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文档简介
1实验6-1脯氨酸含量的测定一、目的二、原理当用磺基水杨酸提取植物样品时,脯氨酸便游离于磺基水杨酸的溶液中。加入酸性茚三酮加热处理后,溶液即成红色,再用甲苯处理,则色素全部转移至甲苯中,色素的深浅即表示脯氨酸含量的高低。在520nm波长下比色,用回归方程计算出脯氨酸含量。
三、材料、仪器设备及试剂1、材料常温和40℃处理的水稻幼苗。2、仪器设备722型分光光度计、大试管、带塞刻度试管、移液管。3、试剂2.5%酸性茚三酮溶液、3%磺基水杨酸、冰醋酸、甲苯。AB3%磺基水杨酸5mL实验流程冰醋酸酸性茚三酮AB吸取上清2mL分别称取0.5g冷却加4ml甲苯再次煮沸30minA520水稻幼苗A、常温处理B、40℃处理处理30min沸水浴10min后,冷却。各吸取2mL各吸取2mL四、实验步骤1、脯氨酸含量的回归方程:A520=0.021X-0.028(X:Pro含量,μg)2、准确称取不同处理的水稻幼苗(室温和40℃处理30min)叶片各0.5g,分别置于大试管中。然后,分别加入3%磺基水杨酸溶液5mL,在沸水浴中提取10min(注意:提取过程中需经常摇动),冷却。3、用移液管吸取2mL提取液于另一干净的带塞刻度试管中,分别加入2mL冰醋酸、2mL酸性茚三酮试剂,在沸水浴中准确加热30min,溶液即呈红色。4、冷却至室温后,加入4mL甲苯,摇荡30s。静置片刻,取上层脯氨酸红色甲苯溶液于比色杯中,以甲苯为空白对照,测定A520。五、原始数据W、A520、VT、VS六、结果计算
脯氨酸含量(mg/g)=X×VT
W×VS×106×1000
9实验6-2植物抗逆性鉴定(电导仪法)
一、目的二、原理在正常情况下,细胞膜对物质具有选择透性能力。在高温或低温、干旱、盐渍、病原菌侵染后,细胞膜遭到破坏,膜透性增大,从而使细胞内的电解质外渗,植物细胞浸提液的电导率增大。膜透性增大的程度与逆境胁迫程度和植物抗逆性的强弱有关。
比较不同作物或同一作物不同品种在相同胁迫温度下膜透性的增大程度,即可比较作物间或品种间的抗逆性强弱。因此,电导法目前已成为一种鉴定植物抗逆性强弱的标准方法。三、材料、仪器设备及试剂(一)材料常温和40℃处理的女贞叶片。(二)仪器设备电导仪(DDS-12A)、恒温箱、天平、打孔器、小烧杯。(三)试剂
去离子水。四、实验步骤1、分别取室温和40℃处理30min后的叶片,用吸水纸擦净叶表面(清洁叶片),用打孔器打取小圆片各20片。2、放入两个干净的小烧杯中,分别准确加入去离子水20ml,在室温下放置30min(需不时摇动)。3、用电导仪测定溶液的电导率。电导仪(DDS-12A)见教材P90电导率的计算公式:K=GxQ,G为电导,Q为电极常数。操作步骤:1.温度设定:25℃。2.选择最低量程和校正档,旋转常数旋钮,进行电极常数调节。3.选择适宜量程,测定电导率。注意:电极不要接触管底部或管壁。五、原始数据分别记录室温和处理下的叶片电导率(单位:Ω-1/cm或S/cm,姆欧/cm或西门子/cm)六、结果计算
伤害率(%)=处理电导率对照电导率×100七、分析与讨论
比较不同处理叶片电导率变化的情况,并加以解释。八、注意事项1、叶片表面要擦干净。2、用去离子水。3、30min内需不时摇动。4、测定后,电极要清洗干净。
序号周次实验项目名称131植物组织自由水与束缚水含量测定2-Ⅰ
植物组织水势测定--小液流法256植物根系活力测定(TTC法)10环境因子对光合作用的影响3716-Ⅱ
红外CO2分析法测光合速率12叶绿素含量测定4921微量测压法测定种子的呼吸速率22小篮子法测定植物的呼吸速率51534淀粉含量的测定(旋光法)36种子活力的快速鉴定(TTC、红墨水法)61759植物抗逆性快速测定--脯
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