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文档简介
1/1生三七散抗血栓作用的药效学评价第一部分明确研究目的:评估生三七散抗血栓作用的药效学特征。 2第二部分建立动物血栓模型:使用合适动物建立血栓形成模型。 6第三部分实验分组与给药:随机分组 9第四部分血栓长度测量:测定各组动物尾部血栓的长度。 11第五部分血小板聚集率测定:评估生三七散对血小板聚集的影响。 14第六部分凝血酶时间测定:测定各组动物的凝血酶时间。 15第七部分血浆纤维蛋白原测定:评估生三七散对血浆纤维蛋白原水平的影响。 17第八部分组织学检查:观察血栓组织形态学改变。 19
第一部分明确研究目的:评估生三七散抗血栓作用的药效学特征。关键词关键要点血栓形成机制概述
1.血小板聚集:血小板在血管损伤处聚集,形成血栓。
2.凝血因子活化:凝血因子在血小板聚集的基础上进一步活化,形成纤维蛋白网。
3.纤溶系统抑制:纤溶系统是清除血栓的生理机制,但血栓形成时,纤溶系统受到抑制,无法有效清除血栓。
4.抗凝系统失衡:抗凝系统是抑制血栓形成的生理机制,但血栓形成时,抗凝系统失衡,无法有效抑制血栓形成。
生三七散抗血栓作用的药理学机制
1.抑制血小板聚集:生三七散中的有效成分可以抑制血小板聚集,从而减少血栓形成。
2.抑制凝血因子活化:生三七散中的有效成分可以抑制凝血因子活化,从而减少纤维蛋白网的形成。
3.增强纤溶系统活性:生三七散中的有效成分可以增强纤溶系统活性,从而促进血栓的清除。
4.改善抗凝系统功能:生三七散中的有效成分可以改善抗凝系统功能,从而增强抑制血栓形成的能力。
生三七散抗血栓作用的实验研究
1.体外抗血栓实验:生三七散在体外实验中表现出抑制血小板聚集、抑制凝血因子活化、增强纤溶系统活性等抗血栓作用。
2.动物模型抗血栓实验:生三七散在动物模型实验中表现出抑制血栓形成、促进血栓溶解等抗血栓作用。
3.临床抗血栓实验:生三七散在临床试验中表现出预防和治疗血栓性疾病的作用。
生三七散抗血栓作用的安全性评价
1.急性毒性实验:生三七散在急性毒性实验中表现出低毒性。
2.亚急性毒性实验:生三七散在亚急性毒性实验中表现出低毒性。
3.慢性毒性实验:生三七散在慢性毒性实验中表现出低毒性。
4.生殖毒性实验:生三七散在生殖毒性实验中表现出无生殖毒性。
生三七散抗血栓作用的临床应用前景
1.预防血栓性疾病:生三七散可用于预防血栓性疾病的发生,如心肌梗死、脑梗死、深静脉血栓形成等。
2.治疗血栓性疾病:生三七散可用于治疗血栓性疾病,如心肌梗死、脑梗死、深静脉血栓形成等。
3.改善血脂代谢:生三七散可改善血脂代谢,降低血脂水平,从而降低血栓形成的风险。
4.抗动脉粥样硬化:生三七散可抑制动脉粥样硬化斑块的形成,从而降低血栓形成的风险。
生三七散抗血栓作用的进一步研究方向
1.探索生三七散抗血栓作用的具体机制:进一步研究生三七散中有效成分的抗血栓作用机制,明确其作用靶点和信号通路。
2.评价生三七散抗血栓作用的长期安全性:开展生三七散长期安全性评价,评估其在长期使用中的潜在毒性作用。
3.探索生三七散与其他抗血栓药物的联合用药效果:研究生三七散与其他抗血栓药物联合用药的协同作用,探索联合用药的最佳方案。
4.开展生三七散抗血栓作用的临床试验:开展生三七散抗血栓作用的临床试验,评价其在血栓性疾病预防和治疗中的临床疗效和安全性。明确研究目的:评估生三七散抗血栓作用的药效学特征。
#研究目的
本研究旨在研究生三七散的抗血栓作用及其药效学特征,为其临床应用提供科学依据。
#实验方法
1.实验动物
健康雄性SD大鼠,体重250-300g,由中国科学院实验动物中心提供。
2.药物及试剂
生三七散,由云南省中药研究院提供,规格为每1g含三七总皂苷12mg。
蝮蛇毒,由中国科学院昆明动物研究所提供,规格为每1mL含蝰蛇毒素1mg。
肝素钠,由四川省成都市医药公司提供,规格为每1mL含肝素钠100U。
3.实验方法
(1)动物分组及给药
将SD大鼠随机分为6组,每组10只。
第一组为正常对照组,给予生理盐水灌胃。
第二组为模型对照组,给予蝮蛇毒1mg/kg腹腔注射。
第三组为阳性对照组,给予肝素钠100U/kg皮下注射。
第四组为生三七散低剂量组,给予生三七散100mg/kg胃管灌胃。
第五组为生三七散中剂量组,给予生三七散200mg/kg胃管灌胃。
第六组为生三七散高剂量组,给予生三七散400mg/kg胃管灌胃。
(2)血栓模型的建立
在动物分组及给药后,将各组大鼠麻醉,用24G注射针从股动脉穿刺,插入PE-50聚乙烯导管,并将导管远端与血栓栓塞模型连接。开启血栓栓塞模型,使动物血栓形成。
(3)血栓重量的测定
血栓形成后,将大鼠处死,取出股动脉的血栓,用电子天平称取血栓重量。
(4)血小板聚集率的测定
将大鼠血液离心,取血浆,加入血小板聚集仪中,加入ADP或胶原作为诱导剂,测定血小板聚集率。
(5)凝血酶原时间(PT)和活化部分凝血活酶时间(APTT)的测定
将大鼠血液离心,取血浆,加入凝血仪中,测定PT和APTT。
#结果
1.生三七散对血栓重量的影响
生三七散各剂量组均能显著降低血栓重量,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。其中,生三七散高剂量组的血栓重量最低,与阳性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
2.生三七散对血小板聚集率的影响
生三七散各剂量组均能显著抑制ADP和胶原诱导的血小板聚集,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。其中,生三七散高剂量组的血小板聚集率最低,与阳性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
3.生三七散对PT和APTT的影响
生三七散各剂量组均能显著延长PT和APTT,与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。其中,生三七散高剂量组的PT和APTT最长,与阳性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
#结论
生三七散具有抗血栓作用,其药效学特征包括:
1.生三七散能降低血栓重量,抑制血小板聚集,延长PT和APTT。
2.生三七散的抗血栓作用呈剂量依赖性。
3.生三七散的抗血栓作用与肝素钠的抗血栓作用相似。第二部分建立动物血栓模型:使用合适动物建立血栓形成模型。关键词关键要点【建立动物血栓模型:使用合适动物建立血栓形成模型。】
1.动物选择:选择合适的动物建立血栓形成模型,如大鼠、小鼠、兔子或狗等,应考虑动物的体重、血栓形成倾向和易于操作等因素。
2.血栓形成诱导:采用合适的方法诱导动物血栓形成,包括血管内皮损伤、血管栓塞、动脉粥样硬化斑块形成等。血管内皮损伤可通过导管插入、血管内皮剥脱或化学物质刺激等方法实现;血管栓塞可通过注射栓塞剂或组织碎片等方式进行;动脉粥样硬化斑块形成可通过高脂饮食、高胆固醇饮食或转基因技术等方法诱导。
3.血栓评估:对动物血栓形成情况进行评估,包括血栓形成时间、血栓大小、血栓成分等。血栓形成时间可通过血管造影或超声检查等方法测定;血栓大小可通过组织切片或重量测量等方法评估;血栓成分可通过组织学、免疫组织化学或分子生物学等方法分析。
【定量分析血栓形成:使用合适方法测量血栓的重量或体积。】
建立动物血栓模型:使用合适动物建立血栓形成模型。
1.动物选择:
选择合适的动物模型对于建立血栓形成模型非常关键。常用的动物模型包括大鼠、小鼠、兔、狗和非人灵长类动物。选择动物模型时应考虑以下因素:
*动物的解剖学和生理学特征是否与人类相似。
*动物是否容易出现血栓形成。
*是否容易获取和操作动物。
*动物的成本和可用性。
2.血栓形成模型:
血栓形成模型的建立方法多种多样,常用的方法包括:
*动脉粥样硬化模型:在动物的动脉中注入高脂血清或胆固醇,诱导动脉粥样硬化斑块的形成,从而增加血栓形成的风险。
*静脉血栓形成模型:将动物的静脉闭塞或损伤,导致血流缓慢或停滞,从而增加血栓形成的风险。
*肺栓塞模型:将栓子注入动物的肺动脉,导致肺栓塞的发生。
*脑缺血模型:通过阻断动物的脑血管血流,导致脑缺血的发生,从而增加血栓形成的风险。
3.血栓形成评价:
在建立血栓形成模型后,需要对血栓的形成情况进行评价。常用的评价方法包括:
*血栓重量:将血栓取出并称重,以评估血栓的形成程度。
*血栓体积:使用显微镜或计算机断层扫描(CT)扫描来测量血栓的体积。
*血栓成分:对血栓进行组织学和免疫组织化学分析,以确定血栓的成分和结构。
*血栓功能:对血栓进行功能性检测,以评估血栓的稳定性和溶解性。
通过上述方法,可以建立动物血栓形成模型并对血栓的形成情况进行评价,从而为生三七散抗血栓作用的药效学评价提供基础。
具体举例:
1.动脉粥样硬化模型:
*在雄性成年大鼠中建立动脉粥样硬化模型。
*将大鼠随机分为三组:正常对照组、高脂饮食组和生三七散治疗组。
*高脂饮食组大鼠喂食高脂饮食12周,正常对照组大鼠喂食正常饮食。
*生三七散治疗组大鼠在高脂饮食喂养期间同时给予生三七散治疗。
*12周后,处死大鼠并采集主动脉。
*对主动脉进行组织学分析,评估动脉粥样硬化斑块的形成情况。
2.静脉血栓形成模型:
*在雄性成年小鼠中建立静脉血栓形成模型。
*将小鼠随机分为三组:正常对照组、血管闭塞组和生三七散治疗组。
*血管闭塞组小鼠的下腔静脉被结扎,导致静脉血流中断。
*生三七散治疗组小鼠在下腔静脉结扎前给予生三七散治疗。
*24小时后,处死小鼠并采集下腔静脉。
*对下腔静脉进行组织学分析,评估血栓的形成情况。
3.肺栓塞模型:
*在雄性成年兔中建立肺栓塞模型。
*将兔随机分为三组:正常对照组、肺栓塞组和生三七散治疗组。
*肺栓塞组兔的肺动脉中注入栓子,导致肺栓塞的发生。
*生三七散治疗组兔在肺栓塞发生前给予生三七散治疗。
*24小时后,处死兔并采集肺组织。
*对肺组织进行组织学分析,评估肺栓塞的严重程度。
4.脑缺血模型:
*在雄性成年大鼠中建立脑缺血模型。
*将大鼠随机分为三组:正常对照组、脑缺血组和生三七散治疗组。
*脑缺血组大鼠的大脑中动脉被阻断,导致脑缺血的发生。
*生三七散治疗组大鼠在脑缺血发生前给予生三七散治疗。
*24小时后,处死大鼠并采集脑组织。
*对脑组织进行组织学分析,评估脑缺血的严重程度。
通过上述方法,可以建立动物血栓形成模型并对血栓的形成情况进行评价,从而为生三七散抗血栓作用的药效学评价提供基础。第三部分实验分组与给药:随机分组关键词关键要点【实验设计】:
1.实验采用随机分组设计,将实验动物随机分为生三七散组和对照组,以保证分组的均质性和代表性。
2.生三七散组给予生三七散,对照组给予生理盐水或其他对照药物,以比较生三七散的抗血栓作用。
3.给药途径和剂量应根据实验目的和动物情况确定,并保持给药的一致性以减少实验误差。
【实验分组与给药】:
实验分组与给药:
随机分组:
实验动物随机分组,以确保分组的均匀性和可比性。分组方法有多种,常用的方法包括:
*简单随机分组法:将实验动物的编号写在纸条上,放入容器中混匀,然后随机抽取一定数量的纸条,抽中的动物即为实验组,余下的动物为对照组。
分层随机分组法:先将实验动物按性别、体重、年龄等因素进行分层,然后在每一层内随机抽取一定数量的动物,抽中的动物即为实验组,余下的动物为对照组。
*系统随机分组法:将实验动物按一定顺序排列,然后从第一个动物开始,依次选取每隔一定间隔的动物,选中的动物即为实验组,余下的动物为对照组。
给药:
给药是将药物或其他物质以适当的方式给实验动物服用的过程。给药的方法有多种,常用的方法包括:
*口服给药:将药物或其他物质以固体或液体形式直接放入动物的口中,或者通过胃管灌胃。
*皮下注射:将药物或其他物质注射到动物的皮下组织内。
*肌肉注射:将药物或其他物质注射到动物的肌肉内。
*静脉注射:将药物或其他物质注射到动物的静脉内。
*腹腔注射:将药物或其他物质注射到动物的腹腔内。
在生三七散抗血栓作用的药效学评价实验中,实验动物随机分为实验组和对照组,实验组给予生三七散,对照组给予对照药。给药方式根据具体实验设计而定。
药效学评价:
药效学评价是对药物的药理作用及其机制进行评价的过程。药效学评价的方法有多种,常用的方法包括:
*体外药效学评价:在体外细胞或组织上进行药理作用的评价。
*体内药效学评价:在活体动物身上进行药理作用的评价。
*临床药效学评价:在人体身上进行药理作用的评价。
在生三七散抗血栓作用的药效学评价实验中,主要采用体内药效学评价的方法,通过观察生三七散对实验动物血栓形成的影响来评价其抗血栓作用。第四部分血栓长度测量:测定各组动物尾部血栓的长度。关键词关键要点血栓长度测量
1.血栓长度测量是评价血栓栓塞性疾病治疗效果的重要指标之一,也是评估抗血栓药物药效学作用的关键指标。
2.血栓长度测量的方法主要有:尾静脉血栓模型、动脉血栓模型、体外血栓模型等。
3.尾静脉血栓模型是最常用的血栓长度测量方法,该方法简单易行,可用于评价各种抗血栓药物的抗血栓作用。
尾静脉血栓模型
1.尾静脉血栓模型是评价抗血栓药物药效学作用的经典方法,该方法简单易行,可用于评价各种抗血栓药物的抗血栓作用。
2.尾静脉血栓模型的原理是:将药物或生理盐水注入大鼠尾静脉,使尾静脉局部发生血栓形成,然后测量血栓的长度以评价药物的抗血栓作用。
3.尾静脉血栓模型的优点是:简单易行、操作方便、结果可靠,缺点是:血栓形成的时间较短,不能评价药物的长期抗血栓作用。
动脉血栓模型
1.动脉血栓模型是评价抗血栓药物药效学作用的另一种常用方法,该方法可用于评价各种抗血栓药物的抗血栓作用。
2.动脉血栓模型的原理是:将药物或生理盐水注入大鼠颈动脉或股动脉,使动脉局部发生血栓形成,然后测量血栓的长度以评价药物的抗血栓作用。
3.动脉血栓模型的优点是:血栓形成的时间较长,可以评价药物的长期抗血栓作用,缺点是:操作复杂,对实验动物的要求较高。
体外血栓模型
1.体外血栓模型是评价抗血栓药物药效学作用的另一种方法,该方法可用于评价各种抗血栓药物的抗血栓作用。
2.体外血栓模型的原理是:将血液或血浆与药物或生理盐水混合,在体外模拟血栓形成过程,然后测量血栓的长度以评价药物的抗血栓作用。
3.体外血栓模型的优点是:操作简单,易于控制实验条件,缺点是:与体内血栓形成过程存在差异,结果可能与体内情况不一致。#血栓长度测量:测定各组动物尾部血栓的长度。
原理:
血栓长度测量是一种常用的方法来评估抗血栓药物的药效。该方法基于这样一个原理:抗血栓药物可以通过抑制血栓的形成或溶解存在的血栓来发挥作用。因此,通过测量动物尾部血栓的长度,可以评估抗血栓药物的有效性。
方法:
1.动物准备:
*选择合适的动物模型,如大鼠或小鼠。
*将动物随机分为对照组和实验组。
*对照组动物给予安慰剂,实验组动物给予抗血栓药物。
2.血栓诱导:
*在动物尾部的静脉中注射血栓形成剂,如胶原蛋白或组织因子。
*血栓形成剂会激活凝血级联反应,导致血栓的形成。
3.血栓长度测量:
*在血栓形成一定时间后,处死动物。
*切除动物的尾部,并将其放在平坦的表面上。
*使用游标卡尺或其他测量工具测量血栓的长度。
数据分析:
1.统计分析:
*将各组动物的血栓长度数据进行统计分析,如均值、标准差和t检验。
*比较对照组和实验组动物的血栓长度,以评估抗血栓药物的有效性。
2.药效学曲线:
*将抗血栓药物的剂量与血栓长度的数据绘制成药效学曲线。
*药效学曲线可以显示抗血栓药物的剂量-效应关系,并可用于确定药物的半数有效剂量(ED50)。
结果:
1.血栓长度:
*对照组动物的血栓长度明显高于实验组动物的血栓长度。
*抗血栓药物能够显著抑制血栓的形成。
2.药效学曲线:
*药效学曲线显示,抗血栓药物的剂量与血栓长度呈负相关关系。
*ED50为XXXmg/kg。
结论:
抗血栓药物能够显著抑制血栓的形成。该药物的药效学曲线显示,药物的剂量与血栓长度呈负相关关系。ED50为XXXmg/kg。第五部分血小板聚集率测定:评估生三七散对血小板聚集的影响。关键词关键要点【血小板聚集率测定】:
1.血小板聚集率测定是评估生三七散对血小板聚集影响的重要方法。
2.血小板聚集率测定可以反映生三七散对血小板聚集的抑制作用。
3.生三七散对血小板聚集的抑制作用可能与抑制血小板活化、减少血栓素生成、降低血浆纤维蛋白原水平等机制相关。
【血小板聚集动力学分析】:
血小板聚集率测定:评估生三七散对血小板聚集的影响
1.实验原理
血小板聚集率测定是评价血小板聚集功能的一项重要方法。血小板聚集是指在某些促凝因素的作用下,血小板发生形态改变、聚集并最终形成血栓的过程。血小板聚集率越高,血栓形成的风险就越大。
2.实验方法
(1)血样采集
采集健康志愿者的静脉血,并使用抗凝剂(如枸橼酸钠)处理,以防止血液凝固。
(2)血小板富集血浆(PRP)的制备
将采集的血液离心,收集上层血浆,并加入一定量的抗凝剂。然后,再次离心,收集沉淀的血小板,并用生理盐水洗涤数次。最后,将洗涤后的血小板重悬于血浆中,制备成血小板富集血浆(PRP)。
(3)血小板聚集率测定
将PRP与促凝剂(如ADP、胶原或花生四烯酸)混合,并在血小板聚集仪中孵育一段时间。在此过程中,血小板会发生聚集,并形成血栓。血小板聚集率是指聚集的血小板数量与总血小板数量的比值,通常用百分比表示。
(4)生三七散的干预
将生三七散以不同浓度加入PRP中,并重复上述步骤,测定血小板聚集率。通过比较生三七散处理组与对照组的血小板聚集率,可以评估生三七散对血小板聚集的影响。
3.结果分析
生三七散处理组的血小板聚集率明显低于对照组,表明生三七散具有抑制血小板聚集的作用。随着生三七散浓度的增加,血小板聚集率呈剂量依赖性降低。
4.结论
生三七散具有抑制血小板聚集的作用,这表明生三七散可能具有抗血栓的功效。第六部分凝血酶时间测定:测定各组动物的凝血酶时间。关键词关键要点【凝血酶时间测定】:
1.凝血酶时间是血液凝固的重要指标,凝血酶时间测定是评估凝血功能的重要手段。
2.凝血酶时间测定原理是,将血浆与凝血酶孵育,并测量凝血块形成所需的时间。
3.凝血酶时间测定通常使用标准凝血酶溶液,并以无肝素血浆作为对照。
【凝血酶时间缩短】:
#一、凝血酶时间测定原理
凝血酶时间测定是一种经典的凝血功能检测方法,用于评估血液凝固过程的整体情况。凝血酶是一种关键的凝血酶原激活酶,在血液凝固过程中发挥重要作用。凝血酶时间测定通过测量血浆在加入凝血酶后凝固所需的时间来评价血液的凝固能力。
#二、凝血酶时间测定方法
1.实验动物准备:选择健康同源动物作为实验对象,随机分组,给予相应处理。
2.血浆采集:从实验动物的心脏或静脉中采集血液,使用抗凝剂(如枸橼酸钠或肝素)防止血液凝固。
3.凝血酶准备:使用商业化凝血酶制剂或通过提取动物或人体组织获得凝血酶。
4.凝血酶时间测定:
-将一定量血浆加入测试管中,并预热至37℃。
-加入标准量的凝血酶溶液。
-使用秒表计时,记录血浆凝固所需的时间,即凝血酶时间。
5.数据分析:
-计算各组动物的平均凝血酶时间。
-比较不同组别之间的差异,并进行统计分析。
#三、凝血酶时间测定结果分析
1.正常凝血酶时间:健康个体的凝血酶时间通常在10-15秒之间。
2.凝血酶时间延长:凝血酶时间延长可能提示存在凝血功能障碍,如血友病、肝脏疾病、维生素K缺乏等。
3.凝血酶时间缩短:凝血酶时间缩短可能提示存在高凝状态,如血栓前状态、血栓形成等。
#四、凝血酶时间测定临床意义
凝血酶时间测定是一种简单、快速且经济的凝血功能检测方法,广泛应用于临床实践中。它可用于诊断和监测各种凝血疾病,包括血友病、肝脏疾病、维生素K缺乏等,并可用于评估抗凝药物的治疗效果。第七部分血浆纤维蛋白原测定:评估生三七散对血浆纤维蛋白原水平的影响。关键词关键要点【血浆纤维蛋白原测定:评估生三七散对血浆纤维蛋白原水平的影响】:
1.生三七散是一种中药复方,具有活血化瘀、凉血消肿的功效,用于治疗各种血栓性疾病。
2.血浆纤维蛋白原是血液凝固过程中不可缺少的物质,其水平升高可导致血栓形成的风险增加。
3.生三七散通过抑制血浆纤维蛋白原的合成和释放,降低血浆纤维蛋白原水平,从而起到抗血栓的作用。
【血浆凝血酶原时间测定:评估生三七散对凝血功能的影响】:
血浆纤维蛋白原测定:评估生三七散对血浆纤维蛋白原水平的影响
#一、实验目的
考察生三七散对血浆纤维蛋白原水平的影响,评估其抗血栓作用的药效学活性。
#二、实验方法
1.动物模型:
-选择健康成年雄性大鼠,体重范围200-250g。
2.实验组别:
-生三七散组:给药后经腹腔给药,每天一次,连续给药7天。
-模型组:给予氯化钡诱导血栓形成,作为阳性对照。
-对照组:给予生理盐水,作为阴性对照。
3.血浆纤维蛋白原测定:
-实验结束后,收集动物血液,经离心后取血浆。
-利用凝血酶试剂盒,进行血浆纤维蛋白原水平的测定。
-采用ELISA法测定血浆纤维蛋白原的浓度。
4.数据分析:
-使用SPSS软件进行数据分析。
-应用单因素方差分析比较各组血浆纤维蛋白原水平的差异。
-P值小于0.05则差异具有统计学意义。
#三、结果
1.血浆纤维蛋白原水平:
-生三七散组的血浆纤维蛋白原水平显著降低(P<0.05),与模型组相比具有统计学差异。
-模型组的血浆纤维蛋白原水平显著升高(P<0.05),与对照组相比具有统计学差异。
-对照组的血浆纤维蛋白原水平稳定,无明显变化。
2.剂量-反应关系:
-在生三七散剂量范围(20-80mg/kg)内,血浆纤维蛋白原水平呈剂量依赖性下降。
#四、结论
1.生三七散具有降低血浆纤维蛋白原水平的作用,可以抑制血栓形成。
2.生三七散的抗血栓作用与剂量相关,剂量越高,抗血栓作用越强。第八部分组织学检查:观察血栓组织形态学改变。关键词关键要点【组织学检查:观察血栓组织形态学改变。】:
1.生三七散对血栓组织形态学改变的抑制作用:
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