企业电子商务和云计算应用探讨 里面值得借鉴

序资源利用率最大化降低能耗，构建低碳社会电子商务，云计算能带给我们什么？1目录

电子商务的现状及市场数据分享

服装产品电子商务运营模式探讨

SPA型企业电子商务中的关注点

云计算与电子商务应用上的结合

公有云与私有云在企业中的应用◆ 电子商务的现状及市场数据分享2电子商务的现状及市场数据分享-网络经济占GDP的比重呈上升趋势，Q2到达0.43%-Q2网络经济同比增速达55.9%,远高于同期GDP、社会零售总额增速3-2021Q2电子商务同比增长达27.6%,网络经济主要动力-预计未来五年,网络零售年平均复合增长率将到达95%电子商务的现状及市场数据分享(续一)4网络购物用户数(万人)增长率%网购用户占互联网民比重%3.8亿28.4%电子商务的现状及市场数据分享(续二)5电子商务的现状及市场数据分享(续三)指标属性占比

指标属性占比性别男58.0%

个人月收入500元以下18.3%女42.0%500～<1000元7.8%年龄18岁以下1.0%1000～<1500元11.9%18～24岁44.8%1500～<2000元14.1%25～30岁33.3%2000～<2500元11.7%31～35岁11.4%2500～<3000元10.4%36～40岁5.2%3000～<4000元9.7%40岁以上4.3%4000～<5000元6.2%学历高中(中专)以下2.6%5000～<6000元3.8%高中(中专)11.6%6000～<10000元4.2%大学专科32.6%10,000元以上1.8%大学本科43.0%

硕士9.2%婚姻未婚64.1%博士及以上1.0%已婚35.9%2021年网购用户属性特征统计62021-2021年中国网购用户最常购置商品分类分布图电子商务的现状及市场数据分享(续四)7电子商务的现状及市场数据分享(续五)亿元8电子商务的现状及市场数据分享(续六)亿元9电子商务的现状及市场数据分享(续七)10目录

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公有云与私有云在企业中的应用◆ 服装产品电子商务运营模式探讨11服装产品电子商务运营模式探讨12服装产品电子商务运营模式探讨(续一)13服装产品电子商务运营模式探讨(续二)14服装产品电子商务运营模式探讨(续三)15服装产品电子商务运营模式探讨(续四)16同样是互联网服装零售商，作为PPG的跟随者VANCL，成功之处在哪里？创始人团队的外乡互联网消费心理学经验； PPG:美国的目录销售及美国消费者的消费习惯 VANCL:国内成功互联网团队和传统服装业团队(卓越,PPG,红孩子， 海澜之家，传统服装业)，正在建设品牌团队和垂直行业平台产品设计和品质控制，物流供给链建设； PPG:产品单一，品控缺乏行业专家，仓储物流外包效劳跟不上 VANCL:产品线相对丰富，有服装行业人才，自建仓储物流体系市场推广活动的方法，及广告的投入产出比； PPG:2亿元的媒体广告，希望引导非网民成为网购消费者 VANCL:互联网广告，1/10本钱，消费者受众针对性强服装产品电子商务运营模式探讨(续五)17

2008年9月份创立并正式投入运营；

2009年末团队90+人，销售额5千万；

2010年1月得到红衫资本800万美元投资；

2010年3月实体体验店在北京世贸天阶开业；目前团队人数达200+，2010年销售额将突破1亿。创业团队三角模式：产品+营销+技术孙弘： 服装行业工作10余年，对设计、生产、效劳、供给链管理各个 环 节有丰富经验并拥有服装行业大量资源；张树略: 前新浪高管，对网络营销、数据库营销、CRM管理、SEO优化、 用户行为分析等有丰富经验；季斌: 新浪某子公司CTO,擅长技术开发，IT系统运营管理服装产品电子商务运营模式探讨(续六)18服装产品电子商务运营模式探讨(续七)19“广义的商品〞而不是“狭义的IT〞承载商品的载体承载和传递商品的载体集，涉及到对渠道体系的搭建以及商品在渠道媒介上的有效呈现(apple)对具体商品的描述具体商品购置页面的结构，以及商品属性、价格以及促销的显示与商品购置相关联的效劳在消费者购置商品过程中的客户效劳，包括咨询，互动，配送等过程商品本身的属性是“商品〞概念中最核心的，即商品本身的款式，功能，面料，做工等，以及品牌附加值等完整的“商品〞概念服装产品电子商务运营模式探讨(续八)20服装产品电子商务运营模式探讨(续九)21服装产品电子商务运营模式探讨(续十)22目录

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公有云与私有云在企业中的应用◆ SPA型企业电子商务中的关注点23SPA:自有品牌服装专卖零售商(SpecialityStoreRetailerofPrivateLabelApparel)SPA型企业电子商务中的关注点线上商品价格与线下实体店价格的策略线上商品品类与线下实体店品类的规划运营组织体系以及供给链的共用与分割线上会员与线下会员的整合与营销方法品牌推广及市场活动的线上和线下互补现有信息系统和环境面对电子商务改造24目录

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公有云与私有云在企业中的应用◆ 云计算与电子商务应用上的结合25☆SaaS,SoftwareasaService软件效劳☆PaaS,PlatformasaService平台效劳☆IaaS,InfrastructureasaService根底实施效劳云计算与电子商务应用上的结合26亚马逊Amazon:简单数据库(SimpleDB,SDB)消息传递(SimpleQueueService,SQS)弹性计算云(ElasticComputeCloud,EC2)简单存储效劳(SimpleStorageService,S3)谷歌Google:应用程序引擎(GoogleAppEngine,GAE)它是PaaS应用的典型代表,AppEngine方便用户开发新的效劳逻辑，并且在云计算平台上运行这些新的效劳。微软的Office365，含Office、在线SharePoint、在线Lync、在线ExchangeSalesForce的CRM，IBM“蓝云〞计算平台，世纪互联的CloudEX云主机360云杀毒,搜狗云输入法，QQ云输入法，百度在线输入法等中国电信的云存储效劳，中国移动BigCloud，联通的云联云方正虹云，印刷企业色彩管理数据计算、数据转换和存储云计算与电子商务应用上的结合(续一)27云计算与电子商务应用上的结合(续二)28数据归属权/平安 托管公司把数据出售给这家公司的竞争对手会怎 么样？托管公司决定挖掘数据中的电子邮件和用 户重要信息怎么办？数据的高可用性 网站中断对于在云计算中托管重要任务的应用程 序的时候该怎么办？选择一个IaaS平台中的存储效劳或数学/图形等计算效劳选择一个有Oracle/DB2效劳或某个中间件的PaaS平台选择一个SaaS模式的在线商城、在线客户效劳系统等云计算与电子商务应用上的结合(续三)29目录

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公有云与私有云在企业中的应用◆ 公有云与私有云在企业中的应用30公有云与私有云在企业中的应用公有云(PublicCloud)公有云又称外部云,第三方供给商可以用公有云的形式提供个性化的软件、硬件效劳，并按用户的使用情况收费。私有云(PrivateCloud)企业自建，可以放在数据中心的防火墙内，或者也可以将它们部署在一个平安的主机托管场所，并且为其专用.31公有云与私有云在企业中的应用(续一)公有云私有云数据安全性★节省前期投入★高可用性★小企业适用性★技术成熟性★公有云私有云与现有资源的兼容性★中国云计算应用的突破口★资源利用率和节能减排★对现有IT流程的影响★32公有云与私有云在企业中的应用(续二)公有云应用举例：

IDC的虚拟主机，网络存储；第三方网上商店系统，VIP会员管理系统；

e-Learning系统；在云计算中心的中间件上定制一些应用，例如电子商务；

ORACLEPeopleSoft等系统。私有云应用举例：采用虚拟化、负载均衡等技术实现的效劳器资源池，网络带宽在各种应用中(应用系统，语音及视频，互联网访问等)的动态分配；效劳器+瘦终端方式的办公软件应用。33公有云与私有云在企业中的应用(续三)产品设计产品生产产品销售客户效劳APPLE,SPACoca-Cola,KFCWal-Mart,苏宁淘宝,eBay在供给链上的任何环节占主导地位的企业可以尝试合作伙伴私有云客户34结束QA&作为一名雇员的企业责任：降低本钱提高效率创造利润作为一个公民的社会责任：节能减排低碳生活保护环境本文观看结束！！！谢谢欣赏！5-Aza-CdR对人食管癌细胞株生物学行为及TFPI-2mRNA表达的影响5-Aza-CdR对人食管癌细胞株生物学行为及TFPI-2mRNA表达的影响杜雅冰，邵应举，樊青霞，孙桢，王琳，赵培荣作者单位：(郑州大学第一附属医院肿瘤内科，河南郑州450002)【摘要】目的探讨5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2-deoxycytidine,5-Aza-CdR)干预对食管鳞癌细胞株Eca9706生长增殖及其组织因子途径抑制物2(tissuefactorpathwayinhibitor-2，TFPI-2)基因表达的影响。方法选取食管鳞癌细胞株Eca9706，并用不同浓度的5-Aza-CdR处理该细胞株。MTT法检测干预前后细胞增长率的变化，FCM法检测干预前后细胞凋亡率的变化，RT-PCR技术检测干预前后Eca9706细胞TFPI-2基因mRNA的表达，免疫组化检测干预前后Eca9706细胞TFPI-2蛋白的表达。结果食管鳞癌细胞株Eca9706存在TFPI-2基因超甲基化状态，经5-Aza-CdR处理后，超甲基化状态解除，细胞增殖受到抑制，细胞凋亡率明显提高(P<0.05);细胞中TFPI-2蛋白表达明显增强，同时mRNA的表达水平也较处理前明显提高(P<0.05)。结论食管癌细胞系TFPI-2基因超甲基化可抑制其mRNA表达，当其超甲基化解除后，细胞增殖受到抑制，同时细胞凋亡率相应提高。【关键词】食管癌;组织因子途径抑制物-2;5-氮杂-2-脱氧胞苷;甲基化;免疫组化;逆转录聚合酶链反响;凋亡ABSTRACT：ObjectiveToexploretheeffectsof5-Aza-2-deoxycytidine(5-Aza-CdR)interventiononthegrowthandproliferationofEca9706celllineandproteinexpressionoftissuefactorpathwayinhibitor-2(TFPI-2).MethodsEca9706celllinewastreatedby5-azaCdRofdifferentconcentrations;MTT，flowcytometry，immunohistochemistryandRT-PCRwereusedtodeterminethecellgrowth，apoptosis，andtheexpressionofTFPI-2geneanditsprotein.ResultsEca9706celllinehadhypermethylationofTFPI-2.Afterdemethylationby5-Aza-CdRtreatment，theproliferationofEca9706wasinhibited，theapoptosisratewasalsoincreasedsignificantlyintheconcentration-dependentmanner.RT-PCRdetectedthatmRNAexpressionofTFPI-2geneinEca9706celllinerecoveredsignificantly(P<0.05).Conclusion5-Aza-CdRcanslowthegrowthofEca9706cell，increasetheapoptosisrate，reactivatetheTFPI-2genetranscriptionandproteinexpressionbydemethylation.KEYWORDS：esophagealcarcinoma;tissuefactorpathwayinhibitor-2;5-Aza-CdR;methylation;immunohistochemistry;RT-PCR;apoptosis组织因子途径移植物2(tissuefactorpathwayinhibitor，TFPI-2)是丝氨酸蛋白酶抑制物，在调控肿瘤细胞浸润转移方面起着重要作用。目前，关于TFPI-2在食管癌中的基因表达情况的分析研究尚少。本研究旨在探讨TFPI-2基因的失活机制，并寻找食管癌治疗的新靶点。1材料与方法1.1材料RPMI-1640培养基购自北京索莱宝生物科技;标准胎牛血清购自天津市灏洋生物制品科技;Trizol试剂购自MBI公司;RT-PCR试剂盒购自MBI公司;5-Aza-CdR购自Sigma公司;人食管癌细胞株Eca9706由郑州大学肿瘤生物学研究室惠赠。1.2细胞培养和药物处理人食管癌细胞Eca9706以含10mL/L胎牛血清的RPMI-1640培养基，37℃、50mL/LCO2培养箱培养，每2～3d消化传代1次。1.3MTT法检测干预前后细胞增长率的变化取对数生长期细胞，调整密度至5×104/mL接种于96孔板，按5-Aza-CdR浓度分为6组：0、0.4、1.6、6.4、25.6、102.4μmol/L，每组复设5个孔。待细胞贴壁后，分别于24、48、72h后参加MTT液，4h后弃去上清液，每孔加DMSO150μL，在490nm波长测定各孔吸光度值(absorbance，A)。细胞增殖抑制率(cellularproliferationinhibitionrate，CPIR)按公式计算：CPIR=(1-实验组A均值/对照组A均值)×100%。1.4流式细胞仪(FCM)检测干预前后细胞凋亡率的变化取对数生长期细胞，按5×105/mL的密度接种于6孔板内，待细胞贴壁后加药，分组如下：对照组(0μmol/L),1.6μmol/L5-Aza-CdR组，25.6μmol/L5-Aza-CdR组，102.4μmol/L5-Aza-CdR组。每组均于5-Aza-CdR作用48h后消化收集细胞，700mL/L冰乙醇固定，流式细胞仪进行细胞凋亡测定。1.5RT-PCR技术检测TFPI-2基因mRNA的表达分组同FCM，每组细胞均5-Aza-CdR作用48h。TFPI-2的上、下游引物分别为5′-GTCGATTCTGCTGTTTTCC-3′和5′-ATGGAATTTTCTTTGGTGCG-3′，合成产物为440bp;β-actin作为内参照，上下游引物分别为5′-AGGCATTGTGATGGACTCCG-3′和5′-AGTGATGACCTGGCCGTCAG-3′，合成产物为301bp。按照试剂盒说明书，用Trizol试剂提取细胞总RNA，经紫外分光光度计分析后，按Sigma公司RevertAidFirstStrandcDNASynthesisKit说明书操作。先逆转录制备单链cDNA，再以逆转录产物为模板，用上、下游产物进行PCR反响扩增目的基因。反响条件为：94℃预变性3min，然后94℃变性30s,51℃退火30s,72℃延伸30s，循环30次，最后72℃延伸5min,4℃保温。扩增片段经20g/L琼脂糖凝胶电泳鉴定。1.6免疫组化方法检测TFPI-2蛋白的表达取对数生长期细胞，按5×104/mL的密度接种于经预处理的盖玻片上，待细胞贴壁后加药(分组同RT-PCR)。培养48h后参加40g/L多聚甲醛溶液固定30min,30mL/LH2O2封闭内源性过氧化物酶，室温下10min,100mL/L动物血清封闭，室温下10min，滴加1∶100的稀释的TFPI-2抗体4℃过夜，二抗室温下1h，滴加辣根酶标记链霉卵白素，37℃孵育30min，DAB显色，苏木精复染，脱水透明封片。另取爬片滴加PBS液代替一抗作为阴性对照。结果判定：TFPI-2蛋白阳性信号均呈棕黄色颗粒样物质，位于细胞质内。光镜下随机选取10个视野(每个视野观察细胞数不少于100个)，按阳性细胞所占百分比进行结果判定。阳性率=(阳性细胞数/1000)×100%。1.7统计学处理应用SPSS16.0软件进行统计学处理。实验数据采用均数±标准差(x-±s)表示，采用单因素方差分析加LSD两两比较法进行分析。检验水准α=0.05。2结果2.1干预前后细胞增长率的变化经MTT检测，结果显示，实验组细胞抑制率明显高于未加药组，且随着作用时间的延长和浓度的增加而增加(表1)。表1不同浓度的5-aza-CdR对Eca9706细胞增殖的影响2.2干预前后细胞凋亡率的变化流式细胞仪分析可见，经不同浓度5-Aza-CdR诱导48h后，Eca9706细胞各处理组凋亡率分别为(13.76±0.47)%、(26.97±0.39)%、(41.03±0.19)%，与5-Aza-CdR诱导浓度成正比。与对照组[(1.39±0.27)%]比较差异有统计学意义(P<0.05)，且各浓度组间比较差异亦有统计学意义(P<0.05，图1)。以上实验重复5次。2.3干预前后Eca9706细胞mRNA的表达情况扩增产物经琼脂糖凝胶电泳显示，Eca9706细胞中TFPI-2mRNA表达在各用药组和未用药组之间有明显差异，TFPI-2mRNA在未用药组细胞中未见表达。经1.6、25.6、102.4μmol/L5-Aza-CdR处理后可见TFPI-2mRNA表达，说明在一定范围内随5-Aza-CdR药物浓度的增加TFPI-2mRNA表达逐渐增强(图2)。图1各组流式细胞凋亡散点图A：对照组;B：1.6μmol/L5-Aza-CdR组;C：25.6μmol/L5-Aza-CdR组;D：102.4μmol/L5-Aza-CdR组。图25-Aza-CdR处理前后Eca9706细胞TFPI-2mRNA的表达M：DNAmarker;β-actin：301bp;TFPI-2：440bp;1：对照组;2：102.4μmol/L组;3：25.6μmol/L组;4：1.6μmol/L组;5：H2O对照组。,2.4干预前后TFPI-2蛋白的表达情况免疫组化结果显示，经5-Aza-CdR作用Eca9706细胞48h，TFPI-2蛋白的阳性表达率增加，对照组、1.6μmol/L组、25.6μmol/L组、102.4μmol/L组TFPI-2蛋白的阳性表达率分别为(2.10±1.42)%、(9.31±2.70)%、(14.72±3.50)%、(68.20±3.20)%，不同浓度组之间以及用药组与对照组之间的差异均有统计学意义(P<0.05，图3)。图3各组TFPI-2蛋白的表达情况3讨论人TFPI-2(hTFPI-2)基因定位于7q22区域，全长由8164个碱基组成，其cDNA全长为1222kb。其mRNA的启动子具有典型的管家基因特征，没有典型的TATA盒或CAAT盒，在推定的转录起始位点区域GC含量超过80%[1]。TFPI-2可在体内多种组织广泛表达，在这些组织内一旦出现肿瘤，TFPI-2的表达水平也会随之显著下降[2]。有研究证实，在绒毛膜癌、乳腺癌、前列腺癌、神经胶质细胞瘤、纤维肉瘤和胸部恶性肿瘤组织中，与肿瘤产生相关的TFPI-2表达水平减少可能与其启动子的甲基化密切相关[1,3-5]。启动子区cpG岛高甲基化在肿瘤形成机制中确实切作用尚不清楚，然而众多证据说明，肿瘤抑癌基因CpG岛异常的甲基化导致基因失活和转录抑制是肿瘤发生的重要机制之一[6-8]。目前，有体外实验说明，DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR通过去甲基化作用可使多种含有CpG岛的高甲基化抑癌基因重新表达，从而恢复抑癌功能[9]。本实验RT-PCR结果显示，TFPI-2在Eca9706细胞中无表达，经过不同浓度的5-Aza-CdR处理Eca9706细胞后，TFPI-2亦重新出现表达，且在一定范围内随药物诱导浓度的增大表达逐渐增强。MIZUNO等[10]研究说明，肿瘤细胞中DNMT的表达较正常的高4～12倍，也证实DNMT上调参与肿瘤发生。这与我们的实验结果一致。根据MTT实验可知，经过5-Aza-CdR干预处理过的Eca9706细胞增殖明显受抑制，且随着药物浓度的增加，抑制作用越明显。从本实验结果分析，DNA启动子区去甲基化能较明显地抑制食管癌细胞增殖，并与其诱导剂量呈正相关，推测这种抑制作用与去甲基化后重新激活TFPI-2基因的转录和表达有着直接关系;此外可能与去甲基化后诱导细胞凋亡有关。进而通过流式细胞仪分析，结果显示，经不同浓度5-Aza-CdR干预的Eca9706的细胞中，用药组与对照组相比细胞凋亡率凋亡率有所增加，并且与5-Aza-CdR诱导剂量有依赖性关系。BENDER等[11]在同等条件下用5-Aza-CdR处理恶性肿瘤细胞系和正常纤维细胞系时，发现肿瘤细胞增殖均被抑制，而纤维细胞增殖不被抑制。因此，5-Aza-CdR对Eca9706细胞增殖的抑制及凋亡的增加不是药物的毒性影响，可能是因为使TFPI-2重新表达的结果。目前，国外以TFPI-2为药物研究靶点，就TFPI-2在肿瘤治疗、肿瘤临床诊断、促进伤口愈合和动脉粥样硬化治疗等领域中的应用，也正在进行广泛深入的研究。本研究用甲基转移酶抑制剂5-Aza-CdR处理人食管癌Eca9706细胞株，检测TFPI-2基因表达的变化及其对细胞增殖和凋亡的影响，以期寻找治疗肿瘤的新靶点。【参考文献】[1]HUBEF，REBERDIAUP，IOCHMANNS，etal.CharacterizationandfunctionalanalysisofTFPI-2genepromoterinahumanchoriocarcinomacellline[J].ThrombRes，203，109(4)：207-215.[2]MIYAGIiY，KOSHIKAWAN，YASUMITSUH，etal.cDNAcloningandmRNAexpressionofaserineprotein5andtissuefactorpathwayinhibitor-2[J].JBiochem，1994，116(5)：939-942.[3]RAOCN，SEGAWAT，NAVARIJR，etal.MethylationofTFPI-2geneisnotthesolecauseofitssilencing[J].IntJOncol，2003，22(4)：843-848.[4]KONDURISD，SRIVENUGOPALKS，YANAMANDRAN，etal.Promotermethylandsilencingofthetissuefactorpathwayinhibitor-2(TFPI-2)，ageneencodinganinhibitorofmatrixmetalloproteinasesinhumangliomacells[J].Oncogene，2003，22(29)：4509-416.