心脏标志物检验专课件

第十五章

心脏标志物检验第一节概述一、心脏的结构和功能心脏的主要功能：完成体内的物质运输（原料、产物、激素、抗体等）二、心脏疾病的诊断

心电图、超声心电图、心导管检查、核素心血管照影、电子计算机断层扫描（CT）

血液生化检查WHO提出诊断AMI的三个依据（1959年规定满足以下两种即可确诊AMI）临床表现和症状主要为胸部剧烈疼痛;心电图上特异性改变;血清中有关酶浓度或标志物出现升高下降的动态过程.

2000年WHO对AMI诊断指标修改的依据1、心肌肌钙蛋白升高后缓慢降低/CK-MB快速升高后降低具有以下症状之一者可诊断为AMIA、缺血症状；B、心电图（ECG）出现病理Q波;C、ECG呈缺血改变（ST段抬高或下降）；D、冠状动脉检查有异常

血清酶与心电图在诊断AMI方面性能比较

假阴性灵敏度假阳性特异性心电图34%66%0100%

CK-MB0100%1%99%CK2%98%15%85%LD110%90%5%95%第二节心脏标志物的测定一、酶类标志物

LDH、AST、HBDH、CK

CK-MB、LDH1

（二）AMI的酶类标志物1、肌酸激酶(CK)及其同工酶和亚型

（一）生物化学特性组织分布：细胞定位于细胞浆;骨骼肌含量最高,脑、心等。线粒体也有肌酸激酶(CKmt)生理变异：性别、年龄、种族等有一定影响；运动影响。标本的采集，处理与贮存：AK

溶血：2ADP========ATP+AMP

放置：室温放4hr或4℃12hr以可使酶失活

酶的种类：CK-BB、CK-MB、CKMM参考值范围:男性:180U/L女性:130U/L(37℃)

肌酸激酶(CK)及其同工酶（二）测定方法肌酸激酶(CreatineKinase,)(UV法)反应原理PH=9.0

肌酸+腺三磷酸========磷酸肌酸+腺二磷酸

PH=6.7HK

葡萄糖+腺三磷酸==========G-6-P+腺二磷酸

G6PD6-磷酸葡萄糖+NADP=======G-6PA+NADPH2

CK-MB测定方法用抗体结合M-亚基,测定B-亚基活性,结果翻倍.

临床应用

CK是临床测定次数最多;

CK是AMI的诊断辅助指标之一；

CK是AMI的治疗及预后；作为其它心肌损伤检测；

CK也是肌肉损伤辅助诊断指标之一；

CK-MB：AMI的诊断指标之一；

AMI的治疗及预后；

CK亚型对早期AMI的检出更为灵敏；其它测定方法：酶偶联-丙酮酸测定法丙酮酸激酶

ADP+磷酸烯醇式丙酮酸==========丙酮酸+ATP

丙酮酸+2,4二硝基苯肼====丙酮酸--2,4二硝基苯腙逆向反应：化学法

Cr+双已酰+萘酚====红色化合物（男：5.5~75女：14.5~40U/L）

2、乳酸脱氢酶(LD)及其同工酶（一）生物化学特征

组织分布:细胞定位于细胞浆;LD1心肌,LD5横纹肌、肝脏等,以肝、心、肾、肌肉等生理变异:LD2>LD1>LD3>LD4>LD5、儿童较成人高一倍。标本的采集，处理与贮存:血小板含大量LD，LD易冷变性，RBC/血清为100倍参考值范围:80---500U/L(IFCC-----P------L)50---150U/L(L----P)(国内用为主)(37℃)

乳酸脱氢酶(LD)测定方法（二）测定方法反应原理:

PH8.8-9.8L-乳酸+NAD=======丙酮酸+NADH+HPH7.4-7.8LD同工酶测定:用己六醇抑制M亚基活性,测定LD（既LD1）的酶活性：

LD1测定可用其它底物:α羟(酮)丁酸,羟丙酮等酸临床应用:LD1是AMI辅助诊断酶之一；

LD是心肌功能检查指标之一；诊断和鉴别心、肝和骨骼肌的疾病；

3、天门冬氨酸氨基转移酶AST:细胞定位于细胞浆及线粒体;器官以心、肝、骨骼肌及红细胞等；肝中AST70%存在于线粒体；AST：主要用于诊断AMI;

肝细胞损伤程度指标;肝脏疾病预后指标;4、AST、LDH和CK的特异性比较（1）AST心肌含量多，但其他器官也多，诊断特异性较差；（2）LDH含量高，分子量大，血清中升高慢，但半衰期长，有一定诊断价值；（3）CK含量高，分子量较小，出现时间早，阳性率较高，诊断价值较高；（三）AMI后心肌酶的时相变化心肌细胞膜通透性改变后开始释放胞内容物，其顺序如下：

无机离子、小分子有机物、大分子蛋白

心肌酶释放----组织液-----淋巴液----入血

心肌酶增高有延滞期：延滞期的长短取决于梗死区的大小、酶分子的大小、酶在细胞中的浓度、定位形式、酶在血中稀释、破坏程度等

急性心肌梗塞主要血清酶变化

酶种类延缓期峰值维持时间增高倍数

CK-MB3~8hr16~24hr1~4天20倍

CK4~10hr20~30hr3~6天10倍

AST4~10hr20~30hr3~6天10倍

LD/LD16~12hr30~60hr7~14天6倍

ASTm8~24hr48hr8天4倍

GGT2~4天8~10天25~30天3倍（四）心肌酶的生理变异1、性别2、年龄新生儿CK三倍成人婴儿期为二倍

LDH出生时为成人2倍，14岁达成人水平3、运动（五）心肌酶的测定1、方法学及其发展

①固定时间法②连续检测法③酶质量法2、标本的处理对结果的影响标本的采集，处理与贮存：AK

溶血：2ADP========ATP+AMP

放置：室温放4hr或4℃12hr以可使酶失活

酶的种类：CK-BB、CK-MB、CKMM)

（六）参考范围及其临床意义1、乳酸脱氢酶及其同工酶参考范围：成人：120~230U/L（L----P）LD2〉LDH1〉LDH3〉LDH4〉LDH52、肌酸激酶(CK)及其同工酶参考值范围:男性:180U/L女性:130U/L（37℃）CK-MB：10~25u/L或《5%CK3、天门冬氨酸氨基转移酶参考值范围:0~40U/L二、蛋白类标志物血清心肌酶对测定AMI时的不足：

①酶活性升高出现较晚②持续时间短③特异性较差希望的心脏标志物①高度特异性②损伤后快速释放入血③血中半衰期较长④可被快速分析（一）AMI的蛋白类标志物1、肌红蛋白Mb170kD最早出现的生化指标，1hr出现，其升高幅度和持续时间与梗死面积和坏死程度呈正相关2、肌钙蛋白心肌肌钙蛋白用于诊断AMI。在早期血清浓度也明显增加，敏感性和特异性高，持续时间长。心肌肌钙蛋白是心肌损伤最具特异性的标志物。3、CK-MB质量（二）蛋白类标志物的测定1、测定的标准化肌红蛋白、心肌肌钙蛋白、CK-MB质量均采用免疫学方法测定。免疫学方法：抗干扰能力强，准确度高，大大提高诊断AMI时的准确性。2、测定的不精确性肌红蛋白和CK-MB的生物学变异（CV）分别为≤5.6%和≤4.2%，许多分析方法的变异远大于生物学变异。3、测定前的因素影响存放时间、温度、反复冻溶及抗凝剂影响免疫法测定CTnI和MYO时，肝素与EDTA抗凝产生6%的干扰。