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文档简介
1基于血小板活化生物标志物检测的中药注射剂活血化瘀活性评价方法操作规程本文件规定了体外血小板活化生物标志物评价中药注射剂活血化瘀活性的实验方4检测原理2强的相关性。二磷酸腺苷(ADP)为一种较为温和的血小板活化诱导剂,可适度活化血小板,引发后续5材料与设备5.1材料生产许可证资质的单位购进。在实验期间应按国家对实验动物饲养条件要求进行饲养。动物饲养符合a)anti-mouse/ratCD62pPE/Cy7、Anti-Mouse/RatCD61PE、RatIgG2aP;ADP激活血样的制备:分别取上述基础血样和加药血样,各加入100ul浓度为20uM的ADP激活,使得ADP的终浓度为10uM,涡旋混匀1s,反应2min。上述各血样加入不同抗体后,4℃±1℃避光孵育20min。分别取固定后的各组血样50ul,加入1ml稀释液稀释(稀释约250倍),可根据情况适当调整稀释倍数,防止浓度过大,分离不佳。加入稀释液4),c)上样速度控制细胞获取速度在每秒200-400个细胞,一般a)R1门的划定确定靶细胞群(单一的血小板),同时去除细胞碎片和细胞聚集体对试验的干扰。采用488nm氩离子激光(BLUE488nm在以CD61-PE-小的细胞团为单一的血小板。将血小板圈定为R1门,门内收集5000-1
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