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复方中药对山羊生理生化指标的影响实验探究目录TOC\o"1-2"\h\u9377摘要 112483前言 2145391材料与方法 2260131.1试验动物及处理 2291441.2试验药物 3124791.3试验器材 3138791.4饲养管理 3226481.5生化指标的测定 3118151.6数据统计与分析 4149672结果与分析 4259502.1饲料中加入复方中药山羊血清生理生化指标的影响 4197942.2饲料中加入复方中药对山羊各种生物酶的影响 548492.3复方中药对山羊血常规指标的影响 5254282.4复方中药对山羊免疫球蛋白的影响 63473讨论 6248063.1饲料中加入复方中药对山羊血清生理生化指标的影响 681483.2饲料中加入复方中药对山羊各种生物酶的影响 8274013.3复方中药对山羊血常规指标的影响 8203193.4复方中药对山羊免疫球蛋白的影响 9303844结论 920783【参考文献】 10摘要本试验旨在研究复方中药对山羊的生理生化指标和免疫功能的影响。本实验选取70日龄,体重25kg左右,身体健康的公山羊做实验。本试验将羊随机分成两组,一组空白组,一组实验组,每组30只羊,试验组用0.5%的复方中药拌料饲养,空白组则不加复方中药。试验期30天。结果表明,试验组的白蛋白(Alb)、球蛋白(Glb)、总蛋白(T-Pro)的含量显著高于空白组(P<0.05),试验组肌酐(Cre)和尿素氮(Bun)、钙(Ca)和无机磷(Gh)显著低于空白组(P<0.05),试验组的总胆红素(TB),葡萄糖(Glu)和总胆固醇(T-Cho)低于空白组但差异不显著(P>0.05);试验组天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷氨酰基转移酶(GGT)含量显著低于空白组(P<0.05),碱性磷酸酶(ALP)和乳酸脱氢酶(LDH)含量低于空白组但差异不显著(P>0.05);试验组白细胞(WBC)和淋巴细胞(LY)等免疫细胞的含量均高于空白组且差异显著(P<0.05);试验组红细胞(RBC)和血红蛋白(HGB)的含量均高于空白组且差异显著(P<0.05);试验组免疫球蛋白lgG、lgA和lgM的含量显著高于空白组(P<0.05)。综上所诉,使用本复方中药后的山羊的代谢功能和免疫功能有促进作用,对山羊的血糖和酸碱平衡无毒副作用,为绿色多功能饲料添加剂提供理论依据,促进中药饲料添加剂在羊类养殖中的发展。关键词:山羊;复方中药;生理生化指标;血常规;免疫球蛋白前言自抗生素被发现以来,一直被用于人类的药物生产和畜禽养殖中,其作为饲料添加剂对畜牧业作出了巨大贡献,大大提高了饲料利用率和动物的生产性能,保障了动物的健康,但也使大量致病菌产生耐药性。过量抗生素的使用不仅使致病菌产生耐药性,还会在畜禽体内残留大量药物,严重危害人们的身体健康。中国是中药的发源地,天然草药种类多,栽培历史悠久、防病治病应用已超过千年。中药药材主要采摘于大自然中的天然药草和矿物质,属于天然产物,无人工合成物质,被人们称为绿色添加剂。自2020年1月1日起,退出除中药外的所有促生长类药物饲料添加剂品种;自2020年7月1日起,饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂(中药类除外)的商品饲料。近年来,国内外大量机构的研究发现,中药饲料添加剂具有天然性,毒副作用小,无抗药性等优点。中药作为饲料添加剂在畜禽保健和治疗方面的研究已是大趋势。目前中药饲料添加剂在猪、禽方面应用广泛,但在反刍动物方面应用较少。本试验用复方中药作为饲料添加剂饲喂山羊,测定山羊的生理生化指标、血常规和免疫功能参数的变化,来研究复方中药对山羊的生理生化指标和免疫功能的影响,探讨中药添加剂的作用机理,促进中药在羊类养殖的发展。1材料与方法1.1试验动物及处理选择70日龄体重25kg左右,身体健康的公山羊60只,随机分配成两组,对照组与试验组,每组30只,试验组在日粮中添加0.5%的复方中药。试验前对羊进行驱虫。试验用羊由西昌市牧乐专业养殖合作社提供。试验时间30天。在试验结束后,随机各组选取10只羊颈部静脉采血15ml用EDTA-2Na抗凝血,3000r/min离心15分钟,分离血清,置-20℃保存待测。1.2试验药物本试验药物采购于西昌市某药店,药物由某动物基础实验室采用超微粉技术处理制作为散剂。1.3试验器材采用成都斯玛特科技有限公司生产的全自动生化分析仪(SMT-120V)和成都普利泰生物科技有限公司生产的生化指标定量检测试剂盘(综合检测23项)检测血液生化指标。采用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司产品,全自动血细胞分析仪(BC-5000Vet)检测血常规指标。1.4饲养管理试验期间,饲养方式采用全舍饲,每日饲喂两次,分别是早上9:00和下午16:00,自由饮水。试验期间按3kg/只供给基础日粮。基础日粮的组成为,玉米35%,豆粕15%,菜粕14%,麸皮9%,食盐0.5%,磷酸氢钙0.5%,苜蓿草粉20%,预混料6%。在每日喂饲料时,充分拌料,以免造成羊产生挑食行为。同时每日进行料槽的清洗,确保无剩料影响实验结果。试验期间不定期打扫圈舍卫生并消毒,保持圈舍干净整洁。1.5生化指标的测定1.5.1复方中药对山羊血清生化指标的影响采用全自动生物化学分析仪对山羊的球蛋白(Glb)、白蛋白(Alb)、白球比、总蛋白(T-Pro)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷氨酰基转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、总胆红素(TB)、肌酐(Cre)、葡萄糖(Glu)、尿素氮(Bun)、总胆固醇(T-Cho)、钙(Ca)、无机磷(Gh)进行检测。1.5.2复方中药对山羊血常规指标的影响采用迈瑞公司的血细胞分析仪对山羊的中性粒细胞数(Gran)、中间细胞数(Mid)、白细胞总数(WBC)、淋巴细胞数(LY)、血红蛋白(HGB)、淋巴细胞百分比(LY)、中间细胞百分比(Mid)、中性粒细胞百分比(Gran)、红细胞总数(RBC)、红细胞体积分布宽度变异系数(PDW-CV)和红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)进行检测。1.5.3复方中药对山羊免疫球蛋白的影响采用酶标仪测定山羊的lgA、lgG和lgM的含量1.6数据统计与分析数据先用Excel2016进行初步整理,显示出初步实验结果的数据,然后使用SPSS21.0软件进行独立样本T检验进行分析,P<0.05表示差异显著,P>0.05差异不显著。2结果与分析2.1饲料中加入复方中药山羊血清生理生化指标的影响结果见表1。试验组的Alb、Glb、T-Pro的含量均高于空白组且差异显著(P<0.05);试验组的Cre和Bun含量低于空白组且差异显著(P<0.05);试验组的TB、Glu和T-Cho含量均低于空白组,但差异不显著(P>0.05);试验组的Ca和Gh含量均低于空白组且差异显著(P<0.05)。表1复方中药对山羊生理生化指标的影响项目空白组试验组P值白蛋白(g/L)27±0.4529.14±0.540.04球蛋白(g/L)37.46±0.4939.38±0.700.04总蛋白(g/L)64.46±0.7668.52±0.960.03白球比(%)0.68±0.010.72±0.020.11总胆红素(umol/L)3.5±0.402.92±0.400.19肌酐(umol/L)77.08±3.7564.76±1.530.03尿素氮(mmol/L)5.57±0.264.62±0.300.04葡萄糖(mmol/L)3.99±0.343.52±0.250.29总胆固醇(mmol/L)2.32±0.052.15±0.160.37钙(mmol/L)2.64±0.062.43±0.010.02无机磷(mmol/L)3.44±0.192.72±0.150.022.2饲料中加入复方中药对山羊各种生物酶的影响结果见表2,试验组的GGT、AST和ALT均低于空白组且差异显著(P<0.05);试验组的ALP和LDH低于空白组,但差异不显著(P>0.05)。表2饲料中加入复方中药对山羊各种生物酶的影响项目空白组试验组P值谷氨酰基转移酶(U/L)47.2±1.3941.4±1.570.03天门冬氨酸氨基转移酶(U/L)149.6±3.61125±8.390.04丙氨酸氨基转移酶(U/L)32±1.6726.6±1.500.04碱性磷酸酶(U/L)161±12.67142.6±7.310.25乳酸脱氢酶(U/L)354.2±18.53334±11.970.392.3复方中药对山羊血常规指标的影响结果见表3。试验组的WBC、LY、Mid、Gran、LY(%)、Mid(%)和Gran(%)均高于空白组,差异显著(P<0.05);试验组的HGB、RBC、PDW-CV和RDW-SD均高于空白组,差异显著(P<0.05)。表3复方中药对山羊血常规指数的影响项目空白组试验组P值白细胞总数(109/L)25.6±0.9830.63±0.500.02淋巴细胞数(109/L)1.6±0.162.38±0.110.02中间细胞数(109/L)0.56±0.070.92±0.050.02中性粒细胞数(109/L)20.36±1.6427.1±1.300.02淋巴细胞百分比(%)6.6±0.569.17±0.510.03中间细胞百分比(%)1.96±0.083.36±0.300.03中性粒细胞百分比(%)84.2±1.3891.47±0.580.02血红蛋白(g/L)297.0±7.09355.0±13.580.03红细胞总数(1011/L)0.03±0.010.06±0.010.04红细胞体积分布宽度变异系数(%)9.1±0.4712.9±1.000.05红细胞体积分布宽度标准差fL31.2±0.7840.47±2.210.042.4复方中药对山羊免疫球蛋白的影响结果见表4,试验组的lgG、lgA和lgM含量显著高于空白组(P<0.05)表4复方中药对山羊免疫球蛋白的影响项目空白组试验组P值lgG2.20±0.274.46±0.980.04lgA0.19±0.010.22±0.010.03lgM0.18±0.030.23±0.020.033讨论3.1饲料中加入复方中药对山羊血清生理生化指标的影响中药主打调理机体机使机体达到自我平衡的状态。中药作用效果长,作为饲料添加剂加在饲料中,能够增加动物抵抗力。动物的血液生理生化指标在反应动物生理健康的同时还能作为体现动物机体代谢状况的指标之一。动物生理生化指标在研究动物生理状态及适应性等方面,具有十分重要的地位。白蛋白、球蛋白和一些其他物质共同组成血清总蛋白,其中白蛋白和球蛋白均由肝脏合成,它们具有维持血管内正常胶体渗透压和酸碱度平衡的重要功能,同时还能运输脂肪酸、胆红素以及各种代谢产物,在机体免疫功能上起到了重要的作用。刘瑞生等(2018)报道的在精料中加入中草药添加剂提高了总蛋白,球蛋白,白蛋白的含量,增加了白球比的比值。孟虹艳等(2008)在日料中加1.5%的中草药能显著提高总蛋白和白蛋白的含量。刘志英等(2012)将不同中药复方制剂加入云岭黑山羊日料中发现试验组的白蛋白和球蛋白含量均显著高于对照组。江晓丽(2017)在日料中加入中药药渣,提高血清球蛋白含量。本试验加入的复方中药同样使总蛋白、球蛋白和白蛋白的含量升高,说明本试验的复方中药能增强乐至黑山羊的免疫功能。血清尿素氮是血浆中除蛋白质以外的一种含氮化合物,是体内氨基酸代谢的最终产物之一,血清尿素浓度在一定程度上反映肾小球滤过功能。肌酐是蛋白质的代谢产物,其浓度受到肾小球滤过率和肌肉总量的影响。左晓磊等(2005)将中草药加入小尾寒羊的日料中,比例在1.5%和2%时尿素氮含量显著低于对照组。本试验中试验组比空白组的尿素氮和肌酐含量低,可以在一定程度上表明,复方中药能够促进乐至黑山羊中的有机氮和肌酐的吸收,可能增强了肾小球的过滤功能。胆红素是由肝脏,脾脏和骨髓衰老细胞分解破坏的产物。血糖是动物体内能量的主要来源,在维持身体机能上有着重要的作用。反刍动物的血糖主要来源于由胃消化后排入肠道的饲料中的碳水化合物的,然后通各种生理代谢作用产生。血清总胆固醇主要由肝脏和肾上腺等组织合成,可以反映动物机体血液中的脂类代谢情况。刘志英等(2012)研究发现,在日料中加入中草药复方剂,3个试验组的葡萄糖含量均低于对照组,其中四君子散的血糖浓度显著低于其余组,试验组的胆固醇含量均低于对照组。郝智慧等(2012)在云岭黑山羊日料中中加入强壮散组方,发现葡萄糖和胆固醇低于对照组。左晓磊等(2005)在小尾寒羊日料中加入中草药方剂,试验组的血糖含量低于对照组。本试验,试验组的总胆红素,葡萄糖、总胆固醇和总二氧化碳含量均低于空白组,说明本复方中药对乐至黑山羊的血糖吸收和脂类的代谢有促进作用。钙在机体内主要以钙离子的形式存在,它对于维持细胞膜两侧的生物电位,维持正常的\t"/item/%E9%92%99%E7%A6%BB%E5%AD%90/_blank"神经传导有十分重要的作用。钙离子还参与\t"/item/%E9%92%99%E7%A6%BB%E5%AD%90/_blank"神经递质合成与释放、激素合成与分泌,同时也是是骨骼构成的重要物质,磷是动物体内必须的矿物质元素,主要来源于日料中的磷,对于维持肝脏正常机能和传达神经刺激有重要功能。分娩后的动物如果钙含量不足,就会导致产后瘫痪。养殖动物体内的钙主要来源于饲料中的钙,反刍动物对钙的吸收直接反应在钙离子的含量上。本试验显示,试验组的钙和无机磷含量显著低于空白组,说明复方中药能促进乐至黑山羊对钙和无机磷的吸收。3.2饲料中加入复方中药对山羊各种生物酶的影响羊机体中的酶基本都存在于肝脏、肾脏、骨骼肌和心肌中,上述器官受损则会造成体内各种酶含量异常。徐建峰等(2019)在中草药添加剂对肉羊血清中酶活性影响的研究中发现加入中草药后测量肉羊的AST、GGT、ALT和LDH发现试验组均低于对照组,但组间差异不显著,ALP含量,试验组均高于对照组,组间差异显著。本试验中试验组的GGT、AST和ALT的含量显著低于空白组,试验组的ALP和LDH含量与空白组无显著差异,说明复方中药能增强乐至黑山羊肝脏、肾脏、骨骼肌和心肌的功能,来调节体内酶的含量。3.3复方中药对山羊血常规指标的影响白细胞包括中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。中性粒细胞有很强的吞噬能力,能吞噬入侵机体的细菌病毒,还能吞噬坏死和衰老的细胞;淋巴细胞主要参与机体的免疫过程。李春燕等(2013)在日料中加入中草药添加剂,能极显著的提高白细胞的数量,显著提高中性粒细胞和淋巴细胞百分率。刘瑞生等(2018)在肉羊的日料中加入中草药,发现试验组的白细胞、淋巴细胞和淋巴细胞百分率均高于空白组。本试验中试验组的白细胞总数、淋巴细胞数、中间细胞数、中性粒细胞数、淋巴细胞百分比、中间细胞百分比、中性粒细胞百分比均显著高于空白组。表明本复方中药能够增加白细胞、淋巴细胞等的含量,从而增强机体免疫力。血红蛋白、红细胞总数、红细胞体积分布宽度变异系数和红细胞体积分布宽度标准差在临床检测中的意义主要与机体贫血有关。血红蛋白是红细胞的内含物,红细胞主要的功能是运输氧和二氧化碳。郝智慧等(2012)在精料中添加中草药复方制剂对红细胞数量有显著提高。刘志英等(2012)的研究中发现复方紫锥菊提取物组和四君子散组的红细胞含量显著高于对照组。本试验中试验组红蛋白、红细胞总数、红细胞体积分布宽度变异系数和红细胞体积分布宽度标准差均显著高于空白组。表明本试验的复方中药能提高机体免疫力,增加机体造血功能。3.4复方中药对山羊免疫球蛋白的影响lgG是体液免疫的主要免疫球蛋白,主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞产生,球蛋白中含量最高,lgA具有抗菌、抗病毒和抗毒素的作用,lgM是体液面议应答早期阶段主要免疫球蛋白。汪水平等(2013)在日料中加入中草药复方,发现复方Ⅰ组和Ⅱ组的lgG、lgA和lgM含量均显著高于空白组。王明海等(2009)在湖羊日料中加入中草药发现随着中草药含量升高lgG、lgA和lgM的含量也随着升高。刘志英等(2012)在云岭黑山羊的日料中加入强壮散和复方锥菊提取物都能使lgG、lgA和lgM的含量升高。本试验中试验组lgG、lgA和lgM含量均显著高于空白组,表明本中药复方能够提高机体免疫力。4结论通过本试验得出,在生理生化方面本复方中药能增加白蛋白(Alb)、球蛋白(Glb)、总蛋白(T-Pro)的含量,降低肌酐(Cre)、尿素氮(Bun)、总胆红素(TB)、葡萄糖(Glu)、总胆固醇(T-Cho)、钙(Ca)和无机磷的含量;在血常规方面能够增加白细胞总数(WBC)、淋巴细胞数(LY)、中间细胞数(Mid)、中性粒细胞数(Gran)、血红蛋白(HGB)、红细胞总数(RBC)的含量,红细胞体积分布宽度变异系数(PDW-CV)和红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)的含量,表明本复方中药能够增强肝脏、脾脏和肾脏的功能,从而提高机体的免疫能力和机体造血能力,在肾小球过滤能力方面也有一定的提升。本试验的研究对复方中药在羊类养殖提供了理论依据,促进复方中药在羊类养殖中的发展。
【参考文献】[1]高铎,孙鹏.中草药添加剂在畜禽养殖中的应用潜力及挑战[J].家畜生态学报,2021,42(04):7-12[2]蔺春文.有关药物饲料添加剂退出的监督执法初探农业农村部194号公告实施后的监督执法实践探讨[J].湖南饲料,2019(05):17-19.[3]马铁伟,王强,王锋,王子玉,聂海涛,樊懿萱.营养水平对湖羊生长性能、血清
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