2013-2014年山东省A群链球菌分子分型与耐药性研究

2013-2014年山东省A群链球菌分子分型与耐药性研究[研究背景]A群链球菌(GAS)为革兰氏阳性菌,感染人体可引起一系列轻重不等的GAS疾病。在我国,GAS感染所致的猩红热一直是《中华人民共和国传染病防治法》中规定法定报告的乙类传染病。尤其在2011年,猩红热发病率明显高于往年,引起社会各界广泛关注。监测GAS菌株的分子学特点对于预防与控制GAS疾病有着重要意义。[研究目的]1、描述2013-2014年山东省GAS分子分型特征,明确山东省GAS流行株的变迁与趋势,可为GAS疾病防治提供有力依据。2、探讨emm型别与超抗原基因之间的联系。3、比较各分型方法的优劣,为合理选择分型方法提供参考。4、了解2013-2014年山东省A群链球菌(GAS)耐药特征及其耐药表型和基因型,为临床治疗GAS疾病提供依据。[研究方法]1、自猩红热、无症状携带者咽拭子中分离获得154株GAS,利用emm分型、超抗原基因(speA、speC、speG、speH、speI、speJ、speZ、ssa、speK、speM、speL)检测和脉冲场凝胶电泳(PFGE)对其进行分型检测。2、采用K-B纸片扩散法检测青霉素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、四环素、氯霉素、万古霉素、头孢噻肟8种抗生素的耐药情况；毛细管电泳检测ermA、ermB、mefA、tetM、tetO共5种耐药基因的携带情况；利用双纸片法确定耐药表型。3、利用Excel2013软件对数据进行汇总、整理,采用SPSS19.0软件进行统计学分析。利用辛普森指数和AW系数比较emm分型、超抗原基因谱、PFGE三种分型方法的优劣。[研究结果]1、2013-2014年山东省共检出5种emm型别,其中emm1(43.51%)和emm12(54.55%)为emm优势型别；包括18种emm亚型,其中emm1.0(34.72%)与emm12.0(45.83%)为的emm优势亚型。2、speA、speB、speC、speG、speH、speL、speM、speZ、ssa的检出率分别为42.21%、100.00%、97.40%、98.70%、32.47%、51.95%、40.91%、0.00%,0.65%,0.65%,99.35%、98.70%。3、共发现18种超抗原基因谱,其中以profilel(28.57%)、profile2(32.47%)、profile3(18.18%)最为常见。4、emm1.0、emm12.0均与speA、speH、speI、speJ的有无存在关联性(P<0.05)。emm1.0倾向于含有speA、speJ,且与speH、spel相斥；emm12.0则倾向于含有speH、spel,且与speA、speJ相斥。5、共分出47种PFGE型别,其中PFGE16型(23.38%)与PFGE28型(12.99%)为PFGE优势型别。6、emm分型、超抗原基因谱、PFGE(smaⅠ)三种分型方法的辛普森指数分别为0.648、0.779、0.916。一致性均较低,AWPFGE(smal)→emm分型最高,仅为0.707。7、GAS对青霉素、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、四环素、氯霉素、万古霉素、头孢噻肟的耐药率分别为0.00%、100.00%、100.00%、0.00%、92.21%、0.00%、0.00%、0.00%。ermB、tetM阳性携带率分别为100.00%、99.35%,ermA、mefA、tetO未检出(0.00%)。cMLS耐药表型占比为100.00%,未发现iMLS耐药表型(0.00%)。[结论]1、2013-2014年山东省GAS菌株中emm型别分布较为单一,以emml.0和emm12.0为主；超抗原基因除speK、speL、speM检出率极低外,其余阳性携带率均较高,超抗原基因谱以profile1、2、3为主；PFGE型别分布呈散发状态,PFGE16、28型为PFGE优势型别；耐药以红霉素、克林霉素、四环素三种抗生素共同耐药为主。2、em