维生素C的抗氧化作用对绿茶茶多酚提取效率的影响

生化分离提取技术

——综合实训维生素C的抗氧化作用对绿茶茶多酚的提取精制工艺的影响组员：韩褒07、廖达华21、冯志荣06、何俊江08、梁俊君23茶多酚简介茶多酚（TeaPolyphenols）是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。主要为黄烷醇（儿茶素）类，儿茶素占60~80%。类物质茶多酚又称茶鞣或茶单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。茶多酚的药效作用茶多酚的主要用途1）清除自由基2）抗氧化作用3）抗菌作用4）抗病毒作用5）抗紫外线照射作用6）防治心血管疾病7）除臭8）延缓衰老9）抗龋护齿10）抗肿瘤作用11）抗辐射作用12）多药耐药性逆转作用1）抗肿瘤药物2）心血管保健药物3）抗病毒制剂4）化妆品5）食品抗氧化添加剂6）口腔保洁剂7）饮料8）保鲜剂与保色剂9）除臭剂维生素C简介维生素C（英语：VitaminC，又称L-抗坏血酸）是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素。抗坏血酸在大多的生物体可借由新陈代谢制造出来，但是人类是最显著的例外。最广为人知的是缺乏维生素C会造成坏血病。在生物体内，维生素C是一种抗氧化剂，保护身体免于自由基的威胁，维生素C同时也是一种辅酶。其广泛的食物来源为各类新鲜蔬果。遇空气和加热都易引起变质，在碱性溶液中易于氧化而失效。在空气条件下。在水溶液中迅速变质，是强还原剂。茶多酚的提取工艺1）溶剂提取法2）离子沉淀法将茶叶用极性溶剂浸渍，然后把浸取液进行液—液萃取分离，最后浓缩得到产品。当前工业化生产主要采用此法。产品收率5%~10%，产品纯度为80%~98%。所用溶剂有丙酮、乙醚、甲醇、已烷及三氯甲烷等。该法生产成本高，且易造成污染。用金属沉淀茶多酚，使其与咖啡碱分离，该方法使用了对人体有毒的重金属作沉淀剂，所以，用该法生产的产品难达到食品和医药行业的要求。3）柱分离制备法凝胶柱、吸附柱和离子交换法。此项技术的关键是柱填充料和淋洗。研究表明，采用柱分离制备法，茶多酚得率在4%~8%之间，纯度可达98%，但柱填充料非常昂贵，而且淋洗时要用多种和大量有机溶剂，显然不适合工业化生产。维生素C的抗氧化作用

对绿茶茶多酚的提取精制工艺的影响实验材料及设备实验材料与试剂：绿茶、乙醇、蒸馏水、碳酸氢钠、盐酸、乙酸乙酯、维生素C、磷酸氢二钠、酒石酸钾钠、ALCL3·6H2O、ZnSO4·7H2O实验设备：冷冻离心机、减压旋转蒸发仪、电子天平、水浴锅、紫外-可见光分光光度计、烘箱、分液漏斗、移液管、洗耳球实验步骤1）茶叶的预处理将准备好的茶叶干燥、分拣、去尘、去杂，研碎过60目筛备用2）超声波辅助浸提准确称取2.0000g过60目的茶叶沫雨50mL的容量瓶中，按料比1:15加入30mL65%的乙醇溶液，放入超声波清洗机中设定温度50℃，浸提时间30min，浸提2次；将浸提液过滤到100mL容量瓶中，用蒸馏水定容。按GB8313—87方法测定茶汤中茶多酚的含量。编号123456重量g2.0072.0012.0042.0022.0072.010茶多酚提取率的测定：采用酒石酸亚铁比色法，取0.4ml提取液加入25ml容量瓶中，加入4ml蒸馏水和5ml酒石酸亚铁溶液，再用磷酸缓冲液定容，静置10min。在540nm处测吸光度A,按公式计算茶多酚的含量。

样品编号123456吸光度A10.5450.5520.5960.7970.7590.678吸光度A20.5460.5520.5930.7970.7580.674吸光度A30.5470.5530.6070.7970.7600.656吸光度平均值0.5460.5520.5990.7970.7590.669茶多酚含量26.60%27.00%29.24%

38.96%37.00%

32.56%

实验数据茶多酚的沉淀按沉淀剂：茶叶=3:20加入沉淀剂；沉淀剂采用AlCl3·6H2O和ZnSO4·7H2O按1:2混合。之后使用1mol/L的NaHCO3调节ph=6.0，在50℃下进行5min的沉淀。沉淀后，在15min，8000r/min条件下迅速离心分离。避免茶多酚的氧化。沉淀的转溶在得到的沉淀物中加入25%HCl的盐酸溶液10ml转溶，适当震摇直至沉淀消失。沉淀转溶时，pH值波动大，极易造成茶多酚的氧化破坏，于涛严格控制，尽量保持酸性条件条件改变：1、2、3号管不添加维生素C4、5、6号管添加维生素C0.03mg茶多酚的萃取与干燥乙酸乙酯以1:1的体积比连续萃取上述溶液中的茶多酚2次。（注：上层为乙酸乙酯，下层为25%盐酸溶液）萃取液用减压旋转蒸发仪减压浓缩（65℃），浓缩液在烘箱中干燥制取茶多酚粗品。样品编号123456空瓶重量99.0399.32126.10/99.0399.32总重量99.0699.34126.13/99.0999.42m茶多酚0.0750.050.075/0.150.10提取率3.74%2.50%3.74%/7.47%4.98%实验数据：影响茶多酚提取率的因素1）超声波提取时的温度与溶剂浓度与超声时间2）沉淀转溶时pH值也会影响茶多酚的提取率因为茶多酚易溶于温水(40℃一80℃)和含水乙醇中；稳定性极强，在pH值4—8、250℃左右的环