PDA TR41病毒过滤-2008（中英文）

2General2.3VirusRetentio3VirusFilterSelectionandCharacteriz3.5ProteinRecovery(Adsorption/Retention/Biocompatibility)蛋白质恢复（吸附/3.9Viral/PhageChallengeTesting3.10Cleaning/Sanitization/Sterilization清理/消毒/灭菌4PhysicalandMech5VirusFilterValidation/EvaluationStudies病毒过滤器/评估研究175.2.3VirusSpike病毒峰值再验证的运行条件和运行次数5.5.2IntegrityTestingduringDevelopment研发期间的完整性测试5.5.3MembraneLotSelecti5.5.4Feedstream原料流5.5.5FiltrationConditions过滤条件5.6VirusAssaysandAssayValidation病毒分析试验和分析验证5.6.1AssayMethodValidation试验方法验证5.7EstablishingRepresentativeWorst-caseProcessConditions确定代表性的最坏工艺条件6IntegrityTesting完整性测试6.1Manufacturer'sChecklist生产商检验单6.2.1DextranRetention葡聚糖滞留6.2.3Gas-LiquidPorosimet6.2.7AutomatedIntegrityTestInstrumentsMethods基于气体测量仪测试法的自动完整性测试仪器6.2.8LiquidandLiquid-liquidPoro6.3RelationshipbetweenIntegrityTestsandVirus/PhageReten和病毒/噬菌体截留之间的关系6.4FailureAnalysis/Troubleshooting故障分析/处理7.2AutoclaveSterilization高压蒸汽灭菌7.3Sterilize-in-Place(SIP)在线灭菌7.4IrradiationSterilization辐射灭菌APPENDIXA:VirusRetentionandProteinPassage附录A：病毒截留和蛋白质通过的术语分类器的试验方案B.1.5Scaled-downModelFB.1.7SetPointValuesforRelevantOperatingParameters相关运行参数的设定B.3ProcedureForTheEstimationofBacteri分析用的稀释管和软琼脂制备B.3.3.3PhageAssays噬菌APPENDIXC:FILTERVALIDATIONRECOMMENDATIONS附录C：过滤器验证建Scope:ThisPDATechnicmanufacturedbycomplexmanufVirusfiltrationisperformedaspartostrategy.Inthiscontext,viofvirusclearancecomplementsadditionalmeasmeasuresformtheframeworkofavirussafetystrategy.病毒过滤作为生产商病毒安两者都将促进病毒清理（见样例11-20）。执行病毒清理增加了额外测量，如原材料控Theriskoftransmissionofcemitigatedbydonorscreening,vacciarespecificallydesignedto(protein)solutionthroughasizeexclusionmechanism.转是通过尺寸排除装置移除病毒和产品（蛋白质）中particulartoeachfilterorfiltertype.Thesecharacteristicsinclufiltrationisconductedbyeithe(DFF)ortangentialflmodeoffiltration(DFForTFF)isusuallybatobefilteredorpeconomics.商用病毒移除过滤器对每种过滤器或过滤器类型都有不同的膜特性。这些移和吸附功能。病毒过滤器管理通过直流(也叫做终端或正常)过滤器(DFF)或分流过滤器（TFF）。过滤器模式的选择（DFF或TFF）通常根据过滤溶液的特性或工艺问题，poreisreferredtoassievingorsize"skinned"ultrafiltrationmembranesthatcontainpinholedefproteinconcentration,maynot微粒会滞留在膜的表面或穿透至膜的结构中。发生滞留是因为微粒太大而无法穿过气孔，这就是所谓的筛分或尺寸排除。传统的非对称表面“表层”但仍然适用于蛋白质浓度，可能不会持续提供大分子病毒的高清ofdifferentforcesatdifferentadsorptionsiteswithinthemeAdsorptionofviruses,whenitoccurs,isasexclusionisconsideredtobethemain器清理的主要方法。processwhenthepurposeistocharacteprocesstoremoveand/orirobustnessofthepurificationprocess.非特定病毒模型：一般来说，当用来描述生产工艺病毒移除和/或灭活的能力时，病毒具有工艺病毒清理的特性，即描述提纯工艺的processtoremoveand/orinactivateviruses.病毒清理的工艺特性：在病毒清理研究ProcessEvaluationStudiesofViralClearancrelevantand/orspecimanufacturingprocesstoremoveand/orinactivatetheseviruses.病毒清理的工艺评估研究：在病毒清理研究中，相关和/或特定“模切关联，作为那些被观测或可疑病毒，病毒拥有类似的ViralInactivation:ReductionVirusRemoval:Physicalseparationthefilterrating.Forvirusesbelowthefilter'srating.典型的病毒过滤器FigureFigure1.Depictionofthelogreductionfactor(LRV)asafunctionofvirussize.Especiallyforfiltersdesignedtoretainlargerviruses,retentionwillbehighandreproducibleforlargerviruses,case-specificandlesspredictableforintermediatesizedviruses,andnegligibleforthesmallestofviruses.图表1.对数减少系数（LRV）的描述作为病毒大小功能的。尤其对设计用于较大病毒的过滤器，滞留较高，且较大病毒可再生，中等大小病毒根据情况确定且可预测性较小，最小病毒可忽略。(asidefromsize),feedsolution,andoperatingssoffilterretention.Designingareliabfthickness,numberoffilterlayers,andfilterporesizedisVirusfilterretentionpropertiesmaychangeduringthProteinaggregatesmaydepositonthesurfaceofthefilterduringthefiltrationprocess.ForTFF,prpolarizationactingasasecondaryvirusseparationlaunderthechangingconditionsofconcentrflowpatternswithinthrelativetotheinitialorH2Ofluxislower.病毒过滤滞留的特性可能在过滤期间有所改分布的可能性。在这两种情况下，与原始细胞或水溶剂有关的工艺液体流动较Spikingstudiesarecommonlyusedtocharacteaparticularvirusunderspecifiedconditions.Inthesestudsystemsareused,andthefeedstreamisspopeningsthataretoosmalltopenoperatingconditions.However,dependenceofretentiosecondary,tighterseparationlayer,leadingto件的影响。但是，已经识别关于每单位过滤区滤液容积滞留的相关性（22-24）。使用孔径分布的较细端，使更多微粒转而流向更大的气孔，从而导致较低病毒浓度的减少。asymmetricmembranestructurewherethe变窄，膜结构内可能发生基于滞留的尺寸排除。这也叫做滞留或深度surfaceoronsurfaceswithintheporousstructurethroughanadsorpAdsorptivesitesmayholdthevirusthroughavarietyofforcesWaalsforces,hydrogenbonding,stericent(22).比孔径更小的病毒可能被拦截在薄膜表面或通过吸附机理停留在多孔结构表面。的薄膜孔径病毒大小，从而使病毒接触到膜孔表面，也叫做拦截或阻塞工艺。Similaradsorptiveforcescanleadtoviralaggregationwithinfluidsasintheformationofimmunecombinationofadsorptiontoformlargeraggregatesfoaggregates.类似的吸附法可能导致液体内病毒聚合物带有其它病毒或蛋白质或其它可以通过先吸附形成更大的聚合物，进而根据聚合obstructingvirusesfromreachingthemembranesurface,therebycontributing也会在阻挡病毒附于薄膜表面发挥了作用，因而Alloftheseretentionmechanisms2.3VirusRetentionProbabilityofRedprobabilitythatanyindividualviruswillpaconstant,whileforvirus/filtercombinationsdemonstratingdetectablepenetration,thefiltratevirustiterwillchangeproportionallywithanychange工业操作来研究低浓度挑战的结果。过滤器滞留的可能性，减少因素（RF）—也叫做明可检测穿透力，过滤病菌的能力将随着供给病毒的浓度变化而做出相应的变2.4VirusSize/RetentionRating病Retentionratingsshouldassistthefilteruseassignedaratingassociated病毒过滤器的滞留量等级基数对于不同的过滤器生产商来说差别很大。在有些情况下，下，病毒大小级别要么根据所给的RF特定模型（例如，噬菌体）制定，要么根据数学viruseslargerthanthefilterrating,withvariableclearanceforvirusesbelowthviruses(parvovirus,>18nm).如上所述，病毒过滤器能够持续提供比过滤等级更大的毒过滤器选择重要的是用有哺乳动物病毒的滞留性能。病毒过滤量应仅用于额定），ThePDAhasorganizereachedanagreementtodefineanomenclaturestandardforlmethodtoaccommodatesupplieroperatingpressure.Afteragreementonthemanufacturersweretestedandfoundtoconformtothenewstandardsforfilterscapableo定义标准命名（附录A）。标准根据规定测试条件下（附录B64-82nm噬菌体的6个对数滞留，PR772（25，26），和模型工艺生产液流的95%的通过量，IVIG建立。为））2.5ProteinSize/Sieving/PassageRating蛋anddecreaseyield.forotherfiltersinvalidationguidesorproductliterature.蛋白质原料药（API）通过是theconditionsunderwhichthemembraneisoperated,incnominalguide,virusfilterscanbeconsiderekeyforvirusfilterselectionandfavorablepro通过中发挥很大的作用，只要它们通过二聚化和双层信息（27）就指南，病毒过滤器可以认为是让中等蛋白质的。仔细的特定工艺分析是病菌过滤器选择和合适工艺经济的关No.26andotherpublications(28,29).过滤原则的进一步见解包含于FDA技术报告第3VirusFilterSelectionandCharacterization病毒过滤选择和特性clearanceandproteintransmissionrequirements,sterichemicalcharacteristicsoftheproduct.选择病毒艺特性，包括批量、过滤量和/或产品的容量、流量、压力差、温度和化学特limitations,sterilizationoptions,application.过滤模型（DFF或TFF）的选择由产品和特定工艺考虑规定。一般认为，品浓度、pH值或其他属性；以及潜在病毒污染物的特性。工艺考虑包括工艺需求，如分考虑的重要问题是确定规定程序的最优过3.1FilterConstructionsurface-modifiedpolyvinylidenefluoride,and(cuprammonium-)regeneratedcellulAdditionalmaterialsofconstructionthatconpolypropylene,urethane,andpolyvinylidenefluoride.Additionalcincludesurfactantsorhumectantsthasurfacemodificationsand/oradditivesusedtorend/或用于使得滤过膜吸水的添加剂，或贮藏过程中防止微生物增长的防腐剂。theporesizedistributioproperties.Ultrafiltrationmembranesresponsiblefortheretent(downstream)sublayerthatessentiallyservestosupporttheskinlrestrictingtheflowproperties.除了常见围可能在在<0.1微孔量的微孔膜和标准重量界限量>100000kDa之间的粗超滤膜之间。的原因，高度多孔（下游）子层主要支持表层流动特性3.2FilterSystemConfigurations过滤器系统配置mode,therearetwomajretainedthroughouttheporestructure,therebycloggingthereasons,DFFsystemsaredesignedforsingle-useapplicaforcleaningandcleaningvalidation.在过滤评估期间，最好考虑所有工艺变量，因此ultrafiltrationmembranes.Similartothe"sterilizinggrade"fiavailableinavarietyofcartridgeormoduleformvalidationstudies,tomultiplefiltercartrWhileflatstockmembraneshavebeenusedforthereareadvantagestoworkingwithsmallmodarenowavailableasfullyhousingsthateliminatecleaningandcleaningvalidationoff移除验证研究用的小规模膜盘（直径是13mm到47mm）和中空纤维模块到用于大规模入滤芯的塑料支架或外壳，减少滤壳的清洁industrytowardsso-called"disposresultedintherecentavailabilityoflarge-scalemostdisposablefiltercapsulesorelementscannot(SIP),althoughtherearesomeexceptio虽然在过去，只有小面积过滤器可用作可处理的过滤器滤芯，一般在1500cm2之下，都无法在位（SIP）灭菌，这很重要，虽然有些例外。大多数DFF过滤器滤芯能压热气作用，且可能预先灭菌，要么通过高压灭菌法，要么通filter,sothattheprimaryflowoccurstangential(or并减少堵塞量及范围。总的来说，TFF过滤器除了较高微粒负荷的能力器滞留的活性和非活性污染物集中在滞留物ultraporousormicroporousfiltrationmembranes.TFDFForTFFmode.用于TFF过滤器的过滤膜可以是不对称的或对称的多孔或微孔可用区域范围在实验室规模评估的d"100cm2的使用到大规TheappropriatefilconfigurationandtheprinmoredetailinSection4.对于特定的过滤程序，在实验室的实验中使用相同的过滤行的，从中可以推测出更大的配置，但应考虑考虑过滤器配置和工艺流动影响。第4部3.3ParticulatesandExtrFilterscanpotentialldebris.过滤器可以将微粒或提取物（例如，过滤器中可溶解的化学成分）排放入生物聚物，用于提取滤过膜的表面改性和/和添加剂，贮藏期间加强预防微生物生长的防腐剂，用于生产聚合物成分的添加剂以及生产suchasdiafiltrationorchromatographycapableofremovintermediates.不像无菌过滤器，病毒过滤器一如移除提取物和/或来自API的微粒的过滤或层析能力。USP章节<78Severallevelsofcontrolforparticulatesanvirusfiltration.First,aqueoussolutions.Filtermanufacturersgenerallylot-releasfilterextractables,intermsofquantitcontentshouldbeconsideredduringap冲溶液属性如pH值或去污剂含量应考虑潜在提取物的特定工艺评估。过滤器生产商一般执行关于潜在过滤提取物的USP生物毒性<87>(试管中的生物反应测试)或<88>designedtoensureremovalofpreservatives/humectantsorstoragesolutioprocess.Theextractablesstudfincludingprocessvolume,duffilterextractables.在生物工艺期间，终端用户利用过滤器冲洗程序，设计用于保证防腐剂/保湿剂或存储溶液的移除优先使用，微粒和提取物也是。获取可行数据生物工艺的中间产物或缓冲公式，并评估是否特定产品能够从过滤器中获得不需要的提取物级提取物研究/评估应陈述提取测试数据对实际工艺的适用性。这应包括对工艺时间影响洗的工艺条件都应该考虑在内。Suitableanalyticalossiblelossofunknownanalytesinworkup.Analyticaltechnirhromatographymassspectrometry(GC-MS).Whereapplicable,starcompendialmethodsshouldbefollowed,forexample,ASTM,USP.合适的提取级别productand/orprocessonthechemicalshouldbenotedthatbothoftheseeff的兼容性涵盖了产品和/或工艺在化学和物理属性方面的效应，以及过滤器的移除性能。在大多数例子中，生物制药都是采用中性的水蛋白质溶液。对过滤器有类似影响的产品要么是薄膜表面的凝胶层构造要么是孔塞。要注意的是两种效应都能影响Rcartridge/module/cassetteshellandhousingmaterial;encapsulants;andO-ringsusedtosealthemodule/cexample,surfacemodificationoffiltermembranes.在整流网；滤筒/模块/滤芯的外壳和外罩材料；密封剂；陶瓷材料；和环形密封圈。更多关于兼容性问题的的细微因素可能存在于过滤器部件的处理中，比如过滤膜的表面属aggregatesorotherimpurnotprovideenoughinformationforpredictingfilidentifiedaspotentiallyaffectingthephysicalstrengthofthe盐或者极端的酸碱条件的影响必须是验证的一部分。检查可以借鉴以前的经验和/或者Thegoalofthephysical(notjustthefiltermembrane)underactualpprocessfilter.Thetestfilter(s)usassessflowdecayusingactualpr大工艺时间（两倍的最大工艺时间是公认的安全系数）。这是通过在”最差”工艺条件下methodforthefiltertypebothbeforcanalsomeasuretheimpactofprocfilter.必须在过程模拟前后使用过滤器类型的标准方法对其进行外观验证和完整性测/滞留/生物适应性）proteinrecoverymaybeproteinadsorption,whichiscausedbythso-calledgelpolarizationeffects.生物制药和生物产品是典型高浓度的中性蛋白质溶液（比如每毫克大于1毫升）。工艺规定了较高的蛋白质复原率，至少在95%以上。理increaseintheeffluentproteinconcentration.Thiscouldbejwherethefiltersurfacetakessometimetopolarize.Oncethefconcentrationapproachesthatoftheinletfeedconcentration.通常，过滤工艺开始时白质浓度将接近流入口的浓度。fbiotechnological/pharmaceuticalproducts.Afilteredformaximumproductrecovery,and为了达到最大的产品复原率，小批量昂贵的并且相对较稀的蛋白质溶液需要进行becauseofeconomicand/ortimeconstraints.当对于维持每个瓶内的恒定浓度等Thevastmajorityofpassageoflargeproduetothesmalleffectiveporesize这个尺寸（比如单克隆抗体类的分子重量为150000Kda并效孔径和孔径的分布来决定的排除尺寸来实现对目标蛋白质becauseofexcessivebackpressureand/ornearcompleteflowdmonitoredon-linebyconventionalmethods,decisionsduringearlydevelopment,suchasproperselectionofthevirusfshouldbejustifiedbylabora动下降。TFF操作不需要提早结束，但是线监测，例如，A280吸光率。早期开发期间的关键决定对成功是至关重要的，如合理的病毒过滤器选择，产品分布如pH值或离子强度或化学缓冲溶液，以及工艺条件如流量natureofmostbiolotemperatures(>37°C).Moreccompatibilitywithmoistpressure,temperature,andtimeprocessconditions.由于大多数生物分子的不耐热本质，高温病毒过滤并不常见。有些病毒在高温（菌，过滤薄膜及其支持结构在蒸汽灭菌压力、温度和时间工艺条件ThethermalresistanceofvirusfilDFFfiltersandsomeTFFasepticmanipulations.SomeTFFfiltertypescannsitu.病毒过滤器的热阻变化很大，且是过滤器选择的一个重要因素。许多病毒过滤器期数量会变化。有些DFF过滤器类型也可能是在位蒸汽（SIP），就评估或降低无菌操射进行病毒消毒可能通过原位高压或蒸汽再次灭菌，也可能不会。compatibilityofthefilter.Conductingstudiestoconfirmtnotberequiredinallcases.通过高压或蒸汽SIP或重复灭菌是工艺需要，这对过滤器3.7HydraulicStrDuringmoistheatsterilization(ifapplicaundergovaryingpressurediffere产品和工艺验证中会考虑滤过压，它也能用Unlikesterilizinggradefilters,whicharerataresomeTFFfiltertypesthatcanwithstandhigherforwarddifferwithsometypespermitttemperatureorstealimited,typicallynomorethan3-5psi/0.207-0.345BAR.在湿热灭菌（如果可用）和有一些TFF过滤器型号能够承受更高的压力差，高达过滤器的情况下，建议的操作压力差范围在0-60psi/0.69-4.137BAR之间，有些类型下的压力差限制有很大的局限性，一般不超过33.8ToxicityTestingproductqualityifreleasedisafetytestsaresometi与USP<87>（试管中生物反应测试）一致USP<88>（试管中生物反3.9Viral/PhageChallengeTesting病毒/抗菌素免疫性测试Theviral/phagechallengetestservestwomajorfunctions.Somefiltermanufacturtestingdemonstratesconsistencyusingbacteriophageassurrogatesfolimitationsofworkingwithmammalianperformedonverysmallfilterelementsorsmallmembranediscs.病毒/噬菌体挑战测商将它用于批放行测试。过滤器生产商实施小面积薄膜盘的病毒/噬菌体滞留测试，工Theretentiontestconditionsalsovaryquitewthechallengefluid,challengemethod(ASTMF838-83),the“灭菌等级”过滤器，生产商支持执行细菌挑战测试遵照标准测试模型（ASTMAsdiscussedinSeHowever,virus/phagechallengetestingpublishedthattabulat不同的系统。但是，生产商执行病毒/噬菌体挑战测试，或在文章中报道都可以帮助过withactualproductor,wherejustified,suitablesurrogatefluid.ThisinmoredetailinSection5.工艺和产品的特定考虑需要终端用户验证特定产品的病毒过滤工艺。过滤挑战测试应使用实物，或者合理适当的替代液体。第5部分更具体地涉及到该话题。3.10Cleaning/Sanitization/Sterilisusceptibletothermacleaned/sanitized/sterilizedproperly.Thefailuretemperature,highdifferentialpressure,ordegradationofthematerialsofconstruction.themanufacturer'srecommendationsintendeduse.成功的病毒过滤工艺的一个主要元素就是过滤器部件要干净且无菌。过产商的建议对过滤器进行清洗/杀毒/灭菌，且每步工艺都应验证其预4PhysicalandMechanicalCharacterisbriefoverviewispresentedhrequirements,compatibilitywitheachprocessshouldbeevaluated.在选择病毒过滤个简单的概述。虽然过滤材料满足大范围的需要，还是应该评4.1FiltrationRateandClogginbeforeanunacceptablyhighdifappreciablyimprovefiltrationrateandfilterlife.过滤器的流动特性由膜表的面积和膜processparametersandexhibitacceptablefluiddynamicprinciples.measurablechanges,includingreducedefficieparticulates,reducedflocharacteristicsafterexposuretoth4.4PhysicalandStructuralLimhandlingandprocessstressconditions.AlthoughthefilterelementsarequittheystillcanbesubjecttoPressureaspects,including的方向。特殊考虑的两个方面是在位蒸汽（SIP）杀菌压力和水压，如果阀门开得太快Otherphysicalcharacteristicphysicaldimensions,configuration,endca(capsules).Thephysicalchaconsiderations,butbecleadtoprocesscontamination.其方面很重要，而且在因微妙不同而引起工艺污染的其它5VirusFilterValidation/EvaluationStudies病毒过滤器验证/评估研究Thevalidationofvirespecttoitsabilitytoreducethqualificationandviruschallenges.Validationiscompandisdesignedtoperatingrangesvalidatedatthesmall-scalelevelwithviruschallenges.病毒清除验批完成，通常是一致性/验证批。生成规模确认通常是在标准操作条件下运行并用于确Acceptancecriteriaforthevalilevelsofvirus-likeparticlesinretro-viruses)orariskestimatecenfprocesschangesormanufacturingdeviations.验证病毒清除的验收标准在应用时取决于细胞培养给料槽中的病毒类颗粒等级（例如，类型C内于血浆产品的人体病原体检测极限相关的风险评估。在缩小规模研究中获得的数据构成了法规提交中要求的依据。验证结果也确定了工艺变更或生产偏差情况下需要评估Viralclearancecapabilityisinactivationmayalsooccurbecauseofbuffhelpfultounderstandbalancebyviralrecoveryisnotfeasibleofirretrievablevir膜内存在不可复活病毒，病毒复活平衡在病毒过Viralclearancevalidation/evaluationstudiesarerequiredforbiopharmaceuticalsrstudiesareperformedinspecializedlabo清除验证/评估研究是哺乳动物细胞培养，血浆或其他潜在病毒污染源等生物制药所需要的。这些研究测试了过滤器的病毒移除能力。移除的数据称作是RF，例如，原料流中的病毒与滤出液中的病毒比率是1个对数级。为了避免把传染剂带入生产生物制药产品的设施，病毒清除研究应在生产区外的特定实验室进行Thekeyfactorsthatinfluencevirusfilterremovirus,spikingproEstablishingworst-caseconditionsforviruselementforperformingstudiesthatwillmeetcurrentregulatoryexpectationsstagesofclinicaltrialsandforproductlicensure/marketingauthorization.计划和执行找指南来确定研究设计的可接受性，编号，临床试验各个阶段和获得产品许可证/销售5.1FilterProperties过thicknessmaybeimportanttoafilt要的，过滤器依靠其深度滞留，第二重要的是过滤器首先依靠表面elementsofavirusremovalstudy.病毒大小是决定过滤器病毒移除能力的主要原因。择，病毒库制备和储备维护是病毒移除研究中的必不可5.2.1VirusSelectgenomestructure(RNA/DNA),andresistancetophysical/c(characteristicsofvirusfamily)(Tableclearancestepsenablesmeasurementoftheclearancecapacityofthealsoextendstothecategorizationofvirusesthatafmayhavedifferentpropertiesfromeachotherandf病毒过滤主要根据病毒大小,验证中使用的病毒控制板来反应变化的物理结构(大小,纸质),基因结构(RNA/DNA),耐物理/化学性（病毒科特征表1的相同控制板能够测量整个工艺的余隙容量，病毒（例如，血液制品的HIV），和可能processing)virusorevenabacteriophagetovalidateviralclearancebyvitheassumptionthatmustbemadewiththissmallervirusesshouldbescientificallyjustified.Itisproposedvalidationauthoritiesbeyondlimitedcircumstances.有争议的是隙是最坏情况下的RF，也能适用于较大病毒。验证研究中所用的病毒选择和较小病毒毒控制板；如果该假设是否在限制环境外由权威机构赞同，这一点是不清楚的。clearancestudies.TheICHtable病毒ICHQ5A(10)的实例。5.2.2VirusStockPreparationandMaintenance病毒withpropagationandstockbecontrolledtopreventmutati突变发生。Cellsinwhichthevirpropagatedonthewoappropriatelymaintained.保存和繁殖病毒的细过独立的滴定验证并与保存的参考病毒库相Thecharacteristicsofavirusstockwillalswhichcouldcompromisethevalidityofth的繁殖条件，包括细胞系，培养基，温度和传染的多样性，时间，从被传染的培养中能损害余隙研究的正确性。hencetheparticle-to-infectivityratio),aswelviralparticles.Thecultureconditionswiimpuritiesinthestock.SomevirusstocksrStorageconditionsshouldbevalunderdefinedconditionsoftheassaydetectionsystem.应验证储存条件来提供一致在指定的分析探测系统条件下连续检查其滴定givensizeorclassofviruses.Virusstocktiterwilldeterminetheamountofvirusthmaybeused,whichultimatelytranslatesinVirus病毒Genome基因组Envelope附带病毒Shape形状Resistanc)()3011nm,()()3011nm,parvovirusNoNoNo毒Xenotropicmurine毒TableI.Characteristicso5.2.3VirusSpike病Virusstockaddedtoafeedstreamcreatesaspikedfeed-stream.Themaximprocessinthepresenceofthespike.Second,vivolumetriclimitation,tothefeedstream.Third,thevirusarea),alternatespikingmewithproteinandotherimpuritiesinthefeedstiterreductionandcreatinganartificiallyhighRF.添加到原料流的病毒库将产生一个导致聚集或滴定量减少并产生一个人为的高RF。needtodemonstrateclearancetthemaximumachievableviraltiterreductioninverselyrelatedtothevolumeoffiltrateusedtoestimatetheminimum4.原料流