周晓东医生：联合应答与数字化联动分析在慢乙肝个体化治疗中的意义课件

联合应答与数字化联动分析在慢乙肝个体化治疗中的意义ThesignificanceofcombinedresponsesanddigitizingtrinityanalysistoindividualizingtherapyinchronichepatitisB医学百事通志愿者医师周晓东医生联合应答与数字化联动分析基础

概念

内容

现状NAs可阻断HBV复制逆转录过程，直接导致病毒血清载量大幅下降，同时可削弱HBVcccDNA补充，间接影响HBeAg、HBsAg的表达及相关免疫。背景②①④③⑤HBVlifecycleRef:RobertP.Perrillo.Hepatology,2006;Vol.43,No.2,Suppl.1.Werle-Lapostolle,etal.Gastraenterology.2004;126:1750-1758.抗HBV与HBVcccDNA的关系递减递减感染自然史抗病毒治疗联合应答的概念和数字化联动分析是指带有应答数据链的抗HBV的多层次复合应答。联合应答有五个层次(内容)

●免疫学应答：乙肝二对半

●病毒学应答：

HBV-DNA●血清生化学应答：

肝脏功能检测

●肝组织学应答：

肝组织形态学检测

●基因应答：

AFP检测等

能量对比肝损伤比势

60-70年代80年代90年代2008年乙肝两对半检测方法学的进展（现状二）定性定量人们早已建立了根深蒂固的-/+临界效应的观念。这是一种静态效应的观念。定量数据信息已清楚地告诉我们：动态效应远比静态效应能更好地反映疗效的变化，能更好地指导治疗方案的调整。一、提出联合应答的科学概念，充分发挥“免疫学应答”在抗病毒治疗中的关键指导作用。二、根据病毒学应答及免疫学应答动态特征谱，建立全程数字化监测和联动分析模式。三、合理运用“数字化治疗”来深入优化现行的治疗方案，达到真正的个体化治疗，实现传统治疗难以达到的临床停药治愈终极目标。目标联合应答优化治疗组（Group1）ADVNaïveCHBpatients优化调整：W24HBVDNA＞1000cp/ml加用LAM优化单药：W24HBVDNA＜1000cp/ml继续ADVBLW24W48W144

设计病毒学应答优化治疗组（Group2）联合应答不佳调整当前用药病毒学突破调整当前用药病毒学应答不佳调整当前用药ElecsysHBs/eAg免疫及电化学反应系统

（应用多克隆的信号抗体和多种单克隆捕捉抗体）Elecsys技术已相当成熟，具有良好的特异性、灵敏性及稳定性!重要监测第一步：结合了活化的三联吡啶钌衍生物[Ru(bpy)3]2+

的抗HBsAg抗体和生物素化的抗HBsAg抗体与待测血清同时加入一个反应杯中。反应形成一个“三明治”样抗原-抗体复合物。第二步：将链酶亲和素包被的磁珠微粒加入反应杯中，再次孵育。第三步：将反应液吸入带电极板的检测池中，磁珠吸附在电极面上，未与磁珠结合的成分将被洗去。ECLIA工作流程第四步：电子供体TPA和钌分子在电极表面分别被氧化成自由三丙胺和三价钌，可将一个电子给三价[Ru(bpy)3]3+，使其形成激发态[Ru(bpy)3]2+。激发态[Ru(bpy)3]2+通过荧光机制衰减，发射出一个波长620nm的光子，重新生成基态的[Ru(bpy)3]2+。第五步：用光电倍增管检测发光强度，光强度与[Ru(bpy)3]2+的浓度呈线性关系,故可测出待测抗原的效应量。

在反应体系中表面抗原浓度不断增加时，线型上扬达到峰值后，迅速向下弯落。导致这种在高剂量区段出现既象钩又似镰的“异常线型”的现象，Miles称其为“HD-Hook”效应。Hook效应

通常待测样本的高剂量抗原，可使抗体呈饱和结合状态，其剂量反应曲线应呈平台状延伸。然而表面抗原不同，其剂量反应曲线的线型呈向下弯落的状态。

这是因为已形成的“三明治”样抗原抗体复合物，其抗原分子从固相的抗体上解离，在电化学反应中最终导致信号的压缩，甚至曲线的反向，形成“HD-Hook”效应峰值。抗原分子变构理论Hook效应包括“质”与“量”二个方面的影响。2.4Kb2.1Kb

质的影响：是指大分子蛋白质抗原可变构性的影响，是决定性的内因。其构型性决定簇是由几条肽链(非连续性)提供的氨基酸组合而成，比线性决定簇(连续性)的稳定性差，易发生变构。

量的影响：是指超量过剩抗原与被捕捉抗原在彼此竞争结合有限的标记抗体时，反会造成抗原抗体结合率下降，导致终信号衰减。

HBsAg

HBeAg质:构型性抗原表位(主)线性抗原表位(主)量:血清超高表达血清中低表达非稀释样本中＞1000COI的HBsAgHook效应值与＜1000COI的HBsAg非Hook效应值都能很好的反映治疗应答的特征性改变,以及与其它相关指标间的联动关系。主要指标：实现病毒学应答（定义为HBVDNA检测不到）

患者百分率；HBsAg及HBeAg/Ab应答特征值，

即均值、斜率。次要指标：HBeAg血清学转换、HBsAg血清学阴转患者百分率；ALT复常患者百分率；病毒学突破患者百分率。及时的治疗性干预迟来的挽救性治疗疗效评估研究人群基线特征结果实现病毒学应答患者百分率P=0.035P=0.041图1：HBeAg(+)治疗患者中，在144周Group1

比Group2

有更好的病毒学应答。图2：HBeAg(-)治疗患者中，在144周Group1

比Group2

有更好的病毒学应答。P＜0.001HBeAg(+)患者HBsAg、HBeAg/Ab的治疗应答特征值Group1Group2图1:120周起，Group1与Group2比，

HBsAg均值明显较低，另外Group1有峰值前移现象，且下降趋势即斜率更大。图2:

96周起，Group1与Group2比，HBeAg均值明显较低，且下降趋势即斜率更大。图2:随着治疗的进行，HBeAg连续性改变的同时HBeAb的定量特征值呈现对应改变。测不到HBeAg(-)患者HBsAg的治疗应答特征值图1：120周起，与Group2相比，Group1

的HBsAg均值明显较低，且其下降趋势即斜率更大。测不到P＜0.001LdT等治疗的数字化联合应答特征性对比出现病毒学突破患者百分率P=0.003P=0.036图1:HBeAg(+)治疗患者中，在144周Group1的病毒学突破患者百分率为2.55%，显著低于Group2的11.3%。图2:HBeAg(-)治疗患者中，在144周Group1的病毒学突破患者百分率为1.01%，显著低于Group2的4.9%。

临床核苷（酸）