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归脾汤治疗抑郁症的实验研究
抑郁是一种情绪障碍精神疾病,历史悠久。心脾气血两虚。归脾汤对治疗效果准确。本实验通过慢性应激和隔离孤养复制抑郁症大鼠模型,探讨归脾汤治疗抑郁症的作用机制。1材料表面1.1实验动物中心Wistar大鼠60只,雌雄各半,体质量180~220g,黑龙江中医药大学实验动物中心,合格证号:SCXK-(黑)2008-0003。1.2制备工艺及试剂归脾汤由人参6g,木香6g,远志6g,黄芪12g,龙眼肉12g,炒酸枣仁12g,白术9g,茯神9g,当归9g,炙甘草3g组成,购于黑龙江中医药大学附属第一医院。将以上中药以10倍量的水浸泡1h,水沸后用文火煎煮40min,过滤;第2次再以8倍量的水煎煮,水沸后用文火煎煮40min,过滤,合并滤液,常压浓缩成每1mL药液分别含0.4、0.8、1.6g原生药材煎出物,冷却后密封,4℃保存备用。百优解(礼来苏州制药有限公司,批号:A212624)、T3放射免疫分析试剂盒(北京福瑞生物工程公司,批号:20081103)、T4放射免疫分析试剂盒(北京福瑞生物工程公司,批号:20081104)、TSH放射免疫分析试剂盒(北京福瑞生物工程公司,批号:20081012)。大鼠行为学观察敞箱,低速自动平衡离心机LDZ-2型,恒温冰箱,微量电子天平,手术器械。2方法2.1各组实验结果适应性饲养1周后,参考体质量及Open-field评分,将大鼠随机分为6组,每组10只。正常组(0.9%生理盐水10mL/kg)、模型组(0.9%生理盐水10mL/kg)、百优解组(1.8mg/kg)、归脾汤低剂量组(3.78g/kg)、归脾汤中剂量组(7.56g/kg)、归脾汤高剂量组(15.12g/kg)。各组每日灌胃1次,从第22天开始,连续21d。2.2文献方法第20d正常对照组每笼饲养5只,在实验中不接受任何刺激。按参考文献方法其余各组每笼1只,在实验的21d内,接受7种(电击足底、冰水游泳、倾斜鼠笼、潮湿饲养、昼夜颠倒、禁水、禁食)不同的刺激,每日安排1种,同种刺激不连续出现。2.3测量的质量2.4大鼠浓度和运动成绩检测箱自实验开始的第0天、第21天和第42天,于大鼠测完体质量后用Open-field法(敞箱实验)进行检测。其检测箱为一个长1m、宽1m、高0.5m的木箱,底部有25个20cm×20cm的小方格。水平运动得分以大鼠四肢共同处于1个方格内为标准,计1分;垂直运动得分以前肢抬起、后肢直立为标准,计1分。检测时将大鼠放置于箱子中心,分别统计3min内大鼠水平和垂直运动得分。2.5血清厚度t4及血清tsh的测定在实验第42天,从大鼠股动脉取血2mL,置于含肝素钠40μL的试管中,混匀,4℃3000r/min离心10min,分离血清,放置-20℃冰箱保存,采用放射免疫分析法(RIA)测定T3、T4及TSH的含量。2.6统计处理数据均以ue0af±s表示,用SPSS13.0统计软件进行统计学处理,组间比较用t检验。3结果3.1体质量增长缓慢造模前,各组大鼠体质量无明显差异(P>0.05)。造模21天后,各造模组与正常组比较,大鼠体质量增长缓慢(P<0.05)。给药21天后,归脾汤高、中、低剂量组及百优解组与模型组比较,大鼠体质量增长加快(P<0.01),归脾汤高剂量组增长最快;归脾汤高剂量组与百优解组相比,大鼠体质量增长显著(P<0.05)。结果见表1。3.2各组大鼠运动情况实验结果显示,造模21d后,各造模组大鼠水平运动和垂直运动得分均低于正常组(P<0.01)。给药21d后,归脾汤高、中、低剂量组及百优解组大鼠水平运动及垂直运动得分均高于模型组(P<0.01)。归脾汤高剂量组水平运动得分最高,中剂量组垂直运动得分最高。结果见表2~3。3.3各组t4、tsh及归脾汤水平比较实验结果显示,模型组大鼠血清中T3及TSH水平与正常组比较无显著差异(P>0.05),T4水平低于正常组(P<0.01)。归脾汤高、中、低剂量组及百优解组T3及TSH水平与模型组比较,无显著差异(P>0.05);给药各组T4水平高于模型组,归脾汤高、中剂量组与模型组比较差异极显著(P<0.01),其中归脾汤中剂量组提高最显著。结果见表4。4增强中医抗抑郁作用机制本实验测定了各组血清T3、T4及TSH含量,结果显示,T3及TSH水平无明显改变,模型组大鼠血清T4的水平降低,归脾汤各组T4水平升高,中剂量组提高最显著。甲状腺激素能调节脑中5-HT能神经递质系统,中枢5-HT有促进TSH分泌作用,在甲状腺激素对TSH的反馈调节中,5-HT可能是中间环节。归脾汤能提高T4水平,从而调节5-HT的释放,这可能是归脾汤抗抑郁的作用机制之一。抑郁症发病机制复杂,与社会心理因素、遗传因素、生物学改变密切相关。神经递质学说、神经内分泌功能改变学说及免疫
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