SN-T 5706-2023 化妆品微生物检验方法 大肠埃希氏菌检验

学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载1 7ICS71.00.0学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载1 7CCSY42中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T

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-中华人民共和国海关总署 发

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GB/T1.标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中华人民共和国广州海关、中华人民共和国深圳海关、中华人民共和国厦门海关、中华人民共和国烟台海关。本文件主要起草人:凌莉、涂晓波、彭小莉、黄成栋、董洁、袁慕云、冼钰茵、刘婧文、陈碧玲、廖荣军、陈梦琪、席静、段效辉。学ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准兔兔ｗ下载学ｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准兔兔ｗ下载学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载SN/T5706—2023学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载化妆品微生物检验方法大肠埃希氏菌检验1

范围本文件描述了化妆品中大肠埃希氏菌的定性检验方法。本文件适用于化妆品中大肠埃希氏菌的检验。2

规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。SN/T5075

化妆品微生物检验制样规范3

术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4

方法提要β本方法利用大肠埃希氏菌具有β-葡萄糖醛酸苷酶的活性,能分解5-溴-4-氯-3-吲哚--D-葡萄糖醛β酸苷,在胰蛋白胨胆盐X-葡萄糖醛酸苷琼脂平板上形成蓝绿色菌落,对其进行定性检验。注:本方法不适用于少部分β-葡萄糖醛酸苷酶阴性的大肠埃希氏菌,如

O157。5

设备和材料除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下。 31 42 235. 恒温培养箱:6℃±1 31 42 235. 恒温装置:8℃±2℃。5. 冰箱:

℃~8℃。4 155. 均质器或乳液分散机(转速1000r/min以上4 155. 电子天平:感量0.g。 26 1 17895. 无菌锥形瓶:50mL 26 1 17895. 无菌吸管:0mL(具0.mL刻度)。5. 无菌培养皿:直径90mm。5. 无菌均质袋或均质杯。 1115.0

无菌接种环:0μL(直径约3 1115.1

pH

计或精密pH

试纸。 215.2

质控菌株:大肠埃希氏菌ATCC25922或CGMCC1.385或等效菌株作为阳性对照; 211学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载SN/T5706—2023学兔兔ｗｗｗ．ｂｚｆｘｗ．ｃｏｍ标准下载杆菌

ATCC43864或CICC10296或等效菌株作为阴性对照。6

培养基和试剂 S 116. 大豆酪蛋白卵磷脂吐温80(CDLP)液体培养基:按 S 11 l 226. 胰蛋白胨胆盐X-葡萄糖醛酸苷(TryptoneBieX-glucuronide,TBX)琼脂:按 l 227

检验程序17. 化妆品中大肠埃希氏菌检验程序1化妆品中大肠埃希氏菌的检验程序见图1。图1

化妆品中大肠埃希氏菌检验程序27. 样品前处理和稀释2待测的样品应在室温下保存,不要温育、冷藏和冷冻样品。样品的制样处理按SN/T5075的规定执行。37. 增菌培养3吸取1∶10稀释的样品匀液10mL接种到90mLSCDLP增菌液中,置于36℃±1℃培养箱培养418h~24h。47.分离培养用无菌接种环挑取一环增菌培养液,划线接种于

TBX平板培养基,倒置于36℃±1℃培养箱培养18h~24h。在

TBX平板培养基上出现蓝绿色菌落者,判断为大肠埃希氏菌阳性。8

结果报告TBX平板培养基上有蓝绿色菌落,报告每克(毫升)样品中检出大肠埃希氏菌。否则,报告每克(毫升)样品中未检出大肠埃希氏菌。2．ｂｚｆｘｗｗｗ学兔兔ｗ．ｃｏｍ标准下载SN/T5706—2023．ｂｚｆｘｗｗｗ学兔兔ｗ．ｃｏｍ标准下载附 录

A(规范性)主要培养基和试剂 S111A. 大豆酪蛋白卵磷脂吐温80(CDLP S111A.. 成分0005500酪蛋白胨 17.g0005500大豆蛋白胨 3.g氯化钠 5.g磷酸氢二钾 2.g葡萄糖 2.g卵磷脂 1.g吐温80 7.g蒸馏水 1000mL12A.. 制法122 2先将卵磷脂在少量蒸馏水中加温溶解后,再与其他成分混合,加热溶解,每瓶90mL,于1212 2灭菌15min。注意振荡,使沉淀于底层的吐温80充分混合,冷却至25℃左右使用。灭菌后的培养基在25℃时的pH

为7.±0.。 T221A. 胰蛋白胨胆盐X-葡萄糖醛酸苷(BX T221A..成分5 B 0β05 B 0β0 03号胆盐 1.g5-溴-4-氯-3-吲哚--D-葡萄糖醛酸苷(CIG) 75.mg琼脂 8.g~18.g蒸馏水 1000mL22A.. 制法22 /5 52 2在2.mL95%的乙醇中加入0.mL1molL的氢氧化钠溶液,然后加入BCIG的环己胺 /5 52 2盐并混