石墨炉原子吸收光谱法测定血铅时的条件优化

石墨炉原子吸收光谱法测定血铅时的条件优化

根据石墨装置的原子吸收光谱法，血液中的铅含量需要较少且高度敏感。因此，它是近年来国内外科学家最重要的分析方法。但该法分析时如何消除基体干扰,又不降低灵敏度,一直成为分析家们的研究课题。利用溶剂萃取法从干扰基体中分离出铅,要用到对人体和环境有害的有机溶剂,且繁琐费时。用标准加入-工作曲线法测定时,由于干扰因素对不同含量的被测元素的影响不一致,因而测定值与实际含量有一定偏离。我们在研究各种影响测定血铅的可能因素基础上,在样品及工作曲线中均加入一种化学改进液,建立一种取量少、准确度好、灵敏度高、测量快速的血铅测定方法。一、材料和方法1.炉原子化器、asc-2d带日本岛津公司AA-660型原子吸收分光光度计,GFA-4B石墨炉原子化器,ASC-60G自动进样器,铅空心阴极灯。波长283.30nm,狭宽1.00nm,工作电流8mA,10μl进样,BGC-D2类型测量峰高。石墨炉加热程序见表1。2.贮备液中硝酸盐的稀释①0.1%TritonX-100。②0.2%moL硝酸(优级纯)。③标准应用液:将含铅为1.000g/L标准贮备液用0.2mol/L硝酸稀释成0.0,100.0,200.0,400.0,800.0μg/L。④EDTA。⑤高锰酸钾。⑥磷酸二氢铵。⑦氨水。⑧化学改进液:称取0.1g磷酸二氢铵、0.2g高锰酸钾于50ml烧杯中,加入100μl浓氨水和100μl0.1%TritonX-100,溶解,移入100ml容量瓶以超纯水稀释至刻度。3.tri能力的测定具塞塑料管(3ml)、Hb吸管和自动进样杯于含0.1%TritonX-100的1∶5硝酸中浸泡24h,依次用蒸馏水,超纯水冲洗干净,干燥后备用。4.样品收集用一次性注射器抽取约1ml血样置于3ml含肝素抗凝剂聚乙烯塑料管内,放于-20℃冰箱保存。5.化学改进液制备①工作曲线:吸取基质血样各100μl加入5只3ml聚乙烯塑料管内,再依次加入铅标准应用液0.0、100.0、200.0、400.0、800.0各100μl,最后加入800μl化学改进液,立即在混匀器上充分混匀。②样品分析:用移液管准确吸取100μl血样置于3ml聚乙烯塑料管中,再吸取100μl0.2mol/L硝酸和800μl化学改进液,同时作一试剂空白,盖上塑料盖,立即在混匀器上混匀,倒入样品杯内,在仪器选定工作条件下进行测定。二、结果1.测定一个工作曲线取基质血样(含铅96.30g/L)各100μl分装于5只试管,再依次加入上述标准应用液,稀释成1000μl,将测定5管的吸光度换算成相应含铅10.0、20.0、40.0、80.0μg/L时的吸光度,并绘成一条工作曲线。同时,在相同的仪器工作条件下测定50.0、100.0、200.0、400.0、800.0μg/L标准溶液稀释成10倍时的吸光度,同样制成一工作曲线(图1)。相同铅含量的血液测定的铅吸光度信号比水溶液要低,而且加入的铅浓度越大,铅损失越多,表明干扰因素对不同含量的被测元素的影响不一致,显然不加化学改进液的标准加入法,对血铅的测定值与实际含量有一定的偏差,用此标准加入法建立的工作曲线法中的基体匹配不能完全消除其他因素对血铅测定的干扰。2.血铅和虾中总糖含量的比较我们在基质血样中加入100.0ng/L铅标准应用液,与不同浓度的各种基体改进剂混匀后稀释成10倍后测定吸光度,结果见图2,3。磷酸二氢铵、高锰酸钾和氨水都能提高血铅吸光度信号,且随浓度增大信号增高。其中磷酸二氢铵提高最大,低于0.05%效果不是很好,高于0.6%开始出现正干扰。高锰酸钾在0.1%~1.0%浓度范围效果很好,低于0.1%不明显,高于1%有明显的正干扰。硝酸和EDTA都能降低铅的信号。两者有着类似的趋势,随浓度增大,信号下降越明显,所不同的是,EDTA在极低浓度时吸光度反而略有升高。进一步的试验表明,测试的浓度范围内,硝酸及EDTA对水溶液铅均无干扰。3.添加化学改进溶液后的工作曲线经多次试验,我们摸索到磷酸二氢铵、氨水、高锰酸钾混合体系的改进液,此改进液测定血铅的吸光度(稀释10倍)见表2。4.灰化时间的确定在基质血样中加入50.0ng/L铅标准应用液,按分析步骤测定不同灰化时间的吸光度(图4)。加化学改进液后的样品灰化时间从40s减少到25s,缩短了分析周期。5.访问权限和特征质量和限制283.3nm的特征质量为7.9pg/0.0044A·S,检出限为3.8pg。6.标准加入法工作曲线将表1中含改进液的血铅吸光度值相应地换算成10、20、40、80ppb各点的吸光度值,与标准水溶液所测相应点的吸光度值作一回归直线(图5)。回归方程:标准加入法工作曲线=1.02(标准水溶液工作曲线)-0.003。相关系数是0.9997。本法分析的6种样品的精密度和回收率见表3。三、稀氨适当加入量高锰酸钾和磷酸二氢铵不但使血液中的有机物在氩气流中达到真正意义上的灰化,降低背景吸收,而且能消除血液中的基体对铅信号的抑制。石墨管寿命仍能达250~300次。加入稀氨水能加速TritonX-100的溶血作用及防止稀血溶液