在一起，而且以直线方式排列在子囊中，所以又称顺序四分子（orderedtetred）。对四分体进行遗传分析，就叫四分子分析。排列的顺序跟减数分裂中期板上染色单体的定向相同。因此，我们用遗传学方法可以区分每个染色单体，而用细胞学检查方法是办不到的。（1）8个子囊孢子中，两个相邻者的基因型一致。

（2）减数分裂的4个产物，呈现有规律的排列。特点：

顺序四分子在遗传学分析上的优点：（P179）因为子囊很窄小，其内的子囊孢子按照一定的顺序直线排列，所以可以直观简明地看出分离比和计算重组率。可以把着丝粒作为一个座位，计算某一基因与着丝粒的重组率。子囊中子囊孢子的正确对称性质，证明减数分裂是一个交互过程。可以检验染色单体的交换是否有干涉现象，而且还可用它来进行基因转变的研究。四线分析证明，每一交换只包括4线中的两线，但多重交换可包括一个双价体的两线、三线或四线。三、着丝粒作图（粗糙链孢霉的连锁与交换）

将着丝粒当作一个基因位点看待，计算基因位点与着丝粒间的交换值，估计基因与着丝粒间的遗传距离。1、粗糙型链孢霉赖氨酸缺陷型杂交实验野生型lys+——能合成赖氨酸，能在基本培养基（不含赖氨酸）上正常生长，成熟子囊孢子呈黑色；突变型lys－——不能合成赖氨酸，称赖氨酸缺陷型，在基本培养基上生长缓慢，子囊孢子成熟较迟，呈灰色。lys+╳lys－在对子囊进行镜检时发现子囊中lys+和lys－有六种排列方式，即我们教材p180所示的六种排列方式。为了方便起见，我们写出子囊孢子对的基因型而不写单个孢子的基因型。（1-2）两种排列方式：野生型lys+和突变型lys－在AI彼此分离，称第一次分裂分离。着丝粒和lys基因位点间不发生非姊妹染色单体交换，因此这两种子囊类型就是非交换型子囊。2、第一次分裂分离与第二次分裂分离（3-6）四种排列方式：第一分裂产物中野生型与突变型未发生分离，野生型和突变型减数分裂II发生分离，称第二次分裂分离。着丝粒与基因位点间发生非姊妹染色单体交换，因此这四种子囊均为交换型子囊。每个交换型子囊中，基因位点与着丝粒间发生一次交换，其中半数孢子是重组型（重组型孢子）。因此，交换值的计算公式为：3、着丝粒距离与着丝粒作图现有基因型为Aa的链孢霉所形成的子囊中孢子排列顺序和子囊数如下，计算a与着丝粒之间的距离44aa++48++aa2a+a+2+a+a3a++a1+aa+1+3+2+21+3+2+2+48+44×100%×1/2例：四、链孢霉的连锁(重组作图)1.链孢霉二种突变型的杂交实验杂交组合为：nic+×+adeNic-菸酸依赖型。Ade-腺嘌呤依赖型。一对基因杂交，有6种不同的子囊型，两对基因杂交应有6×6＝36种不同的子囊型。如果不考虑半个子囊内的基因型次序，和半个子囊间的位置，可以把36种子囊型归纳为7种不同的子囊型。我们感兴趣的只是第一、二次减数分裂的分离及基因之间的重组，而与分离的方向无关。这只不过是着丝粒的随机趋向而已。以表6-5中子囊型(5)为例：左第一列为子囊型(5)的基因次序：大家注意右边3列与第一列是否有本质区别？+adenic++adenic+nic++adenic++ade+ade+adenic+nic+nic+nic++ade+ade表中子囊型(5)(即左第一列)也包括右边三列。在子囊型(5)的半个子囊内，nic+孢子“在上”、+ade“在下”与+ade“在上”、nic+“在下”，这两种情况在本质上是相同的，这些“不同”只反映着丝粒的随机趋向，故不加考虑。即，这四种情况只考虑其一种即可。考虑两对基因间是否发生了重组分类：亲二型（PD）,有两种基因型，与亲代相同，子囊型(1)、(5)非亲二型(NPD)，有两种重组基因型，与亲代不同，包括子囊型(2)和(6)四型(T)，有四种基因型，其中2种亲本型，2种重组型，包括(3)、(4)和(7)7种基本子囊型中的四个基因型次序是各不一样的。分别由7种不同的交换方式而来。2.重组率计算=nic、ade与着丝点的连锁分析仅得到上述两个重组率并不能完全肯定它们间的连锁关系。现在，我们可以假设有以下三种可能性：从P184表6-5中nic+×+ade的分离数据可知，亲本型占1000个子囊中的808个，肯定是连锁遗传，这样即可排除第一种（无连锁的）可能。将nic+×+ade

分离数据，按照基因分离的时期来分析所得子囊数进行重新排列，看能得到什么结论：

两对基因均未与着丝粒发生交换，均为亲本型M1M1着丝粒－nic无交换着丝粒－ade间有交换M1M2着丝粒－nic有交换着丝粒－ade间无交换M2M1着丝粒－ade有交换着丝粒－nic间有交换M2M2着丝粒－nic无交换、着丝粒－ade间有交换（M1M2）的子囊数为90/1000，远远大于着丝粒－nic有交换、着丝粒－ade间无交换的5/1000(90与5)。而着丝粒－nic的重组之和着丝粒－ade间的重组值相差不到一倍(5.05于9.30)说明着丝粒－ade间的交换对着丝粒－nic的交换无影响，而着丝粒－nic的无交换使着丝粒－ade间的交换极少。

这说明nic、ade在与着丝粒交换时关系密切，故可排除它们位于着丝粒两侧的可能性。前面提到，着丝粒-ade无交换时，着丝粒-nic交换少(5/1000)。表6-6中M2M2

，即着丝粒-nic有交换，而着丝粒-ade也有交换的子囊数为96，而着丝粒-ade无交换，着丝粒-nic交换的子囊数仅为5，这说明在着丝粒-nic间发生同一次交换，意味着在大多数情况下使+/nic和+/ade均出现分离。所有这些，完全可以证明它们的连锁关系为图6-23中的第三种情况。即：nic与ade间重组率的计算：至此，两个突变型基因及着丝粒的位置关系已经确定，nic与着丝粒间的重组率（5.05）、ade与着丝粒间的重组率（9.3）也已确定。nic与ade间的重组率可通过9.3-5.03算出吗？不能。这一点在“三点测验”中已有解释。我们先看一下图6-22：非亲二型（NPD）子囊中，4个孢子对全为重组型。四型（T）子囊中，有一半孢子是重组型。故计算如下：Nic+×+ade着丝粒·nic·ade的遗传学图：五、染色单体干扰1、图示。染色体上第一个交换的发生固定后，第二个交换发生在任意两非姊妹染色单体间的4种可能性。如第二个交换发生在任意两个非姊妹染色单体间的机会是相等的。那么二线双交换∶三线双交换∶四线双交换之比应该是1∶2∶1。（随机的）2、如果跟上面的比例有偏差，我们认为有染色单体干扰。即在两非姊妹染色单体间发生一个交换后，会影响到相同的两染色单体间发生第二次交换的概率，造成第二个交换发生在任意两非姊妹染色单体间不是随机的，这种现象称为染色单体干扰。

第三节人类连锁分析和细胞学图(自学）概述家系分析与基因定位体细胞遗传学与细胞学图的制作普通遗传学研究，需要具备三个基本条件：（1）实验对象的选择：基因型完全相同或相似的纯系、自交系、无性繁殖系。周期短、繁殖快、繁殖量大。（2）实验环境的选择：相对稳定的一致性，这样能排除环境的影响（3）对实验方案的选择：可按照人为意愿进行不同遗传型之间的杂交。一、概述人类遗传学难以实现上述的三点，原因：（1）人类个体之间遗传背景差别比较大，又不能人为制造纯系和无性繁殖系，（2）不可能进行实验性婚配（3）人类生活的社会环境也不可能受遗传学家控制和支配（4）人类世代周期长：20年一代，后代个体数量少，1-10几个（现在1-2个），难以满足数量统计要求。一、概述一、概述所以除人以外的其他物种，都可以通过杂交、测交方式进行基因定位。而人类遗传学研究中，不能直接采用上述实验方法，只能进行家系成员调查，而人类家庭成员数有限，统计结果难以计算准确的结果。和其他物种一样，人类连锁遗传研究也应解决以下问题（P189）：所研究的不同基因是否属同一连锁群？已知的同一连锁群上的基因间的重组率是多少？目前，对人类X连锁群上基因的连锁与否容易肯定，但它们间的位置关系及重组率难以确定。而常染色体上基因的连锁关系及重组率问题就更难以研究了。

这一问题的最终彻底解决，恐怕只能依赖分子生物学手段了，人类基因组计划目前已经完成了核苷酸测序工作，但有关基因确定的各项研究，还有更大量的工作要做。此处，学习基因定位的经典实验方法，仍有其实际意义。首先，在目前条件下，可以在一定范围内进行人类遗传疾病的研究。其次，对于掌握相关的遗传学理论具有重要意义。基因定位的遗传学理论是不过时的。

尽管人类的基因定位不可能通过实验方法进行，但如遇到合适的家系，也可简单地计算重组率。二、家系分析与基因定位对杂合体的连锁相相引相（相偶相）：AB/ab;相斥相（Ab/aB

）另一方亲体为双隐性。这二种基因型间的婚配，相当于动植物的测交试验。故也可确定连锁关系，并计算重组率。二、家系分析与基因定位一个“甲膑综合征”患者的家系分析(常染色体显性遗传皮肤病)NpaIAnpaIBnpainpaiNpaIAnpainpaIBnpainpaIAnpai二、家系分析与基因定位一个“甲膑综合征”患者的家系分析家系分析得知，如果没有交换及重组，这一个体若为A型血，另一基因的基因型应为Npa/npa(表现为显性—病患者)。但实际上Ⅲ-5为正常个体，这就可以肯定其为重组体，基因型为npaIA/npai。重组率为：1/(7+1)二、家系分析与基因定位家系分析与细胞学观察相结合，发现某一性状的遗传与对应畸变染色体传递的平行关系，把决定这一性状的基因定位在某一染色体的某一区域，作成细胞学图。例如某家系红细胞型酸性磷酸酯酶1活性的缺乏与2号染色体短臂的微小缺少相关联，从而把酸性磷酸酯酶1基因（ACP1）定位在2号染色体短臂的远端。三、体细胞遗传学与细胞学图的制作这几年来发展了一种新技术，可以绕过减数分裂过程，应用细胞培养方法，研究体细胞融合、突变、分离以及连锁和交换等，也就是用体细胞遗传学，把基因定位在染色体上，作成细胞学图。促融因子病毒促融：大多数病毒通常有一个特定附着点，附着到宿主细胞上，并由此进入细胞。仙台病毒（Sendaivirus）对细胞融合很有用处。仙台病毒有几个附着点，将两个细胞靠近，它就能同时附着到两个不同的细胞。从而促使两个细胞膜的融合。化学促融：化学药剂聚乙二醇（PEG）可以取代仙台病毒。这种药剂可以使细胞膜部分降解，并在细胞间形成细胞质桥，从而提高细胞融合的效率。1.细胞融合2.人与小鼠细胞融合把人的体细胞和营养缺陷型的小鼠细胞在促融因子中混合培养，使两种细胞融合为异核体。促融因子——紫外线灭活的仙台病毒或PEG，异核体两个核融合，形成杂种细胞。因小鼠细胞是营养缺陷型，要使这种细胞正常生长，必须在培养基中添加相应的成分。但杂种细胞含有小鼠染色体和人体染色体，人体染色体上的相关基因可弥补小鼠的营养缺陷，故培养基不添加这种营养物质，杂种细胞也可保持下去。这种细胞往往有整套的小鼠染色体和丢失后保留下来的少数人体染色体，其中当然含有能补偿小鼠营养缺陷的那条染色体。通过各种选择技术及机遇，可以形成各种杂种细胞系（图6－29）。即不同杂种细胞系中有不同数目和不同编号的人类染色体。如：杂种细胞系A可能含有4种人类染色体。杂种细胞系B可能含有8条人灯染色体可能有部分与A相同，可能全不相同。达到一定数量的杂种细胞系就可以包括人类所有的染色体。2.人与小鼠细胞融合应用荧光染色法和其它特殊染色技术，已可使染色体纵长