19.3免疫放射技术讲解_第1页
19.3免疫放射技术讲解_第2页
19.3免疫放射技术讲解_第3页
19.3免疫放射技术讲解_第4页
19.3免疫放射技术讲解_第5页
已阅读5页，还剩9页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

第十九章放射免疫技术知识目标1.掌握放免技术的基本概念及类型2.掌握RIA和IRMA的测定原理及关键技术（重难点）。3.熟悉放射标记物的鉴定与纯化。4.熟悉RIA和IRMA的临床应用与评价能力目标运用放射免疫技术分析和解决临床检验实际问题。思政-素质目标责任心、细心、生物安全意识、质控意识教学目标目录一放射性核素和放射性标记物的制备二放射免疫分析三免疫放射分析免疫放射分析（IRMA）是从放射免疫分析（RIA）的基础上发展起来的核素标记免疫测定，其特点为用核素标记的抗体直接与待检抗原反应，并用固相免疫吸附剂作为B或F的分离手段。三免疫放射分析一、检测原理IRMA属于非竞争性免疫结合反应，其基本检测原理是将放射性核素（125I）标记在抗体上，并用过量的标记抗体与待测抗原进行非竞争性结合反应，并采用固相免疫吸附方式对B和F进行分离。检测免疫复合物的放射性，从而得到待检样本的浓度。二、方法与类型（一）单位点IRMA（二）双位点IRMA三、关键技术抗原抗体反应分离技术放射性测定数据处理Ab*AgAb(待检Ag)（一）抗原抗体反应固相抗原抗体复合物*牢固的抗原抗体复合物固相吸附分离技术（二）分离技术一般采用物理吸附法：用碳酸盐缓冲液将预包被抗体稀释到3μg/ml~10μg/ml，室温过夜，弃包被缓冲液（含有未结合物质和过剩标记物），并洗涤去掉结合不牢固抗体，从而达到分离的目的；然后，再加入1%牛血清白蛋白溶液，封闭、保存备用。晶体闪烁计数器包括了NaI闪烁晶体、光电倍增管以及计数器测量的放射性信号是仪器输出的电脉冲数：每分钟计数(cpm)

参数cpmB/T(%)F/T(%)B/F(%)B/B0(%)注：T即是B与F的总和（三）数据处理

IRMA的优点

效率高、操作简便

灵敏度高

特异型强

稳定性好四、评价与应用

IRMA的缺点

抗体用量较多

抗体的纯化较难RMA的测定对象主要限于有两个以上抗原决定簇的肽类或蛋白质。抗体适用于大分子蛋白质和多肽类激素的检测分析，如肿瘤标志物CA15-3，人血清催乳素、胃蛋白酶，血清TSH、凝血因子、降钙素、HBsAg等，某些难以标记的病毒抗原也可通过IRMA进行检测。小结

放射免疫技术是应用放射性核素标记抗原或抗体，通过免疫反应进行定量测定的一种技术。有两种类型经典的放射免疫分析（RIA）和免疫放射分析（IRMA）。

放射免疫分析是待测抗原和定量的标记抗原竞争性结合限量的抗体;免疫放射分析是将放射性物质标记在抗体上，属于非竞争性免疫结合反应。

放射性免疫技术

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 课件下载

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论