第十章 DNA的生物合成 - 佛山科学技术学院

DNA的生物合成一．选择题：单选题1．1958年Meselson和Stahl利用15N标记大肠杆菌DNA的实验首先证明了下列哪一种机制?

A．DNA能被复制

B．DNA基因可转录为mRNA

C．DNA基因可表达为蛋白质

D．DNA的半保留复制机制

E．DNA的全保留复制机制2．DNA以半保留方式进行复制，若一完全被标记的DNA分子置于无放射标记的溶液中复

制两代，所产生的4个DNA分子的放射性状况如何?

A．两个分子有放射性，两个分子无放射性

B．均有放射性

C．两条链中的半条具有放射性

D．两条链中的一条具有放射性

E．均无放射性3．将在14NH4C1作为唯一氮源的培养基中培养多代的大肠杆菌，转入含15NH4C1的培养基

中生成三代后，其各种状况的DNA分子比例应该是(LL代表两条轻链14N—DNA，HH

代表两条重链15N—DNA，L、H分别代表轻链，重链DNA)

A．3LH／1HH

B．6HH／2LH

C．15LL／1LH

D．7HH／1LH

E．1HH／7LH4．下列关于DNA的复制的叙述哪一项是错误的?

A．有DNA指导的RNA聚合酶参加

B．有RNA指导的DNA聚合酶参加

C．为半保留复制

D．以四种dNTP为原料

E．有DNA指导的DNA聚合酶参加5．DNA复制时下列哪一种酶是不需要的?A．DNA指导的DNA聚合酶B．DNA指导的RNA聚合酶C．连接酶D．RNA指导的DNA聚合酶E．拓扑异构酶6．DNA复制时，序列5ʹ—TpApGpAp—3ʹ将合成下列哪种互补结构?

A．5ʹ—TpCpTpAp—3ʹ

B．5ʹ—ApTpCpTp—3ʹ

C．5ʹ—UpCpUpAp—3ʹ

D．5ʹ—GpCpGpAp—3ʹ

E．5ʹ—ApCpTpAp—3ʹ7．合成DNA的原料是:

A．dAMP、dGMP、dCMP、dTMP

B．dATP、dGTP、dCTP、dTTP

C．dADP、dGDP、dCDP、dTDP

D．ATP、GTP、CTP、UTP

E．AMP、GMP、CMP、UMP8．下列关于大肠杆菌DNA聚合酶I的叙述哪一项是正确的?

A．具有3ʹ5ʹ核酸外切酶活性

B．具有5ʹ3ʹ核酸内切酶活性

C．是大肠杆菌主要的复制酶

D．经蛋白酶水解后的小片段称Klenow片段

E．以有缺口的双股DNA为模板

9．原核生物的DNA聚合酶

A．DNA聚合酶I是10种亚基组成的对称二聚体

B．DNA聚合酶Ⅱ有5ʹ3ʹ核酸外切酶活性

C．DNA聚合酶Ⅲ是真正起复制作用的酶

D，DNA聚合酶Ⅱ对复制中的错误进行校读

E．DNA聚合酶I的活性最高10．下列关于哺乳动物DNA复制特点的描述哪一项是错误的？

A．RNA引物较小

B．冈畸片段较小

C．DNA聚合酶、、、参与

D．不止一个复制起点

E．片断连接时，由ATP供给能量11．原核生物和真核生物的DNA复制

原核生物

真核生物

A．双向复制

多个复制单位

B．需RNA引物

不需引物

C．连续合成

分片段合成

D．DNA聚合酶I

DNA聚合酶Ⅱ

E．从5ʹ至3ʹ方向

从3ʹ至5ʹ方向12．DNA拓扑异构酶的作用是

A．解开DNA双螺旋使其易于复制

B．使DNA解链旋转时不致缠结

C．把DNA异构为RNA作为引物

D．辨认复制起始点

E．稳定分开的双螺旋13．DNA连接酶

A．使DNA形成超螺旋结构

B．使DNA双链中单链缺口的两个末端相连接

C．合成RNA引物

D．将双螺旋解链

E．去除引物、填补空缺14．DNA连接酶在下列哪一个过程中是不需要的？

A．DNA复制

B．DNA修复

C．DNA断裂和修饰

D．制备重组DNA

E．DNA重组15．DNA复制需要：①DNA聚合酶Ⅲ；②解链酶；③DNA聚合酶I；④DNA指导的RNA

聚合酶：⑤DNA连接酶。其作用的顺序是：

A．④、③、①、②、⑤

B．②、③、④、①、⑤

C．④、②、①、⑤、③

D．④、②、①、③、⑤

E．②、④、①、③、⑤16．复制起始最早需要或出现下列哪一组物质?A．冈崎片段、复制叉、DNA聚合酶ⅢB．DNA外切酶、DNA内切酶、DNA聚合酶IC．RNA引物、DNA拓扑异构酶、连接酶D．danB蛋白、引物酶、单链结合蛋白E．RNA酶、旋转酶、解链酶17．大肠杆菌DNA连接酶的作用需要A．GTP供能B．ATP供能C．NAD+参与D．NADPH参与E．cAMP参与18．在DNA复制中，RNA引物A．使DNA聚合酶Ⅲ活化B．使DNA双链解开C．提供5ʹ-P末端作合成新DNA链起点D．提供3ʹ-OH末端作合成新RNA链起点E．提供3ʹ-OH末端作合成新DNA链起点19．冈崎片段A．是因为DNA复制速度太快而产生B．由于复制中有缠绕打结而生成C．因为有RNA引物，就有冈崎片段D．由于复制与解链方向相反，在随从链生成E．复制完成后，冈崎片段被水解20．复制中，一个冈崎片段延长至另一个片段引物前方，引物被水解，A．两片段间出现待连接缺口B．引物原占据的位置留下缺口C．向两个方向双向复制至中点汇合D，剩下即DNA链的5ʹ-P和3ʹ-OH末端E．DNA连接酶立即起作用21．紫外线(UV)辐射使DNA分子最易形成的二聚体是

A．C—C

B．C—T

C．T—T

D．T—U

E．U—C22．紫外线照射引起DNA分子中形成的胸腺嘧啶二聚体

A．并不终止复制

B．为光修复酶系所修复

C．按移码突变阅读

D．由胸腺嘧啶二聚体酶所催化

E．由两股互补核苷酸链上胸腺嘧啶之间形成共价键23．切除修复需几种酶的共同作用：①DNA聚合酶I；②DNA连接酶；⑧核酸内切酶。三种酶的工作顺序为

A．③、①、②

B．①、②、③

C．②、③、①

D．③、②、①

E，①、③、②24．下列哪种突变可引起读码框移

A．转换或颠换

B．颠换

C．点突变

D．缺失

E．插入3个或3的倍数个核苷酸25．关于突变的正确描述是：

A．是由有害因素引起有害后果

B．反映遗传的保守性

C．自发(自然)突变频率极低，可以忽略

D．突变一定使生物功能受损

E．有突变才有进化26．与DNA修复过程缺陷有关的疾病是

A．着色性干皮病

B．卟啉病

C．黄疸

D．黄嘌呤尿症

E．痛风27．着色性干皮病是人类的一种遗传性皮肤病，该病的分子基础是：

A．细胞膜通透性缺陷引起迅速失水

B．在阳光下使温度敏感性转移酶类失活

C．受紫外线照射诱导了有毒力的前病毒

D．细胞不能合成类胡萝卜素型化合物

E．患者缺乏核酸内切酶，DNA损伤修复功能差28．参与原核生物DNA损伤修复的酶是A．DNA聚合酶ⅢB．DNA聚合酶ⅡC．DNA聚合酶ⅠD．拓扑异构酶ⅠE．拓扑导构酶Ⅱ29．点突变(碱基错配)可以引起A．mRNA降解B．DNA复制停顿C．读码框移D．氨基酸置换E．氨基酸缺失30．指出下列关于突变的不正确的说法A．颠换是点突变的一种形式B．插入可引起移码突变

C．倒位指DNA内部一段方向反置D．缺失也可引起移码突变E．颠换属于倒位的一种形式31．DNA聚合酶催化的反应不包括

A．催化引物3ʹ-OH与三磷酸脱氧核苷的-磷酸基反应

B．催化延长中DNA3ʹ-OH与三磷酸脱氧核苷的-磷酸基反应

C．催化双链DNA中单链缺口3ʹ-OH与三磷酵脱氧核苷的-磷酸基反应

D．切除复制中错配的核苷酸

E．切除引物和突变的DNA片段32．参与DNA复制的物质不包括A．DNA聚合酶B．解链酶、拓扑酶C．模板、引物D．光修复酶E．单链DNA结合蛋白33．关于DNA复制的延长正确的是

A．随从链的延长是连续的B．原核生物的冈崎片段最多可达数百个核苷酸C．引物酶分段生成RNA引物使随从链不连续

D．滚环复制起始也需引物

E．滚环复制以开环的一股作模板34．从DNA模板上能直接合成下列哪种物质?

A．阻遏物

B．mRNA

C．蛋白质

D．诱导剂

E．辅阻遏物35．DNA复制中辨认起始位点主要依赖于

A．DNA聚合酶I

B．拓扑酶

C．解链酶

D．引发体

E．DNA聚合酶Ⅱ36．紫外线照射对DNA分子的损伤主要是

A．引起碱基替换

B．导致碱基缺失

C．发生碱基的插入

D．出现磷酸酯键的断裂

E．DNA分子中形成共价连接的二聚体37．DNA聚合酶Ⅱ

A．具有3ʹ5ʹ核酸外切酶活性

B．具有5ʹ3ʹ核酸内切酶活性

C．是唯一参与大肠杆菌DNA复制的聚合酶

D．dUNP是它的一种作用物

、

E．用4种脱氧核苷作底物38．DNA复制时，序列5ʹ-GpApGpGp-3ʹ合成下列哪种互补结构

A．5ʹ-CpCpTpCp-3ʹ

B．5ʹ-ApTpCpTp-3ʹ

C．5ʹ-UpCpUpAp-3ʹ

D．5ʹ-GpCpGpAp-3ʹ

E．3ʹ-TpCpTpGp-3ʹ39．某DNA双链，其中一股的碱基序列是5ʹ-AACGTTACGTCC-3ʹ，另一股应为

A．5ʹ—TTGCAATGCAGG—3ʹ

B．5ʹ—GGACGTAACGTT—3ʹ

C．5ʹ—AACGTTACGTCC—3ʹ

D．5ʹ—AACGUUACGUCC—3ʹ

E．5ʹ—UUCGAAUCGACC—3ʹ40．关于DNA聚合酶I正确的是

A．含量最少

B．能被水解成K1enow片段

C．含10种亚基

D．活性最高

E．是复制酶41．DNA复制时，以5ʹTAGA3ʹ为模板，合成产物的互补结构为

A．5ʹTCTA3ʹ

B．5ʹUCUA3ʹ

C．5ʹATCT3ʹ

D．5ʹAUCU3ʹ

E．5ʹGCGA3ʹ42．紫外线对DNA的损伤主要是A．引起碱基置换B．导致碱基缺失C．发生碱基插入D．使磷酸二酯键断裂E．形成嘧啶二聚物

X型题：43．DNA的半保留复制A．只用一股单链作模板B．只用外显子作复制模板C．两股链各自作模板复制D．只把遗传信息的一半传给下一代44．DNA拓扑异构酶

A．有水解酶的作用

B．有解开双链DNA的直接作用

C．作用于复制整个过程

D．拓扑酶I和Ⅱ都需要ATP45．DNA聚合酶ⅢA．存在于真核生物中B．是线粒体合成DNA的酶C．能辨认引物D．有核酸外切酶作用46．冈崎片段A．在电子显微镜下可观察到B．是在DNA转录过程中出现的C．是RNA链D．代表未完成的复制过程47．点突变包括

A．转换

B．颠换

C．倒位

D．框移48．嘧啶二聚体

A．由相邻的两个核苷酸形成

B．由紫外线照射引起

C．碱基之间形成共价键

D．是一种插入突变49．基因表达是指

A．DNA通过复制把遗传信息传给下一代

B，细胞的有丝分裂

C．细胞内遗传信息指导蛋白质的合成

D．包括转录和翻译过程50．SOS修复

A．是准确性差的修复方式

B．可以完全修复DNA的损伤

C．专用于嘧啶二聚体的修复

D．需要DNA聚合酶51．机体对DNA损伤后修复方式有

A．切除修复

B．光复活

C．重组修复

D．热复活52．关于复制起始的叙述正确的是A．原核或真核细胞复制均可出现复制叉

B．引发体在随从链每一次的引物合成中起作用

C．真核生物有多个复制单位

D．负超螺旋比正超螺旋有更好的模板作用53．DNA损伤的修复包括

A．光修复酶催化使嘧啶二聚体复原为两个核苷酸

B．切除修复过程

C．RecA蛋白、PolI、连接酶参与的重组修

D．调控蛋白LexA参与的SOS修复54．关于真核生物的DNA聚合酶正确的是

A．δ-DNA聚合酶与复制作用有关

B．—DNA聚合酶与修复作用有关

C．γ-DNA聚合酶与线粒体DNA复制作用

D．—DNA聚合酶与复制作用有关55．参与DNA复制的酶包括

A．引物酶B．拓扑酶ⅡC．PolⅡD．DNA连接酶56．DNA复制的保真性是指A．rep蛋白与SSB的协调作用B．子链加入的核苷酸与母链相应的核苷酸配对C．聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能D．即时校读功能57．关于解开DNA超螺旋双螺旋结构的叙述正确的是A．rep蛋白的解链方向沿3ʹ5ʹ移动B．解旋酶重的解链方向沿5ʹ3ʹ移动C．拓扑酶I切断双链中的一股，不需ATPD．SSB的作用能稳定，保护双链DNA58．关于拓扑酶的叙述正确的是A．拓扑酶I的催化反应不需ATPB．拓扑酶Ⅱ的催化反应需要ATPC．拓扑酶I能切断DNA双链中的一股D．拓扑酶Ⅱ能切断DNA双链中的双股59．DNA模板可直接用于A．转录B．翻译C．复制D．核苷酸合成60．下列关于DNA复制的叙述哪些是正确的?A．互补链的合成方向是5ʹ3ʹB．DNA聚合酶沿母链滑动方向从3ʹ5ʹC．两条链同时复制D．真核细胞的每个染色体的复制只有一个起点61．下列有关DNA聚合酶作用的叙述哪些是正确的?A．酶I在DNA损伤的修复中发挥作用B．酶Ⅱ是DNA复制的主要酶C．酶Ⅲ是DNA复制的主要酶D．酶Ⅳ在DNA复制时有切除引物的作用62．DNA聚合酶I具有

A．5ʹ3ʹ外切酶活性

B．3ʹ5ʹ外切酶活性

C．5ʹ3ʹ聚合酶活性

D．3ʹ5ʹ聚合酶活性63．DNA聚合酶I的作用有

A．修复DNA的损伤

B．合成复制所需的引物

C．填补合成片段间的空隙

D．连接片段间的缺口64．DNA聚合酶Ⅲ催化的反应

A．以单磷酸核苷为底物

B．待合成的链应有自由3ʹ-OH

C．以NAD+为辅酶

D．生成磷酸二酯键65．DNA拓扑异构酶在复制中的作用是

A．能切断DNA双链的某一部位造成缺口

B．能合成引物RNA

C．使超螺旋结构变为松弛型D．有外切酶的活性66．与DNA复制起始有关的酶是

A．解链酶

B．引物酶

C．polⅡ

D．连接酶67．DNA复制的特点是

A．半保留复制

B．需合成RNA引物

C．形成复制叉

D．有不连续性68．需要DNA连接酶参与的反应为

A．DNA复制

B，DNA损伤修复

C．DNA的体外重组

D．RNA的转录69．大肠杆菌的DNA复制

A．半保留复制

B．双向复制

C．生成冈崎片段

D．需RNA引物70．原核生物和真核生物的DNA聚合酶

A．都以dNTPs作底物

B．都需RNA引物

C．都沿5ʹ至3ʹ方向延长反应

D．都有3种DNA聚合酶I、Ⅱ、Ⅲ71．哪些是可用于合成DNA的模板A．DNAB，嗜菌体单链DNAC．RNAD．蛋白质72．哺乳动物DNA复制

A．DNA聚合酶有α、β、γ、δ等种类B．有多个复制起始点C．复制的延长速度相对慢D．生成冈崎片段较短73．参与复制中解链，解旋的酶和蛋白质有A．解链酶B．单链DNA结合蛋白C．DNA拓扑异构酶D．DNA连接酶74．DNA复制的延长过程中，会有下列哪些现象出现

A．生成磷酸二酯键

B．合成RNA引物

C．生成冈崎片段

D．核糖体聚合75．下列哪些酶参加DNA复制的延长过程?A．DNA聚合酶ⅢB．限制性内切酶C．引物酶D．逆转录酶76．冈崎片段A．有自由的3ʹ-OHB．是DNA合成中的不连续复制片段C．是一位日本学者发现的D．是由于复制方向与解链方向相反造成的77．DNA复制的RNA引物

A．保留为新链一部分

B．RNA酶水解引物

C．水解后留下空隙由DNA聚合酶Ⅱ催化dNTP加入填补

D．最后剩下的缺口由连接酶接合78．DNA连接酶催化的反应

A．在两股单链DNA互补碱基之间形成氢键

B．需ATP供能或NAD+参与

C．使复制中的RNA引物和冈崎片段相互聚合

D．在相邻的冈崎片段3ʹ-OH和5ʹ-P生成磷酸二酯键79．下列哪些改变是点突变的颠换

A．A—G

B．G—A

C．C－T

D．A—T80．框移突变可由3.2变引起

A．转换同型碱基

B．缺失

C．颠换异型碱基

D．插入81．切除修复过程需要下列哪些酶参加

A．核酸内切酶

B．核酸外切酶

C．DNA聚合酶I

D．DNA连接酶82．亚硝酸盐致突变的作用是

A．抑制DNA解链酶

B．引起移码突变

C．抑制DNA聚合酶

D．改变碱基配对83．某基因能转录，翻译出蛋白A．现在基因DNA发生突变，结果无蛋白A生成。这种

突变类型很可能是

A．终止突变

B．同型碱基转换

C．移码突变

D．异型碱基颠换84．镰状红细胞贫血由基因突变可引起血红蛋白链的6号氨基酸变异(谷氨酸一缬氨

酸)在检测其基因和基因表达中，会发现哪些分子有异常?

A．DNA

B．hnRNA

C．mRNA

D．5SrRNA85．胸腺嘧啶二聚体

A．由紫外线照射引起B．首先用外切酶修复C．若不能修复，可引起着色性干皮病D．可在DNA双链之间形成共价结合86．将DNA核苷酸顺序的信息转变成为氨基酸顺序的过程包括A．复制B．转录C．反转录D．翻译二．填空：

1．参加DNA复制的酶有_____________，____________，__________，____________和______________。2．DNA聚合酶I是多功能酶，它具有下列三种酶活性：①_________________________，②______________________

，③_______________________。3．大肠杆菌DNA复制中，polⅠ的作用是____________，____________和____________；polⅢ的作用是______________。

4．在DNA复制解链过程中，需ATP供能的酶是______________和

______________。5．原核细胞DNA连接酶作用时需要消耗___________；真核细胞DNA连接酶作用时需要消耗_____________。

6．DNA复制时模板的方向是________，双股DNA两条链相反，故复制时一条链为连续合成，链延长的方向是________，此链称为__________，另一条链指导的DNA合成为________合成，此链称为__________，其中片段又名为___________，后者需经__________酶将各段连接才能形成整条链。

7．DNA复制的保真性依赖的机制是______________________，____________________和____________________________________。

8．DNA分子的突变方式有______________，________________，__________________和____________________。

9．紫外线照射时，最常见的是引起核苷酸链上相邻的____________形成__________，光修复时，________________酶可使该种受损伤的DNA完全恢复正常。

10．DNA损伤的切除修复需要的酶按作用顺序为：①______________，②____________，③________________

11．基因就是_________________________________________，它以__________________的方式，贮存着生物体内所有的遗传信息。

12．DNA复制中所需要的引物由________________催化合成，而________________则能与解开双螺旋的DNA单链结合，防止单链重新形成双螺旋。

13．RNA病毒能以____________为模板，由________________酶催化，以dNTP为原料，合成____________，此作用称为____________________。

三、名词解释：1．基因表达2．半保留复制3．冈崎片段4．切除修复5．逆转录6．滚环复制

四、问答题(一)参与DNA复制的主要物质有哪些?各自的功能如何?(二)简述DNA的复制过程。(三)何谓DNA损伤?生物体如何修复损伤参考答案选择题1．D

2．A

3．B

4．B

5．D

6．A

7．B

8．A

9．C

10．C11．A

12．B

13．B

14．C

15．E

16．D

17．C

18．E

19．D

20．B21．C

22．B

23．A

24．D

25．E

26．A

27．E

28．C

29．D

30．E31．C．32．D

33．C

34．B

35．D

36．E

37．A

38．A

39．B

40．B41．A

42．E

43．C

44．AC

45．CD

46．AD

47．AB

48．ABC

49．CD

50．AD

51．ABC52．ABCD

53．ABCO

54．ABCD

55．ABD

56．BCD

57．ABC

58．ABCD

59．AC

60．ABC

61．AC

62．ABC

63．AC

64．BD

65．AC

66．AB

67．ABCD

68．ABC

69．ABCD

70．ABC

71．ABC

72．ABCD

73．ABC

74．ABC

75．AC

76．ABCD

77．BD

78．BD

79．D

80．BD

81．ABCD

82．D

83．AC

84．ABC

85．AC

86．BD二、填空题1．DNA聚合酶

解链酶

引物酶

拓扑异构酶

DNA连接酶

2．5ʹ3ʹ聚合酶活性

5ʹ3ʹ核酸外切酶活性

3ʹ5ʹ核酸外切酶活性3．去除引物

校正错误

填补空隙

参与复制4．解链酶

拓扑异构酶5．NAD+

ATP6．3ʹ5ʹ

5ʹ3ʹ

领头链

不连续

冈崎片段

DNA连接酶

随从链7．遵守严格的碱基配对规律

聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能

复制中出错时有即时的校读功能

8．点突变

碱基插入

碱基缺失

倒位9．两个胸腺嘧啶

二聚体

光修复10．特异核酸内切酶

polI

DNA连接酶11．DNA大分子的各个功能片段

碱基排列顺序12．RNA

逆转录

DNA

逆转录

三、名词解释

1．从DNA到蛋白质．通过转录和翻译，用基因的遗传信息在细胞内合成有功能意义的各种蛋白质。

2．DNA进行复制时，双螺旋结构解开，以两股单链分别作为模板，dNTP．(dATP，dGTP，dCTP，

dTTP)为原料，按照碱基配对(A—T，G—C)的原则与模板上的碱基相配对，经依赖DNA的DNA聚

合酶催化，合成一条与模板互补的新链，新形成的两个子代DNA与亲代DNA结构完全相同，但子代

DNA分子中一条链来自亲代，另一条链是新合成的，故称为半保留复制。遗传信息可忠实地从亲代传给子代。

3．DNA复制时，随从链上不连续合成的许多DNA片段。原核生物冈崎片段大小在一至二千核苷酸范围，真核生物冈崎片段较短，只有一、二百至数百个核苷酸。

4．DNA．损伤修复时，将受损的或错配的碱基切除，然后通过局部的DNA复制，用正确的碱基来填补切除后所留下

的空隙，切除修复是一个酶促反应过程，需特异核酸内切酶，DNA聚合酶重和连接酶参与。

5．遗传信息从RNA流向DNA，即以RNA为模板，dNTP为原料，在RNA指导的DNA聚合酶催化下，合成DNA的过程。

6．环状DNA复制可采用滚环复制的方式，环状DNA双股链先开一个缺口，5ʹ—端向外伸展，在伸展出的单链上进行不连续复制。没有开环的另一股，则可以一边滚动一边进行连续复制。两股链均可直接作为模板，不需要引物。

四、问答题：(一)参与复制的物质包括：模板、底物(dNTP)、依赖DNA的DNA聚合酶(DNA聚合酶)、引物酶和引物、解链酶、

DNA拓扑异构酶(拓扑酶)、单链DNA结合蛋白(SSB)、DNA连接酶等。其功能分述如下：

1．模板：是需要进行复制的DNA，母链DNA经解链作用分成单股便可作为模板。

2．底物：四种脱氧核苷三磷酸，即dATP，dGTP，dCTP，dTTP。

3．DNA聚合酶：见本章第一题。

4．引物酶和引物：DNA复制是在一段RNA引物的基础上加进脱氧核苷酸的。催化引物合成的是一种RNA聚合酶，又称引物酶。

由于DNA聚合酶没有催化两个游离的dNTP聚合的能力，只能在引物的3ʹ-端开始合成DNA链。引物酶能催化游离的NTP聚合生成一段短的RNA，并提供3ʹ-OH末端供dNTP加入，RNA引物的生成也需要模板。

5．解链酶：模板DNA作为复制的“指导”是碱基部分，由于DNA的双螺旋结构，碱基埋在双螺旋内部。只有打开氢键将DNA

解成单链，才能复制。大肠杆菌中发现的解链酶包括rep蛋白(解链酶)、解旋酶Ⅱ。rep蛋白的解链方向与复制方向一致，

即沿领头链模板方向(3ʹ5ʹ)移动，解旋酶Ⅱ的解链方向与复制方向相反，以5ʹ3ʹ方向移动，负责随从链的解链。

6．拓扑酶：DNA在复制时，首先需要将两条链解开，因而会产生扭曲张力。DNA双螺旋沿轴旋绕，复制解链沿同一轴反向旋转，

所以在复制时爹高速反向旋转的DNA分宁易造成下游缠绕打结。当DNA的一条链有一个切口时，即自发转变成松驰态。拓扑酶

可切断DNA分子并再连接，其作用是水解或连接DNA分子的3ʹ，5ʹ磷酸二酯链。

拓扑酶有I、Ⅱ两类；

拓扑酶I能切断DNA双链中一股并再连接，反应不需ATP供能；

拓扑酶Ⅱ能使DNA双链同时发生断裂和再连接，需ATP供能使DNA进入负超螺旋。

7．SSB：SSB的作用是维持作为模板的单链DNA的稳定状态(不易形成双链)和保护DNA模板免受核酸酶降解。SSB的作用方式

是随着DNA分子的解链，能不断的结合、解离、且SSB间有正协同效应。

8．DNA连接酶：DNA连接酶可以连接DNA链3ʹ-OH末端和另一DNA链的5ʹ-磷酸末端，形成3ʹ，5ʹ磷酸二酯链。该反应在原核、真核细胞分别消耗NAD+、ATP。DNA连接酶在DNA复制、修复、重组、剪接中均起缝合缺口作用。是基因工程的重要工具酶。

(二)DNA的复制过程可分为复制的起始、复制的延长和复制的终止三个阶段。

1．复制的起始：

①起始点辨认：复制起始点的辨认由构成引发体的蛋白因子识别。

②DNA双股解成单股：由DNA解链酶、拓扑酶、SSB配合进行(见二题)形成复制叉。

③引物生成：领头链与随从链分别由引发体中引物酶催化合成引物，随从链在复制中需

多次生