生物产品分析方法与数据处理

《生物产品的分析与检验技术》项目一：生物产品分析与检验基础知识

生物技术及应用专业教学资源库主讲人：张惠教学任务任务五、生物产品的分析方法（包括哪些？）任务六、检验结果的数据处理五、生物产品的分析方法物理分析法：根据物质的一些物理常数（如密度、相对密度、旋光度等）与物质的组成及含量之间的关系来分析；化学分析法：根据物质的化学性质进行分析，包括滴定分析与重量分析；仪器分析法：借助一些分析仪器（GC、HPLC等）

将已知浓度的标准溶液滴加到被测溶液中（或将被测溶液滴加到标准溶液中），按化学计量关系定量反应为止，后测体积，根据浓度与体积测定物质的含量。滴定分析五、生物产品的分析方法几个概念：1）化学计量点：液中滴定物质的量与被测物质的量按化学计量定量反应完成；2）滴定终点：滴定过程中，指示剂发生颜色变化的转变点称为滴定终点；3）滴定误差：滴定终点与化学计量点不一定刚好符合，由此所造成的分析误差为滴定误差；4）滴定液指已知准确浓度的溶液，又称标准溶液，可用来滴定被测物质。五、生物产品的分析方法需注意（适合滴定分析必须具备一定条件）：（1）反应必须按方程式定量地完成，要求在99.9%以上；（2）反应能够迅速地完成；（3）共存物质不干扰主要反应或可用适当的方法消除其干扰；（4）有比较简便的方法确定化学计量点。五、生物产品的分析方法滴定分析的误差：A称量误差每一份试样的称量至少大于0.1g；B滴定误差（1）滴定管、移液管和容量瓶的读数；（2）标准溶液的的浓度应控制在0.01~0.1mol/L,每一份试样消耗标准溶液的总体积应控制在20~30ml之间；C滴定误差如指示剂不能准确地在化学计量点时改变颜色。五、生物产品的分析方法（二）重量分析法它根据生成物的质量来确定被测组分含量的方法，先用适当的方法将被测组分与试样中其他组分分离，转化为一定的的称量形式，然后称重，由称得的物质的质量计算该组分的含量。五、生物产品的分析方法（三）紫外-可见分光光度法分光光度法按所用的光的波谱区域不同可分为可见分光光度法(400~780nm)、紫外分光光度法(200~400nm)和红外分光光度法(3000~30000nm)；

紫外-可见分光光度法是能过利用物质对200~780nm光谱区域内的电磁辐射具有选择性吸收，对物质进行定性和定量分析的方法；紫外-可见分光光度法紫外可见分光光度计五、生物产品的分析方法（四）原子吸收分光光度计

工作原理是将试液喷射成细雾，与燃气混合后进入燃烧的火焰中，被测元素在火焰中转化为原子蒸汽；

气态的基态原子吸收从光源发射出的与被测元素吸收波长相同的特征谱线，使该谱线的的强度减弱。后经放大器放大，由显示系统显示吸光度或光谱图。原子吸收分光光度计原子吸收分光光度计原子吸收分光光度计定量分析的理论依据：基态原子蒸气的吸光度与试液中待测元素的浓度及光程长度的乘积成正比。

A=K’cL其中：1）K’—与实验条件有关的常数；2）c——基态原子的蒸气浓度；3）L——光程长度；五、生物产品的分析方法（五）气相色谱分析法气相色谱(GC)是一种把混合物分离成单个组分的实验技术，它常用来对样品组分进行鉴定和定量测定。如果对未知样品的组分全然不知时，可采用气相色谱与红外光谱联用的方法进行测定。气相色谱有很强的分离能力，而质谱、红外光谱可测定未知物的结构。/portal_new/newweikeinfo/weikeinfo.html?weikeId=-7euaxenikjihd7fzdvdxq

（智慧职教——气相色谱分析）五、生物产品的分析方法（六）高效液相色谱法高效液相法此用了气相色谱的理论，流动相（液体）改为高压输送；色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。高效液相（HPLC）具有分析速度快、分享效能高、自动化等特点。高效液相色谱仪/portal_new/sourcematerial/edit_seematerial.html?docid=e2t8adirwoxgdyxgfgmc4q（智慧职教—王若超,山东商业职业技术学院,高效液相色谱的使用）/portal_new/sourcematerial/edit_seematerial.html?docid=e2t8adirwoxgdyxgfgmc4q（智慧职教—牛晓东,重庆医药高等专科学校，高效液相色谱仪操作流程）六、数据分析与处理（一）误差

1、误差产生原因及分类1）系统误差（1）方法误差（2）仪器误差（3）试剂误差（4）个人误差2）偶然误差在分析过程中由于某些偶然的原因造成的误差，也叫随机误差或不可定误差。六、数据分析与处理误差（Error)和准确度(accuracy)误差：测定值（用x表示）与真值(truevalue,用T表示）之差。准确度：测定平均值与“真值”接近的程度，用相对误差表示准确度.相对误差绝对误差Ea

=

-Tx24例:滴定的体积误差VEaEr20.00mL0.02mL0.1%2.00mL0.02mL1.0%六、数据分析与处理偏差与精密度：偏差即各次测定值与平均值之差；精密度即平行测定的结果互相靠近的程度；26数据的集中趋势1.平均值例：测得c(NaOH)为

0.1012,0.1016,0.1014,0.1025(mol.L-1)

x=0.10172.标准差283.变异系数相对标准差(变异系数)六、数据分析与处理结论：1.精密度好是准确度好的前提;2.精密度好不一定准确度高(系统误差)。六、数据分析与处理误差的减免:（1）选择恰当的分析方法（2）减少测量误差（3）增加平行测定次数（4）消除测量中的系统误差①方法校正②校准仪器③作对照试验④做空白试验是不是让人让人很恼火？哈311.数据分析案例1-方差分析利用SPSS做方差分析321.数据分析案例1-方差分析利用SPSS做方差分析332.