生物安全题库及生物安全手册

PAGEPAGE39生物安全题一、单选题1生物实验中的一次性手套及沾染EB致癌物质的物品，应（）。A丢弃在普通垃圾箱内B统一收集和处理C随意放在实验室D立即烧毁B2实验室常用于皮肤或普通实验器械的消毒液有（）。A75%乙醇B福尔马林（甲醛）C来苏儿（甲酚）D漂白粉（次氯酸钠）A3在分子生物学、遗传学、基因工程等实验中，常见药品（）是致癌物质？实验中不能让药品接触到皮肤上。A单体丙烯酰胺B甲叉双丙稀酰胺C溴化乙锭（EB）D十二烷基磺酸钠C4实验室生物安全性问题不仅涉及到动物间疾病的传播，最主要还关系到什么？A实验成败B实验室污染C人民身体健康D动物死亡C5关于紫外线消毒，下列说法不正确的是（）。A它可以是固定式的，也可以是活动式的，但距离被照射物不超过1.2m为宜B紫外线消毒方便实用，但不能彻底灭菌，特别是对细菌的芽孢杀灭效果较差C紫外线对人体有伤害作用，不可直视，更不能在开着的紫外灯光下工作D紫外线可用于所有病原微生物的消毒D6移液时，当有生物污染性物质溅出，为防止扩散应（）。A立即用浸过消毒剂的布或纸处理，然后将被污染的物品进行高压消毒B立即用布或纸处理C立即采用高压消毒D立即用浸过消毒剂的布或纸处理A7依照实验室生物安全国家标准的规定，什么场所不得从事高致病性病原微生物实验活动？A一级、二级实验室B三级实验室C四级实验室D五级实验室A8在微生物实验中，一些污染或盛有有害细菌和病毒的器皿，可（）。A不需要经消毒和高压灭菌处理后就再利用B不需要经消毒和高压灭菌处理后就直接弃掉C经消毒和高压灭菌处理后，再利用D集中存放待统一处理C9在微生物实验中，一些不要的菌种等可（）。A直接向下水管道倾倒B不需要经消毒和高压灭菌处理后，直接弃掉C经消毒和高压灭菌处理后，再弃掉D经紫外线照射后直接弃掉C10如果在微生物实验中出现意外事故（如菌种管打破等），应立即用什么来清洁桌面、洗手等，及时杀灭细菌和病毒，避免污染面扩大？A用消毒剂（84消毒剂）B用普通自来水C用纯净水D乙醇A11恒温培养箱的使用最高温度为（）。A60B100C45D80A12紫外线消毒方便实用，紫外灯可以是固定式，也可以是活动式的，但离被照射物不应超过多少距离？A1.2mB1.8mC2.2mD3.2mA13在生物医学实验室中进行有害微生物和转基因操作，应使用（）。A生物安全柜B净化工作台C普通实验台D通风柜A14采用下列哪种方法对受污染的移液管消毒灭菌后，再用自来水冲洗及去离子水冲净？A适宜的消毒剂中浸泡和高压灭菌锅中B高压消毒锅中C适宜的消毒剂中浸泡D肥皂水中浸泡A15使用移液管时下列哪种操作是正确的？A可以用移液管反复吸入和抽出传染性物质B一根移液管未经清洗，可吸取多种溶液C可以将任何传染性物质的液体吹入空气D用洗耳球吹吸移液管D16关于使用高压灭菌器注意事项不正确是（）。A注意防护，防止烫伤，待温度降下后再开盖B禁止器皿盖着盖子进行高压灭菌，易产生爆裂C定期检查排水桶、排水管D一次高压灭菌物品尽可能装满D17使用高压灭菌器时，以下哪个要求是不必要的？A灭菌器腔内装载要松散，以便蒸汽作用均匀B必须穿防护服和戴手套C灭菌器的排水过滤器应经常拆下清洗D待温度降至80°C以下时才能打开高压灭菌器B18以下哪种不是生物医学类实验室中必备的消毒溶液？A0.5%的次氯酸钠溶液B1.0%的来苏尔溶液C75%乙醇溶液及棉球D10%氨水D19被病原微生物污染的玻璃器皿，应先放在什么设备中进行消毒灭菌？A烘箱B高压灭菌锅C加热真空烘箱D微波炉B20全自动高压灭菌器的使用哪项是正确的（）。A同类物品装放一起B液体和固体物品分开存放C敷料与器械同时灭菌时，应将敷料放在下层D常用各种物品的灭菌时间为20-30min（110-121℃B21一本实验原始记录本的封面被细菌污染，适宜的消毒方法是（）。A干烤B高压蒸汽灭菌法C75%酒精浸泡D紫外线照射D22生物安全柜操作时废物袋以及盛放废弃吸管的容器放置要求不正确的是（）。A废物袋以及盛放废弃吸管的容器等必须放在安全柜内而不应放在安全柜之外B体积大的放在生物安全柜一侧即可C污染的吸管、容器等应先在放于安全柜中装有消毒液的容器中消毒1h以上，方可处理D消毒后的废弃物方可转入医疗废物专用垃圾袋中进行高压灭菌等处理B23下列不属于实验室一级防护屏障的是：A生物安全柜B防护服C口罩D缓冲间D24下列哪些措施不是减少气溶胶产生的有效方法：A规范操作B戴眼罩C加强人员培训D改进操作技术B25运输高致病性原微生物菌（毒）种或者样本须有不少于2人护送，并采取相应的防护措施，以下哪种运输方式目前是不允许的：A城市铁路B飞机C专车D轮船A26二级生物安全实验室必须配备的设备是：A生物安全柜和培养箱B生物安全柜和水浴箱C生物安全柜和高压灭菌器D离心机和高压灭菌器C27PCR实验室要求严格分区，一般分为以下四区：A主实验区、样本置备区、产物扩增区、产物分析区B试剂准备区、样本置备区、产物扩增区、产物分析区C主实验区、样本置备区、产物扩增区、试剂准备区D主实验区、试剂准备区、产物扩增区、产物分析区B28作为甲类传染病的霍乱进行大量活菌的实验操作应该在哪种级别的实验室ABSL-1BBSL-2CBSL-3DBSL-4B29避免感染性物质扩散实验操作的注意点是A微生物接种环直径应为2～3mm并且完全闭合，柄的长度不应超过6cmB应该使用密闭的微型电加热灭菌接种环,最好使用一次性的、无需灭菌的接种环C小心操作干燥的痰标本，以免产生气溶胶D以上都对D30高致病性病原微生物菌（毒）种或样本在运输过程中发生被盗、被抢、丢失、泄露时，承运单位、护送人、保藏机构应立即采取必要的控制措施，以下多少小时内向有关部门报告的时间是A1小时B2小时内C3小时D4小时B31生物安全柜在使用前需要检查正常指标，不包括A噪声B气流量C负压在正常范围D风A32微生物对消毒因子的抗力从高到低的顺序是A细菌芽孢、分枝杆菌、亲水性病毒、真菌孢子、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒B细菌芽孢、真菌孢子、分枝杆菌、亲水性病毒、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒C细菌芽孢、分枝杆菌、真菌孢子、亲水性病毒、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒D真菌孢子、细菌芽孢、分枝杆菌、亲水性病毒、真菌繁殖体、细菌繁殖体、亲脂性病毒B33脱卸个人防护装备的顺序是A外层手套→防护眼镜→防护服→口罩帽子→内层手套B防护眼镜→外层手套→口罩帽子→防护服→内层手套C防护服→防护眼镜→口罩帽子→外层手套→内层手套D口罩帽子→外层手套→防护眼镜→内层手套→防护服A34二级生物安全实验室硬件设施方面必须具备的条件A送排风系统B三区两缓布局CUPS电源D自动闭门系统D35生物安全柜内少量洒溢，没有造成严重后果属于A严重差错B一般差错C一般实验室感染事故D严重实验室感染事故B36下列哪种不是实验室暴露的常见原因A因个人防护缺陷而吸入致病因子或含感染性生物因子的气溶胶B被污染的注射器或实验器皿、玻璃制品等锐器刺伤、扎伤、割伤C在生物安全柜内加样、移液等操作过程中，感染性材料洒溢D在离心感染性材料及致病因子过程中发生离心管破裂、致病因子外溢导致实验人员暴露C37实验动物按对携带的微生物控制程度分成不同的等级，国际分级为A．普通动物、悉生动物、无菌动物B．普通动物、清洁动物、无菌动物C．普通动物、清洁动物、悉生动物D．普通动物、无特定病原体动物、无菌动物D38在参照国际标准的基础上，从我国实验动物实际情况出发常将实验动物分为以下几级A．普通动物、悉生动物、无菌动物B．普通动物、悉生动物、清洁动物、无菌动物C．普通动物、无特定病原体动物、无菌动物D．普通动物、清洁动物、无特定病原体动物、无菌动物D39国内分级法与国际分级法相比，在普通动物与无特定病原体动物间增加了一类等级动物：A．悉生动物B．无特定病原体动物C．清洁级动物D．无菌动物C40以下不属于实验动物携带的人畜共患传染病病原体的是：A．狂犬病毒B．汉坦病毒C．梅毒螺旋体D．马尔堡病毒C41结核分枝杆菌可以通过何种途径侵入易感机体，以下说法正确的是：A．呼吸道B．消化道C．皮肤损伤D．以上说法都对D42以下不能引起人畜共患病的沙门菌是：A．鼠伤寒沙门菌B．肠炎沙门菌C．副伤寒沙门菌D．猪霍乱沙门菌C43深部真菌的易感动物有：A．人B.猫C．猴D．以上都对D44以下可以引起实验动物携带的人畜共患传染病病原体的是：A．狂犬病毒B．汉坦病毒C．猴痘病毒．以上都对D45动物实验室的安全防护分几级？A．一级B．二级C．三级D．四级D46在安全柜型生物安全四级实验室，生物安全四级病原微生物感染的实验动物应饲养在什么级别安全柜内？A．一级生物安全柜B．二级生物安全柜C．三级生物安全柜D．四级生物安全柜C47动物实验的基本操作规范涉及：A．实验动物的饲养管理B．实验动物的操作与处理内容C．实验操作后的护理D．以上都对D48病原菌分离的培养物，何种结果需要121℃30分钟高压消毒A．阳性结果B．阴性结果C．以上两种均不需要D．以上两种均需要D49关于实验动物护理的基本原则，以下说法错误的是：A．实验动物的饲养和使用应遵守国家有关的法律和规定。B．动物实验可以在实验室内任何的区域进行。C．使用过程中要求保证周围环境和实验人员的安全。D．完善标准操作规程，避免或减轻因实验对动物造成的不适或痛苦。B50高压蒸汽灭菌的纱布敷料、棉球打开未用完，最长保存期为：A．24小时B．10小时C．48小时D．2小时A51新洁尔灭是实验室常用消毒剂，其浓度为：Ａ．0.01%B．0.1%C．1%D．10%B52辐射灭菌法不包括：A．紫外线B．红外线C．微波D．燃烧D53紫外线照射消毒时间一般为：A．10min以上B．20min以上C．30min以上D．15min以上C54紫外线照射以多少纳米波长最为有效：A．250-256nmB．200-300nmC．260-280nmD．260-266nmD55有些不耐100℃的物质，用间歇灭菌:将物品先用___加热1h，然后置37℃保存A．30～40℃B．45～55℃C．75～80℃D．85C56手术室、无菌室的空气消毒，常采用下列哪种方法Ａ．来苏尔喷洒Ｂ．高锰酸钾液喷洒Ｃ．70％酒精喷洒D．紫外线照射D57常规微生物操作规程中的安全操作要点，以下哪一项是错误的？（）A.禁止非工作人员进入实验室B.禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物C.所有培养物、废弃物在运出实验室之前不必进行灭菌D.以移液器吸取液体，禁止口吸C58关于生物安全实验室个人责任，其中错误的是（）。A.食品、饮料及类似物品只应在指定的区域中准备和食用B.实验室内禁止吸烟C.禁止在工作区域内使用化妆品和处理隐性眼镜，长发应束在脑后，工作时若戴有戒指、耳环、手表、手镯、项链和其它珠宝应将其置于个人防护装备内D.所有实验室工作人员应接受免疫以预防其可能被所接触的生物因子感染，应按有关规定保存免疫纪录和免疫前血清D59采集病原微生物样本应当具备的条件，其中不正确的是：（）。A.具有与采集病原微生物样本所需要的生物安全防护水平相适应的设备B.具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员C.具有有效的防止病原微生物扩散和感染的措施D.具有疑似某种病原微生物感染症患者整个临床病期均可采集样本D二、多选题1对人类而言，下列那种情况属于生物威胁的来源？A各种致病微生物、转基因生物B外来生物入侵C工厂烟囱排放的空气污染D生物恐怖事件ABD2实验室生物安全防护的内容包括（）。A安全设备、个体防护装置和措施B严格的管理制度和标准化的操作程序和规程C实验室的特殊设计和建设要求D实验楼宇智能化系统ABC3以下哪几项是实验室生物安全防护的目的？A保护试验者不受实验对象侵染B确保实验室其他工作人员不受实验对象侵染C确保周围环境不受其污染D保证得到理想的实验结果ABC4以下关于二级生物安全防护实验室的注意事项中，正确的是（）。A必须使用生物安全柜等专用安全设备B工作人员在试验时应穿工作服，戴防护眼镜C工作人员手上只有在皮肤破损或皮疹时，才应戴手套D必须具备喷淋装置、洗眼器等应急防护设施ABD5生物医学实验室中个人防护用品包括（）。A口罩、帽子、一次性手套B防护镜C防护服D纸巾ABC6高致病性病原微生物是指A第一病原微生物B第二病原微生物C第三病原微生物D第四病原微生物AB7一下哪些具有感染性：A病人血液B病原体的培养物C动物尸体D废弃的疫苗ABC8病原微生物的危害程度分类应主要考虑以下哪些因素A微生物的致病性B微生物的传播方式和宿主范围C当地所具备的有效防护措施D当地所具备的有效治疗措施ABCD9生物安全二级实验室门应该标有国际通用的生物危害标志，应包括以下哪些内容：A通用的生物危害性标志B传染因子C实验室负责人或其他人的姓名、电话D进入实验室的特殊要求ABCD10哪些人员应该接受实验室生物安全培训A实验室管理人员B实验室清洁工C实验室修理工D邻近实验室工作人员.ABC11实验室负责人应该尽力培训档案，培训档案应包括哪些内容：A培训内容B培训时间C培训教师D考核结果ABCD12以下哪项是我国有关基因工程操作的管理规定A《基因工程安全管理办法》B《农业生物基因工程安全管理实施办法》C《农业转基因生物安全管理条例》D《农业转基因安全评价管理办法》AB13哪些人可作为实验室活动的生物危害评估的评估人：A设施技术负责人B实验室主任C项目负责人D设施、机构安全委员会和生物安全工作人员ABCD14生物危害评估报告应包括哪些内容？A危害程度分类B背景资料C实验室活动及其危害性与预防措施D工作人员素质ABCD三、判断题1生物安全主要指在进行生物学研究和教学过程中采取适当的防护设施、设备、防护原则及技术操作等以减少或消除有潜在危险性的因子暴露及意外释放，从而保证人类和环境的安全。对2污染的（感染的）锋利物品，如注射针头、解剖刀片和碎玻璃；应当放置到不容易被刺破的带盖的容器中，把它们当作传染性物质处理。对3一般实验室的环境设施条件，达不到动物实验室国家标准，不能作为动物实验的场地。对4为了防止污染，有些实验需要戴一次性手套。所以在进入实验室就要戴手套，并一直戴着做所有事情。错5开展病原微生物实验时，可用超净工作台替代生物安全柜。错6无菌室使用前，将全部要接种的物品移入无菌室缓冲间，并用75%酒精棉球擦拭干净，最后将物品送入工作台上，开启紫外灯进行物品表面消毒灭菌30min左右。对7实验室应时常监测生物安全柜以确保其性能符合相关要求。应保存检查记录和任何功能性测试结果，并在安全柜上标记检查证明。对8每次微生物实验结束后，必须用普通自来水清洁实验桌面，并需彻底洗手等。错9凡是《基因工程实验》操作所用的一切塑料器具（eppendorf管、tip等），在使用前都应装入盒子和瓶子中灭菌，可以直接用手装盒或装瓶。错10发酵实验期间，要保持室内地面、桌面、操作台及其各种物品和器具的清洁卫生，同时也要保持发酵罐体外及其管路的卫生，做到无灰尘、无污垢。对11发酵实验过程中要严格按操作规程进行，要注意水、电、汽（气）安全，厉行节约，严禁跑冒滴漏。要注意不要将酸碱等液体滴到仪器设备表面，避免造成仪器表面污染或腐蚀。对12当冷冻离心机用完后，不要马上关闭离心机盖子，应敞开一段时间，待冷冻造成的霜自然晾干后，再关闭离心机盖子。对13在需用橡胶或塑料手套的生化类实验中，不用经常检查手套有无破损。错14每次微生物实验结束后，必须清洁消毒实验桌面，并需彻底洗手等。对15在微生物实验中，一定要有“有菌观念”和“无菌操作意识”，操作中一定要按正确的程序严格无菌操作，一方面避免感染，另一方面加强自我防护。对16当生物安全柜内发生少量感染性材料溢洒时，应用吸收纸巾立即处理，并立即用浸满消毒液的毛巾或纱布对生物安全柜及其内部的所以物品进行擦洗。工作面消毒后应更换手套，不论是摘下手套还是更换手套都要洗手。对17高压灭菌锅灭菌时，待灭菌的物品可与含有腐蚀性抑制剂或化学试剂的物质放在一起灭菌。错微生物实验室生物安全管理手册实验室生物安全管理体系文件目录序号名称备注1实验室人员和项目准入制度2人员培训考核制度3人员健康监护制度4生物安全检查制度5实验室人员生物安全行为规范6事件、伤害、事故和职业性疾病报告制度7实验室生物危险标识使用规定8实验室内务管理制度9实验室菌（毒）种和生物样本安全保管和档案管理制度10实验室废弃物管理制度11实验室消毒隔离制度12实验室应急处置预案13实验活动生物安全标准操作规程一．实验室人员和项目准入制度1.目的规范生物安全二级实验室的使用和管理，保证操作人员，实验对象和环境安全，确保检测结果准确可靠。2.适用范围适用于检验科生物安全二级实验室安全运转及在此环境下的所有检测工作。3.职责进入生物安全二级实验室从事检测工作的所有人员严格按照本规定执行。4.具体要求：4.1概述4.1.1生物安全二级实验室用于对检验者和环境有中度潜在危险样品的各项实验，必须符合下列规定：4.1.1.1具备操作资质的人员可在生物安全二级实验室内工作，其他任何人未经许可禁止进入实验室。4.1.1.2在实验室内的一切活动，必须遵照生物安全手册的规定进行。4.1.1.3实验室内污染的空气需通过高效过滤器后方能排出室外。4.1.1.4实验室内产生的污水，必须经过消毒后方可进入公共污水系统。4.1.1.5实验室的所有废弃品，必须通过高压灭菌后才能处理和清洗。必须携出实验室的中间实验材料、更换维修的仪器设备、也只有在确保无病原微生物污染的条件下，才能携出实验室。4.1.1.6实验室内准备二级全排式生物安全柜，所有可能造成污染的能够置于生物安全柜内的实验操作，置其内进行，以保证实验室内空间的安全。4.1.2实验室运行的安全性要求本手册规定的各项要求，首先是为了保证实验室的安全运行，包括防止实验室工作人员的感染、防止实验室操作的病原微生物对环境的污染、防止检测样品的污染，保证实验结果的准确可靠。4.1.3实验室工作的质量要求本手册规定的各项要求，同时也是为了保证实验室的工作质量，即：实验产生的各项结果和数据，必须准确可靠：实验室出具的检验报告，必须明确完整。4.2实验室操作规程4.2.1启动实验室开始工作前半小时。开启实验室主电源，使实验室及生物安全柜投入运行。开启顺序：①开启屋顶风机②开启全排风③开启空调④开启安全柜⑤打开房间紫外线灯。4.2.2个人防护工作人员按照下列要求进行个人防护，才能进入实验室区域：（1）在更衣室中换穿工作服和工作鞋。（2）在清洁区内，根据实验要求做好防护。（3）实验中需使用腐蚀性试剂时，在胶乳手套外加带一次性塑料手套；需要进行可能造成污染材料飞溅的操作时，需加戴防护面罩。4.2.3进入实验室4.2.3.1工作人员进入实验室时，每进入一道门，应将此门关好，再开启下一道门。4.2.3.2进入实验室后，关闭房间紫外线灯。4.2.3.3检查实验室运转是否正常。4.2.3.4做好开始实验的各项准备。4.2.4启用标本、试剂一切准备工作就绪后，才将标本和试剂从冰箱中取出，直接放入生物安全柜中。用完立即归位，使其在冰箱外停留的时间尽可能短。4.2.5操作4.2.5.1严格按照试剂使用说明进行操作。洗涤时避免液体材料飞溅。吸取、稀释液体时，将吸管插入试管底部，用吸球缓慢吸取，避免产生汽泡或汽溶胶。4.2.5.2离心时，应使用双盖封闭式离心机和全封闭试管，每管离心液总量低于最高容量1个刻度单位：平衡时不得有液体渗陋到管套中，离心机使用后立即用消毒液擦洗消毒。4.2.6观察结果不打开容器的观察允许在生物安全柜外进行，否则，必须在生物安全柜内观察结果。4.2.7准予携出实验室的材料确保不含感染性的实验材料，才可以从实验室携出。容器表面应用75%乙醇消毒。4.2.8实验室清洁每一实验步骤完成后，均应清理台面。所有用过的试剂均应归还原位；使过的吸管等长形器材放入储存污物的盒内；锋利品放入专用的污物盒；纸巾软物品放入污物袋；在台面上喷洒75%乙醇，保持20分钟，然后以纸巾擦干。实验室的其他表面，也应经常用75%乙醇擦拭。4.2.9污染物品处理放置污染物品的容器装满时，应更换新的容器。实验结束后，对用过的污染物品进行高压消毒。4.2.10更换工作服。工作完毕的更衣顺序是，先用消毒液浸泡手套5分钟，然后依次除去口罩、防护服、鞋套，放入高压消毒袋内，再次浸泡手套后除去手套，用75%酒精棉球擦面部裸露部位。4.2.11实验室消毒每次工作完毕，生物安全柜内用75%酒精擦拭台面，消毒液消毒地面，开启紫外线灯照射1小时后，逐一关闭实验室送风和通风设备{关闭顺序与开启顺序相反}。4.3实验记录与实验报告4.3.1实验记录在实验室内，实验记录应使用铅笔书写。记录内容应简明扼要，包括实验日期，实验目的和实验的基本条件等提示记忆的内容，并较详细地记载观察到的实际现象及数据结果。要求字迹应清晰，数字成行成列，以避免录入错误。4.3.2实验记录带出实验室将上述记录在纸张上的实验记录应用80福尔马林，密闭熏蒸消毒6小时后方可带出实验室。或阁着实验室玻璃窗由清洁区工作人员抄录一份。4.3.3实验记录录入计算机实验记录必须在实验结束后24小时内录入计算机。记录准确的实验报告和录入时间。再按照由实验室带出的书写记录，准确地记载实验结果和数据。录入后，书写记录保存1周，以备查验。实验记录录入后，一般不得修改。因数据记录错误，录入错误，或实际观察到的实验结果改变，必须更改记录时，不要删除已经录入的描述和数据，而应录入新的描写和数据，并注明更改原因。4.3.4实验室记录备份每月一次，将上月计算机的实验记录做出备份，备份的实验记录不得修改。实验室负责人应定期检查实验记录，核对备份与原始的实验记录，对记录中的缺陷提出修改意见。4.3.5实验记录的保存年限实验记录保存一年。已使用的实验记录(出具报告，发表论文，或以其他方式引用)，在使用后再保存一年。如无特殊必要，备份的实验记录一般永久保存。4.3.6出具实验报告在需要出具正式实验报告的场合，报告由实验者填写署名，交实验室负责人记录核对后签字，再由单位签发人签字并加盖公章发出。4.4标本保管规则4.4.1标本进入实验室4.4.1.1出实验室采集的标本，本实验室统一登记编号，能反映出标本的来源、种类、性质、目的等相关信息。4.4.1.2有关单位送检的标本由实验室统一登记编号，注明送检单位、送检时间、种类、性质、实验目的等相关信息。4.4.2标本的保管根据标本的性质、目的进行保存，每分标本分两份，一份检测时使用，另一份备用。标本因各种原因损失时，启用后备标本，并重新备份。4.4.3标本的销毁确定不用的标本，采用高压灭菌后焚烧的方式销毁。4.5实验室装备保养4.5.1实验室定期保养实验室的定期保养按照提供实验室设备厂商的规定进行，主要是对机械和电器部分进行维护。4.5.2实验室仪器设备的保养和维护实验室内的仪器设备的保养由实验室工作人员进行。维护有专业人员进行。生物安全柜的滤器必须按说明书规定的时间定期由专业人员更换，其它仪器设备也应根据实际需要清洁保养。4.5.3实验室仪器设备的维修更换仪器设备需要更新，需要离开实验室进行维修，或损坏需要更换，以及必须临时进入实验室使用，使用完毕后必须撤出实验室的贵重仪器，在撤出实验室之前必须以恰当的方式严格消毒，方可处理或重新投入使用。4.6意外情况处理4.6.1实验室意外事件的处理原则4.6.1.1造成或可能造成实验室污染，但未造成人身伤害的实验室报告，由实验室负责人处理。例如实验过程中。由于标本、试剂益处溅落造成操作台或地面的污染等，应立即喷洒消毒液并覆盖浸透消毒液的纸巾，待消毒液彻底浸泡30分钟后，对污染的物品进行清理。清理后的物品高压灭菌。并填写生物安全2级实验室意外情况登记与处理记录表，实验室负责人应指导这些处理活动，并检查处理效果。4.6.1.2实验室事故可能造成气溶胶污染，如压力容器或管道破裂、离心机事故等，应立即关闭实验室，张贴禁止入内的标识。用消毒液喷雾和紫外线照射污染的区域，24小时再进行终末消毒，实验室负责人除立即采取对应措施外，应向上级部门报告，并填写意外情况登记与处理记录表。4.6.1.3实验室工作人员在没有强毒微生物时，在实验室内受到意外伤害，如割伤、烧伤、烫伤等，在实验室内昏倒或发生身体严重不适，也有实验室负责人处理。令受到伤害的人员立即停止工作，用消毒液清洗未破损的平凡表面，伤口以碘伏消毒，眼睛用无菌生理盐水冲洗。由在同一实验室内人员或派人迅速着装进入实验室，清除造成伤害的原因，清理实验材料，帮助受伤人员紧急处理并撤离实验室。受到伤害的人员应进行治疗并休息，在身体状况未恢复之前，不得重新进入实验室工作。实验室在经过整理，消除了造成伤害的故障之后，方可重新使用。4.6.1.4伤害事故可能导致被强毒微生物感染，例如针头刺破、锐器割伤、黏膜暴露等途径接触到感染性液体，或在操作过程中发生培养物、污染材料溅落身体表面，意外接种等情况，首先进行局部处理，用肥皂和水清洗污染的皮肤，挤压伤口尽可能挤出损伤处的血液，用肥皂和清水冲洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎伤口。暴露的黏膜应尽快用生理盐水或清水冲洗干净。实验室负责人应向上级部门报告，对受伤害者进行隔离观察，同时根据情况预防性用药，并写出职业暴露后预防感染的评价和处理方案。4.6.2实验室人员的隔离观察发生可疑的实验室感染事故时，应对被感染的人员进行隔离观察。如果判定为法定的传染病感染，应按[传染病防治法]的规定报告，同时给予有效的隔离治疗人员培训考核制度1.目的规范实验室相关人员的培训考核2.适用范围适用于生物安全涉及的所有工作人员3、人员培训考核制度3.1.实验室工作人员的培训新工作人员进入实验室前，必须经过培训，取得进入实验室工作的资格。培训由实验室负责人组织进行，并指定熟悉实验室工作的人员担任辅导。培训内容包括：（1）相关检验的国家诊断标准、处理原则以及本手册内容。（2）实验室所有设备的使用方法。（3）个人防护方法。（4）实验室基本技术。（5）实验室消毒净化的方法。3.2.实验室工作人员的资格考试新工作人员经过培训后，由实验室负责人组织考核。通过考核后，还须与有资格的工作人员一同工作3个月，才能获得独立进行实验室操作的正式资格。人员健康监护制度1.目的规范实验室相关人员的健康监护2.适用范围适用于生物安全涉及的所有工作人员3、人员健康监护制度3.1工作人员从事工作前必须进行HIV抗体和甲肝、乙肝、丙肝等肝炎病毒标记物的检测，每半年进行一次HIV抗体复检，并保留血样一年以上。3.2工作人员应每年进行一次体检，并将可能涉及生物安全危害的体检结果存档，以便判断生物安全危害是否发生。3.3实验室应建立人员健康监护档案，档案内容包括既往病史、检测结果、免疫接种史等，以便对从事涉及生物安全危害人员的健康状况进行跟踪。3.4实验室工作人员的适合工作状态实验室工作人员必须在身体状况良好的情况下，才能进入实验室工作。出现下列情况，不应进入实验室：身体出现开放性损伤；患发热性疾病：感冒、上呼吸道感染；其他导致抵抗力下降的状况：妊娠、在实验室内连续工作4小时以上或其他原因造成的疲劳状态。生物安全检查制度1.目的规范实验室生物安全，保证设备正常运行。2.适用范围适用于生物安全涉及的仪器设备（比如生物安全柜等）3、生物安全检查制度实验室内，每2个月以细菌培养的方式进行安全性检测。生物安全柜内放置平板培养基2个，实验室4角和中间各放置1个，半污染区放置2个。将平皿敞开5分钟，然后盖上，每平板菌落数平均不得超过2个，超过标准，需要对实验室或污染部位进行甲醛熏蒸消毒。实验室人员生物安全行为规范1.目的规范实验室人员的生物安全行为规范2.适用范围适用于生物安全涉及的所有工作人员3生物安全组织管理与行为规范3.1组织框架图单位法人{或授权}负责人↓实验室负责人↓生物安全员↓实验室工作人员3.2各类人员相应行为规范3.2.1单位法人{或授权}负责人（1）负责组织生物安全实验室的立项、选址，施工队的资质验证。（2）负责成立生物安全委员会负责生物安全，制定管理制度，监督有关法规和操作规程的执行情况。（3）负责组织对造成外环境污染、实验室污染、人身伤害事故的调查与处理。3.2.2实验室负责人（1）组织制定安全手册、操作规程等文件。（2）按照上述文件要求组织实验室的各项工作，保证实验室运行的安全和实验室工作质量的准确可靠。（3）组织进入生物安全二级实验室的人员进行业务培训，保证工作人员熟知微生物的操作规程和技术，掌握实验室设备的特殊要求并熟练操作，对培训的结果进行考核，决定进入实验室工作人员的资格。3.2.3生物安全员（1）对技术方法、化学品、材料与设备定期进行内部安全检查，确保其符合国家和地方的有关安全与卫生政策与标准。一旦发现不安全因素，立即停止工作并上报实验室负责人。（2）与有关人员讨论研究安全政策的问题。（3）确认所有工作人员都具有进入实验室工作的资格。（4）为所有人员提供连续性的安全要教育与指导。（5）针对操作程序、技术方法和各种条件要求的变更，以及新设备的引进，为全体工作人员提供最新的安全文献和信息资料。（6）定期检查实验室的各项技术参数，组织对实验室装备的常规保养。（7）所有可能涉及潜在传染性或有毒物质泄露的意外事件与事故，即使没有人员受伤或暴露，也要予以调查，并向实验室负责人员和安全委员会报告调查结果和提出建议。（8）当任何实验室工作人员的疾病或缺勤与工作有关，并被记录为可能的实验室获得性感染时，协助随访调查其疾病或缺勤情况。（9）确保在发生传染性物质溅洒其他事件时，监督消毒净化程序得到正确执行；并对这类意外事件和事故进行详细的书面记录。（10）确保任何需要修理和维护的仪器设备在消毒与净化之后方可运出实验室。生物安全员由主管检验师以上的人员承担，必须具备如下资质：具有实际工作的经验；对操作的微生物有全面、完整的了解；具有组织实验室工作的能力；对工作有高度的责任心。3.2.4实验室工作人员（1）生物安全二级实验室，只允许进行实验室目的规定的操作，与此无关的活动一律不得进行。（2）必须按规定进行个人防护，方得进入实验室。（3）保持实验室环境的整洁，每项工作完成之后，必须清理和清洁台面，离开实验室（4）注意个人的健康状况，出现身体不适情况，应及时向实验室负责人报告。（5）实验室内禁止饮食、吸烟、访客和喧哗。实验室工作人员的技术要求（1）必须了解实验室安全原理，熟悉本手册的各项规定，熟记紧急情况下的正确应对措施。（2）掌握病原微生物操作的基本要求，正确、安全地实用标本，避免污染，以获得准确、可靠的实验结果。（3）必须熟悉相关实验的国家标准，能够完成标准所规定的任务。（4）一旦发生意外，立即向生物安全员汇报。4、个人防护程序4.1个人防护用品的使用要求4.1.1口罩：应使用N95型口罩或1216层棉纱口罩，最好使用防溅口罩{如31860型}如有胡须应刮去，使用应始终保持口罩与脸紧贴。一次性使用口罩应在使用后4小时丢弃，不能重复使用，不能与他人共同使用。如口罩遭到分泌物飞溅或弄湿，应严格洗手后，带上清洁手套更换。4.1.2防护面罩：实验人员在进行工作时应佩带防护面罩，防护面罩要求透亮度好，有较好的防飞溅功能，重复使用前应进行彻底消毒。4.1.3防护服：实验人员工作时应穿戴一次性防护服。最好是连体式，防水及抗静电性能好，无过滤作用。袖口、脚踝口应为弹性收口，面部、腰部应有弹性收口或拉绳收口。4.1.4手套和鞋套：鞋套应为一次性防水鞋套。手套为一次性胶乳手套，须戴两副，外层手套应根据需要及时更换。4.2个人防护用品的穿戴顺序4.2.1进入清洁区前穿上普通白大衣和实验室专用鞋。4.2.2进入清洁区时穿戴一次性口罩，手术帽，一次性隔离衣、两副胶乳手套和两副一次性鞋套。注意将手套和鞋套分别套在袖口和裤口外。4.2.3戴N95口罩及防护面罩、穿防水隔离服、防水鞋套、再戴外层手套。4.3个人防护用品脱卸顺序4.3.1完成实验后，在半污染区先用75%乙醇溶液消毒外层手套，然后脱掉外层手套{在脱另一只手套时，手指只能接触手套的里部}。4.3.2着内层手套依次脱掉防护面罩、N95口罩、防水鞋套及防水隔离服{脱隔离服时，不要接触隔离服的外表面，应从里反脱，以保里面超外}。将脱掉的物品放入专用消毒袋中就地高压消毒。防护面罩等重复使用的物品立即放入消毒液内，按有关规定消毒处理。4.3.3脱掉外层一次性鞋套，用75%乙醇溶液消毒内层手套。4.3.4戴者手套脱掉一次性口罩、手术帽、内层鞋套、然后脱掉一次性隔离衣及手套，放入消毒袋高压消毒。4.3.5用消毒巾擦拭面部，用碘伏彻底消毒双手，并用流动水冲洗。事件、伤害、事故和职业性疾病报告制度1、目的纠正检验工作中的差错，及时处理责任事故，吸取事故的教训，确保检验设备和人员的安全。2、范围适用于检验工作中出现的事故分析报告、调查和处理。3、职责3.1事故责任部门负责人填写事故报告单，报告事故发生的原因及采取的措施。3.2业务质量管理科和有关科室负责人协助中心负责人做好事故的调查处理工作。4、工作程序4.1事故分类凡违反各项规定所造成的事故均为责任事故，按其经济损失和人身伤害和大小分为以下几种：大小事故界限表损失情况小事故一般事故大事故重大事故经济损失≤100元100~1000元1000~10000元≥10000元人身伤亡一人受伤，休工≤3日一人受伤，休工3日以上两人受伤或一人受伤，休工1-6个月三人以上受伤，休工一年以上，或一人致残或死亡。4.2事故的处理4.2.1事故发生后，应立即采取有效措施，防止事态扩大，抢救受伤人员和仪器设备，报告上级领导。4.2.2事故发生3日内，事故责任人写出事故发生原因、经过及教训、责任，并由发生事故科室填写事故报告单，报业务质量管理科和行政管理科。4.2.3事故发生后5日内，由业务质量管理科和行政管理科协助中心负责人主持召开事故分析会，对事故进行分析并对事故责任人作出处理。事故责任科室采取纠正措施，防止类似事故再发生。4.2.4重大事故发生后一周内，由检验科负责人向上级主管部门送交事故处理专题报告。4.2.5事故报告处理单等记录材料由业务质量管理科归档保存。大事故和重大事故记入事故责任人技术档案。实验室生物危险标识使用规定1.目的规范生物安全二级实验室的使用和管理。2.适用范围适用于生物安全二级实验室。3.具体要求：3.1在具有生物安全二级实验室门口加贴专门的生物安全警示标识，以避免无关人员进入相关区域，造成感染的危险。3.2在有可能对人员造成威胁的生物标本储存处加贴生物安全警示标识，以防无关人员将危险标本带入安全区域对人员造成威胁。实验室内务管理制度1.目的确保生物安全二级实验室的正常运行、实验人员、物品和环境的安全2.适应范围适应于生物安全二级实验室。3.职责进入生物安全二级实验室工作的所有工作人员严格遵照本管理制度执行。4.基本制度4.1在主实验室设置清洁区、半污染区和污染区。入口处贴有醒目的生物危险标志。4.2非实验室有关人员和物品不得进入。4.3实验室内不得进食和饮水，或者进行其他与实验无关的活动。4.4实验室工作人员、外来合作者、进修和学习人员在进入实验室及其岗位之前必须经过实验室负责人的批准。4.5实验过程中，严格按有关操作程序操作，降低剪除和气溶胶的产生。4.6用移液器吸取液体，严禁口吸。4.7实验室的工作人员必须是经受过专业培训的技术人员。在独立进行工作前还需在中高级实验室技术人员指导下进行上岗培训，达到合格标准，方可开始工作。4.8实验室的工作人员必须被告知实验室工作的潜在危险并接受实验室安全教育，自愿从事实验室工作。4.9实验室的工作人员必须遵守实验室的所有制度、规定和操作规程。4.10实验室的工作人员在开始工作前必须留本底血清进行有关的检测，以后定期复检。如有疫苗必须进行免疫注射。4.11所有培养物、废弃物在运出实验室前必须经可行的消毒方法进行消毒。4.12工作前应消毒，活性物质溅出后要随时消毒。5.实验室特殊管理制度5.1进行感染性实验室时，应禁止他人进入实验室，或必须经实验室负责人同意方可入内，免疫耐受或正在使用免疫抑制剂的人员不许进入实验室，或必须经实验室负责同意方可入内。5.2实验室人员进入实验室前必须进行有效的培养和模拟训练。掌握预防暴露和暴露后的消毒处理程序。5.3实验室人员应接受必要的免疫接种和相应的抗体水品测定。5.4实验室事故处理：工作人员在操作过程中发生意外，如针刺和切伤、皮肤污染、感染性标本溅及体表和口鼻眼内、衣物污染实验台面等均视为安全事故，应视事故类型的不同情况，立即进行紧急处理。具体措施按《实验室应急处置预案》执行。5.5填写意外情况登记与处理记录表，并按规定报告给有关部门。5.6处特殊情况外，禁止在实验室内使用锐器。5.7剩余的标本应密封后置于适当条件下保存。5.8实验过程中应使用鉴定合格的二级生物安全柜。5.9实验设备在运出修理或维修前必须严格消毒，方可运出。实验室菌（毒）种和生物样本安全保管和档案管理制度1.目的规范实验室菌（毒）种和生物样本的保管和档案管理2.适用范围实验室菌（毒）种和生物样本的处理和档案管理3、实验室菌（毒）种和生物样本的保管3.1按国家规定可以保存的菌（毒）种，由指定的专人负责登记、保存和管理。按期传代、鉴定，必须在无菌室或接种罩内进行，并做好有关记录。在保存过程中发现菌（毒）种变异或死亡，应及时上报科长和中心主任。3.2本区检出的地方菌（毒）株应及时上报，因工作需要暂时保留的菌（毒）株也应按上级规定的时间进行销毁处理。新发现的菌（毒）株，要做好原始记录，并上报主管部门复核确认。3.3菌（毒）种必须每种设一记录卡，其内容包括：名称、编号、来源、分离日期、引进日期、鉴定日期、鉴定结果、鉴定者、审核者、传代情况、所用培养基、保存方法、温度、使用转移及销毁情况、保存者、部门负责人等。3.4向上级主管部门申请索取菌（毒）种和向下级有关部门发放菌（毒）种时，应有2人参加办理，严格执行国家有关规定，手续要完备，并认真做好记录备查。3.5一、二类菌（毒）种，应派专人向提供单位领取，不得邮寄；三类菌（毒）种的邮寄必须持有邮寄单位证明，并按照菌（毒）种邮寄与包装的有关规定办理。3.6未经上级批准，任何单位及个人不得以工作之便，进行国际间各类菌（毒）种交流，做好菌（毒）种安全防范工作。4、档案管理制度4.1、非实验室人员不得随意查看实验室记录4.2、实验室人员负责妥善保存各种样品登记本、报告单及实验室原始记录，不得擅自修改和销毁4.3、专人负责保管感染者档案4.4、未经领导批准不得向无关人员或单位提供任何实验室及感染者信息4.5、HIV抗体初筛实验室检测的阳性结果不是最终结果，须进一步确认，确认前不得出具阳性报告及告知受检者本人或有关单位实验室废弃物管理制度1.目的规范废弃物处理2.适用范围尖锐器具和其他废弃物的处理。3.具体方法：3.1尖锐器具的处理3.1.1尖锐器具，如针、注射器等，除特殊情况外，禁止在实验室使用，尽可能用塑料器材代替玻璃器材。3.1.2注射和吸取感染性材料时，尽可能使用一次性注射器。用过的针头禁止折段、剪段、折段、重新盖帽或从注射器上取下，禁止用手直接操作。用过的针头、注射器直接放入防刺破的盛废弃锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中，进行高压消毒处理。3.1.3尽可能使用带针头套的的注射器、无针头的系统和其他安全装置。3.1.4打碎的玻璃器具，禁止用手直接清理，必须使用其他工具，如扫把、簸箕、夹子或镊子等。盛污染针、锐器及碎玻璃的容器在丢弃前必须彻底消毒。3.2废弃物的处理3.2.1实验后的废弃物如不及时处置则会污染环境，从而对人造成危害，因此有关人员必须严格按照规定执行。3.2.2实验样本在处理和进行实验室检测时产生的废弃物，如一次性针头、离心管、平皿等应放入适当的容器和严格防漏的高压袋内，待实验结束后立即就地高压消毒。3.2.3实验过程中产生的污染性液体物质、废弃的液体标本等放在盛有消毒液的严格防渗漏的专用容器中，并及时加盖。3.2.4进行实验所必须使用的容器，如针头、一次性注射器、玻璃器具、手术刀片等，放入专用的坚壁容器内，加盖密封。3.2.5以上所有盛装废弃物的容器，在每次实验结束后，就地高压消毒。3.2.6高压锅应有专人负责，严格按使用说明操作，确保在121条件下，高压30分钟，以达到消毒要求。3.2.7所有实验产生的废弃物，必须经严格高压消毒后方能运出实验区，并送至指定地点集中焚烧处理。十一、实验室消毒隔离制度1.目的规范微生物实验室和生物安全二级实验室的消毒隔离工作。2.适用范围微生物实验室和生物安全二级实验室。3.职责所有工作人员都必须遵从本规程。4.具体步骤4.1实验室基本要求4.1.1实验室相对独立，实验室核心区包括实验间及缓冲间，明确划分清洁区、半污染区和污染区，并有明显标识。4.1.2各区域交叉处应设置有效氯2000的含氯消毒剂溶液浸湿的脚垫。4.1.3实验室内所有物品应专用，须带出时必须严格消毒。4.1.4实验人员进入实验室应穿戴好个人防护用品，如隔离衣、防护眼睛、口罩、一次性手套等。实验过程中注意自身防护，并防止操纵过程中的交叉污染。4.1.5培养基、组织、体液等必须放在防漏密闭的容器中储运。4.1.6血清学试验、样品的处理和分装应在BSL-2安全柜内进行。4.1.7样品离心使用密封的离心杯，以防溅出。4.1.8实验过程中使用的器材、实验废弃物均应按废弃物处理程序进行消毒处理。4.1.9当传染性标本溢出或溅出后，应有专业人员立即消毒和清理。4.1.10实验完毕，先消毒物体表面，再按规定程序脱下个人防护用品放入包装袋内就地高压消毒，并进行空气消毒。4.1.11离开实验室前，必须按有关规定消毒双手。4.2消毒方法4.2.1仪器等表面消毒：工作结束后，用含有效氯1000的消毒液或75%乙醇溶液擦拭消毒，作用20分钟以上。4.2.2实验器材的分类消毒：将使用后的锐器方入防刺破、防渗漏的密闭专用锐器处置盒内，121℃高压消毒30分钟。其他器材方入有效氯为2000mg/L的含氯消毒液内浸泡1小时以上。处理时应避免皮肤损伤。4.2.3工作台等物体表面消毒：工作完毕，用含有效氯2000mg/L的消毒液或75％乙醇溶液擦拭消毒，作用20分钟以上。4.2.4个人防护用品消毒：实验结束，将隔离衣、口罩、帽子、手套、鞋套等121℃高压消毒30分钟。防护镜浸泡在75％乙醇或有效氯为1000mg/L的含氯消毒剂中，作用30-60分钟。4.2.5手的消毒：用典伏或75％的乙醇擦拭，作用1-3分钟。4.2.6空气消毒：每次实验前后用紫外灯照射消毒，每次不少于1小时，每立方米空间安装紫外灯瓦数≥1.5W，距紫外灯1米处照射强度≥70W/㎡。4.2.7这张消毒：应用80ml/m3福尔马林，密闭熏蒸消毒6小时后方可带出。4.2.8地面消毒：工作结束，应用含有有效2000mg/L的消毒液喷洒拖地。4.2.9废弃物的处理：实验的废弃物应放入适当的容器内，就地121℃高压消毒30分钟，消毒后的废弃物集中收集、焚烧处理。5.实验室高压消毒安全操作5.1使用前应了解并掌握高压锅的原理及操作规则，以及不正确使用而导致的灾难性后果。5.2按照操作规程使用高压锅5.2.1接通电源，合上高压灭菌器左侧总电源开关。5.2.2注入加热用水，注水至加热器罩的水位水准器配件尖端浸入水中为止。5.2.3设定灭菌温度，先按“编集”键，然后按上下键调节到灭菌所需温度，然后按“实行”键，把所设温度存进程序。5.2.4设定灭菌时间，先按“编集”键，然后按上下键调节到灭菌所需时间，然后按“实行”键，把所设时间存进程序。5.2.5按“实行”键执行灭菌程序，此时“灭菌”灯闪烁。5.2.6当灭菌程序执行完成，灭菌程序自动停止运行。5.2.7在确认压力表的显示压力降到0刻度时，打开高压灭菌器顶盖，取出灭菌样品。5.3高压锅操作人员在使用高压锅时不得离开岗位；在日常使用过程中，必须严格按照操作规程执行，并按照规定进行设备的维护。每1年保养一次，每月检测一次消毒效果。5.4高压锅的物品不得放的过满，否则影响灭菌效果。放好被消毒灭菌的物品后，高压锅的盖子或门必须拧紧。5.5定期检查高压锅，以确保其正常工作，防止意外事故发生，保证消毒灭局效果。5.6高压灭菌安全操作步骤5.6.1在灭菌前将双层的高压灭菌带包好，废物在灭菌袋中的体积不能超过袋子体积的3/4，灭菌袋用橡皮带捆好，但不能扎得太死，否则蒸汽不能进入所料袋内影响灭菌效果。5.6.2实验产生的所有废物应该及时就地灭菌处理。如果灭菌器正在使用或优于其它原因不能马上使用，则废物必须放在灭菌袋内捆好并放在实验室内，在存放期间确保袋子无损坏。5.6.3当高压锅消毒灭菌盗时间后，取出物品放在废物收集处。5.6.4当开始灭菌时必须确信灭菌国内水量合适，高压温度和时间设置正确。灭菌应保持在121℃30分钟，时间和温度不得超过设定值，否则灭菌袋会融化，清理困难。十二、实验室应急处置预案1．目的规范紧急情况的处理工作。2．适用范围微生物实验室和微生物安全二级实验室。3．职责遇有紧急情况所有工作人员严格按此规程处理。4．具体要求：4.1造成或可能造成实验室污染，但未造成人身伤害的实验室事故，由实验室负责人处理。例如实验过程中，由于标本、试剂溢出溅落造成操作台或地面的污染等，应立即喷洒消毒液并覆盖浸透消毒液的纸巾，等消毒液彻底浸泡30分钟后，对污染的物品进行处理。清理后的物品高压灭菌。并填写生物安全二级实验室意外情况登记与处理记录表，实验室负责人应指导这些处理行动，并检查处理效果。4.2在没有强毒微生物时，再实验室内受到意外伤害，例如割伤、烧伤、烫伤等，由实验室负责人处理。令受到伤害的人员立即停止工作，用消毒液清洗未破损的皮肤表面，伤口以碘伏消毒，眼睛用洗眼器反复冲洗。有在同一实验室内工作人员或派人迅速着装进入实验室，清除造成伤害的原因，清理实验材料，帮助受伤人员紧急处理并撤离实验室。受到伤害的人员应立即就医，并将受伤原因及接触微生物的情况通报负责人。对其进行恰当而完整的病史记录。在其身体状况未恢复之前，不得重新进入实验室工作。实验室在经过整理，消除了造成伤害的故障之后，方可重新使用。4.3伤害事故可能导致被强毒微生物感染，例如针头刺破、锐器割伤、粘膜暴露等途径接触到感染性液体，首先进行局部处理，用肥皂和水清洗污染的皮肤，挤压伤口尽可能挤出损伤处的血液，用肥皂或清水冲洗，用消毒液浸泡或涂抹消毒，并包扎伤口。在操作过程中发生培养物、污染材料溅落身体表面等情况，首先使用喷淋装置，尽快将污染物冲洗掉，然后再进行局部处理。暴露的粘膜应尽快用生理盐水或清水冲洗干净。实验室负责人应向上级部门报告，对受伤害者进行隔离观察，同时根据情况预防性用药，并写出职业暴露后预防感染的评价和处理方案。4.4实验室事故可能造成气溶胶污染，如压力容器或管道破裂等，立即关闭实验室，疏散现场的所有人员，对所有暴露人员提出相应的医学建议。立即通知实验室负责人及生物安全员。至少在1小时内，任何人员不得进入现场，以便气溶胶的消散记空气中较重微粒的沉降。张贴禁止入内的警示标志。在生物安全员的监督下进行消毒、净化处理；执行这项工作时应当穿戴合适的防护服及呼吸防护用具。实验室负责人员除立即采取对应措施外，应向上级部门报告，填写意外情况登记与处理记录表。4.5培养物等传染性物质的破碎被传染性物质物质污染的小玻璃瓶及其他容器破碎时，用布或纸巾覆盖，尔后将消毒剂倾倒其上，放置30分钟。其后即可清除掉，玻璃碎片应当用镊子清理。污染区域应当用消毒剂清洗。破碎物品清理时如果使用了簸箕，应将其进行高压灭菌或用有效的消毒剂浸泡24小时。清理使用过的布、纸巾、抹布及拖把，放入污染废弃物容器中。上述步骤均应佩戴手套。4.6如果实验室的纪录表格、其他印刷品或书面材料遭到污染，在妥善转抄后或烤后，应当将其弃入污染废弃物容器。4.7试管破碎于密闭式安全离心杯中所有密闭式安全离心杯在生物安全过程中装载和卸载。如果怀疑发生了破损，应当将其盖子拧松；尔后，将整个离心杯高压灭菌。4.8蓄意破坏坚固、厚重的门、牢靠的锁具以及限制出入，都是合适的防范措施。发现蓄意破坏情况后报告实验室负责人及生物安全员，视破坏种类按照上述方法进行处理，并详细填写意外情况登记与处理记录表。十三、实验活动生物安全标准操作规程（一）艾滋病初筛检测实验操作规程1.目的保证艾滋病病毒抗体ELISA实验的准确性。2.适用范围艾滋病病毒抗体ELISA实验。3.具体要求3.1样品采集样品采集安试剂盒要求采集。采血时注意安全，用一次性注射器谨慎操作，防止发生刺伤和造成外界污染。血样如即时用可存于普通冰箱，如要长期保存，分离血清置于-20℃及以下。同时做好记录。3.2样品运送样品转送，除特殊需要外，必须是血清或血浆，置于带有盖帽的试管内，或将塑料试管用酒精灯封死，防止样品流出。试管上标明姓名、时间、编号，将试管放入专门带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理，在所放试管周围上下垫有软性物质，以免碰碎，容器外标有HIV检测专用字样和生物危害标志。路途较远或气候炎热时，容器应置于4℃以下运送。这样同时附送检单。3.3样品登记和处理3.3.1收到样品后，及时填写标本登记记录表，送样人、收样人签字，如已进行过初检，登记初检结果和实验方法及所用试剂情况。3.3.2对从其他实验室送来的样品，检查并注明送检单与标本记录的符合、样品管破损、溢漏等情况。如有溢漏应立即将尚存的血样移出，并对管壁和盛器消毒。检查并记录样品的质量有无严重溶血、细菌污染、血脂过多以及黄疸等情况。3.3.3对实验室自采的样品，最好将血液先放置1-2个小时，再用3000离心15分钟，吸出上清液备用，如在几天内检测可放在2-8℃冰箱中，如要贮存，置于-20℃冰箱。3.4实验准备3.4.1将试剂从冰箱中取出，按试剂盒要求时间恢复室温。3.4.2检查并记录冰箱、温箱温度。3.4.3按照试剂盒要求准备实验原始记录表，标明空白、阴性对照、阳性对照、外部质控血清以及检测样本的位置：登记日期和实验起止时间，记录环境条件及试剂盒厂家、批号、效期：整个实验过程中每一步操作都要在原始记录表上详细登记。3.4.4按照试剂盒的要求配置洗液及其他所需要的试剂。3.5加样和稀释根据样品数量将合适数量的酶标板条固定在板架上，为了不损坏洗扳机，每道上的酶标板条必须保持完整{不足部分可用废弃的微孔添充}，检查加样器加样刻度是否与试剂盒要求的加样量相符，按照原始记录表表明的位置加入各种质控品和检测样品，注意：空白只加标本稀释液。加样量和稀释度严格按照试剂盒说明书规定的操作，一般先加样品稀释液后再加入样品。加样要准确，小心不要使吸头碰着酶标板空上是包被抗原。为保证加样的准确，最好使用多孔道加样器，使用时注意防止吸头间的交叉污染。3.6温育贴好封板膜，按照试剂盒要求的温度和时间进行温育，最好选择湿育方法。3.7洗板开启洗板机前，先检查洗板机废液瓶是否已排空，开启后先用蒸馏水冲洗管道，再换上洗液瓶。按照试剂盒的要求，选择、修改洗扳方式、洗涤次数和浸泡时间，根据所用酶标板的条数确定洗板道数，根据酶标板的位置调节洗头的位置，然后开始洗板，洗板结束后用蒸馏水冲洗管道。3.8加酶结合物对于二步法ELISA实验需加酶结合物，按试剂盒要求完成。3.9加底物洗好板后应立即加底物，需加自配的底物应现配现用。3.10终止反应在规定的时间内用试剂盒中的或根据要求自行配置的终止液终止反应。3.11酶标仪读物按照试剂盒的要求选择滤光片，确定空白孔位置，选择合适达的打印报告格式，读数并打印结果。3.12所用仪器在使用后及时填写使用记录。3.13结果判断计算3.13.1根据试剂盒说明书要求的阴阳对照OD值范围判断实验