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文档简介

DNS法测还原糖含量——3,5-二硝基水杨酸法目的掌握还原糖和总糖的测定原理，学习用比色法测定还原糖的方法原理

1.还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖。2.在NaOH和丙三醇存在下，DNS与还原糖共热后被还原生成氨基化合物，在过量的碱性溶液中此化合物呈桔红色，在一定范围内，还原糖的量与桔红色物质颜色的深浅成正比关系，利用分光光度计，在550nm波长下测定吸光度，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。3.由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。

反应化学方程式——桔红色黄色实验材料、主要仪器和试剂1、试剂（1）1mg/mL葡萄糖标准液

准确称取干燥恒重的葡萄糖100mg，加少量蒸馏水溶解后，以蒸馏水定容至100mL（2）3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂

将6.3gDNS和262mL2Mol/LNaOH溶液，加到500mL含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备用。（3）碘-碘化钾溶液（4）6mol/lNaOH（5）0.1%酚酞指示剂（6）6mol/lHCl溶液2、材料淀粉3、器材分光光度计，天平，水浴锅，电子万用炉，试管若干

锥形瓶（0.5g面粉+10ml盐酸+蒸馏水15ml）加热30min

检验水解是否完成（I-KI溶液）

冷却至室温后中和并定容到50ml

过滤取10ml于100ml容量瓶

取滤液又定容至刻度

（即为稀释50倍）三.总糖提取四、样品中含糖量的测定试剂空白还原糖总糖样品溶液/ml01.01.0蒸馏水/ml2.01.01.0水杨酸/ml1.51.51.5将各管溶液混合均匀后在沸水中加热5min，取出后立即用冷水冷却至室温，在向各管加入21.5ml蒸馏水，摇匀在波长为550nm处测定吸光度，并比对标准曲线得出糖的含量结果处理按下列公式计算样品中还原糖与总糖的百分含量：还原糖%=(m*100)/(M*1000)总糖%=（m*稀释倍数*0.9*100）/(M*1000

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