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文档简介
第二十一章
化学发光免疫技术
教学目标1.掌握:化学发光、化学发光剂的概念及常用的化学发光剂;直接化学发光免疫分析的基本原理(重难点);酶促化学发光的原理及关键技术;化学发光免疫技术的临床应用(重点)。2.熟悉:电化学发光免疫分析的基本原理(重难点)、三类化学发光免疫分析的方法学评价。3.了解:发光的概念及分类、化学发光物的制备。知识目标技能目标思政-素质目标掌握化学发光免疫技术的操作流程质量控制、生物安全意识、临床免疫学思维1.化学发光剂的概念及常用的化学发光剂。2.化学发光免疫分析的基本原理及其技术类型。3.化学发光酶免疫分析基本原理及其分离技术。4.电化学发光免疫分析基本原理。5.化学发光免疫技术的临床应用。本章要点一化学发光免疫分析二三四化学发光免疫技术的临床应用五目录化学发光免疫技术概述化学发光酶免疫分析电化学发光免疫分析用化学发光剂(如吖啶酯)直接标记抗体(抗原),与待测标本中相应的抗原(抗体)和磁颗粒性的抗体(抗原)发生免疫反应后,通过磁场把结合状态和游离状态的化学发光剂标记物分离开来,这时只需加入氧化剂(H2O2)和NaOH使成碱性环境,吖啶酯在不需要催化剂的情况下分解、发光。由集光器和光电倍增管接收、记录单位时间内所产生的光子能,可从标准曲线上计算出待测抗原(抗体)的含量。
第二节直接化学发光免疫分析一、检测原理YYY被测抗原+抗体+带吖啶酯标记物抗体YYYYYYYYYYY冲洗后(1)加入H2O2(pH<10)(2)加入碱(pH>10)发光磁微粒化学发光免疫分析双抗体夹心法原理示意图1.分离方法
常用磁颗粒分离技术,即用抗原或抗体包被磁颗粒,与标本中相应抗体或抗原及吖啶酯标记的抗体或抗原通过一定模式的免疫学反应后,最终通过在磁场中冲洗将结合到免疫复合物中的标记物和游离标记物进行分离的技术。
二、方法类型2.常用的免疫学反应模式
双抗原夹心法固相抗原竞争法双抗体夹心法三、
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