孕早期丙泊酚、氯胺酮暴露对子代大鼠海马NR2B及HGN蛋白表达的影响

孕早期丙泊酚、氯胺酮暴露对子代大鼠海马NR2B及HGN蛋白表达的影响目的：观察SD大鼠在孕早期母体接受丙泊酚、氯胺酮麻醉后，对子代海马组织形态学及NR2B、HGN蛋白表达水平的影响，从而探讨其对子代学习记忆功能的影响机制。方法：雌性清洁级SD大鼠210只，将其随机分为丙泊酚组（Prop组）、氯胺酮组（Ket组）和对照组（C组）三大组，于孕5天-7天，分别用丙泊酚和氯胺酮对Ket组和Prop组进行麻醉，对照组给予等体积的生理盐水。根据麻醉时间不同又分别将Prop组和Ket组动物分为2h亚组(Prop2、Ket2组）、4h亚组（Prop4、Ket4组）和8h亚组（Prop8、Ket8组），每亚组动物数为30只。于子鼠出生后第30天，用Morris水迷宫系统测定子鼠学习记忆功能，测定结束后收集各亚组子鼠海马组织观察其组织结构及超微结构改变，用免疫组化法测定子鼠海马组织NR2B及HGN蛋白的表达水平。结果：（1）Prop2组相同日龄子鼠的逃避潜伏期、穿越原平台次数和原平台所在象限停留时间与C组相比均无明显差异（P＞0.05）；Prop4和Prop8组相同日龄子鼠的逃避潜伏期较C组均延长（P＜0.05），穿越原平台次数和原平台所在象限停留时间明显减少（P＜0.05）；Prop2、Prop4及Prop8各组间子鼠逃避潜伏期、穿越原平台次数和原平台所在象限停留时间均无明显差异（P＞0.05）。与C组相比，Ket2、Ket4及Ket8组相同日龄子鼠逃避潜伏期均明显延长（P＜0.05），穿越原平台次数和原平台所在象限停留时间均明显减少（P＜0.05）。Ket组各亚组间子鼠逃避潜伏期、穿越原平台次数和原平台所在象限停留时间均无明显差异（P＞0.05）。（2）透射电镜结果显示Prop2组超微结构与C组相比无明显异常，Prop4和Prop8组可见细胞数量减少，细胞核形状不规则，Prop8组还可见细胞间隙增宽及线粒体嵴溶解。Ket组各亚组细胞数量均较C组减少，其中Ket2组细胞核形状不规则，异染色质增多，线粒体嵴溶解及肿胀，内质网扩张；Ket4组还可见细胞间隙增宽，胞核收缩变形明显，异染色质进一步增多，核膜破裂，线粒体和内质网溶解、空泡化；Ket8组细胞核消失，可见凋亡小体，细胞浆浓缩，部分线粒体及内质网可见膜破裂。（3）Prop及Ket组各亚组子鼠海马组织NR2B蛋白表达量随着麻醉维持时间的延长而逐渐减少。与C组相比，Prop2组子鼠海马组织NR2B蛋白表达水平降低但无统计学差异（P＞0.05）；Prop4及Prop8组子鼠海马组织NR2B蛋白表达水平分别为0.085±0.016及0.070±0.015，均较C组（0.092±0.018）明显减少（P＜0.05），且Prop8组较Prop2及Prop4组减少更明显（P＜0.05）；Ket2、Ket4及Ket8各组子鼠海马组织NR2B蛋白表达水平分别为0.077±0.014、0.073±0.013及0.056±0.014，均较C组（0.092±0.018）明显减少（P＜0.05），且Ket8组较Ket2组及Ket4组减少更明显（P＜0.05）。Prop及Ket组各亚组子鼠海马组织HGN蛋白表达量随着麻醉维持时间的延长而逐渐增加。与C组相比，Prop2组子鼠海马组织HGN蛋白表达水平升高但无统计学差异（P＞0.05）；Prop4及Prop8组子鼠海马组织HGN蛋白表达水平分别为0.109±0.015及0.120±0.020，较C组（0.093±0.022）均明显增加（P＜0.05）。Prop组各亚组间比较发现，Prop4组较Prop2增加更明显（P＜0.05），而Prop8组较Prop4组也进一步增加（P＜0.05）。Ket2、Ket4及Ket8各组子鼠海马组织HGN蛋白表达水平分别为0.110±0.029、0.111±0.014及0.135±0.021，均较C组（0.093±0.022）明显增加（P＜0.05），且Ket8组较Ket2组及Ket4组增加更明显（P＜0.05）。与C组相比，Prop2组子鼠海马组织NR2B/HGN蛋白表达水平比值无明显差异（P＞0.05），Prop4组及Prop8组子鼠海马组织NR2B/HGN蛋白表达水平比值较C组均明显减少（P＜0.05）。Prop组各亚组间比较发现，Prop4组较Prop2减少更明显（P＜0.05），而Prop8组较Prop4组也进一步减少（P＜0.05）。与C组相比，Ket组各亚组子鼠海马组织NR2B/HGN蛋白表达水平比值均减少（P＜0.05），且Ket8组较Ket2组及Ket4组减少更明显（P＜0.05）。结论：在本实验条件下，孕早期母体接受