新城疫抗体水平检测

新城疫抗体水平检测TTAstandardizationoffice【TTA5AB-TTAK08-TTA2C】红细红细胞毒颗粒血凝和血凝抑制试验操作方法和结果判定方法。和血凝抑制试验的影响因素，用以确定最佳免疫时间、判定免疫效果和辅助疾。试验(HI)检测新城疫抗体1.血凝试验(HA)原理：某些病毒或病毒的血凝素能选择性地使某种动物的红细胞发生凝2.血凝抑制试验(HI)原理：当在病毒的悬液中加入特异性抗体，且这种抗体的量足以抑制细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或血凝素直接接触。这时红细胞的凝集现象就被抑制，称为红细胞凝集抑制(HI)反应，也称血凝抑制反应。抗原e离心机、恒温箱、冰箱、振荡器、96孔血凝版(5块)、微量移液器(20-100微升可调)、吸液尖(若干)、洗耳球、离心试管、普通试管、试管刷、烧杯、吸量管、一(一)抗凝剂的配制(二)10%红细胞悬液的配制1、用注射器吸取毫升抗凝剂无免疫健康青年公鸡的红细胞毫升。2、1500转离心5分钟，吸弃上清液。3次，前两次5分钟，后一次10分钟。4、吸弃上清液，用吸量管吸取红细胞，配制成10%红细胞悬液。(三)血凝试验(HA)生理盐水5毫升稀释，在第1孔内加入50ul病毒抗原，然后依次倍比稀释至第11孔，最后弃50ul。细胞悬液50ul振荡均匀，后放于室温或37℃中静置30分钟1234567892×4××照＋＋－－－－孔底，即100％凝集；2、＋＋＋：红细胞均匀铺于孔底，当边缘不整齐而稍向孔底集中，即75％凝集；环状，四周有凝集块，即50％凝集；胞于孔底形成圆团，边缘不够光滑，四周稍有凝集块，即25％凝集；边缘光滑整齐，即无凝集。凝单位。(四)4个血凝单位抗原的配制取1毫升已稀释的病原溶液再以8倍稀释，即为4个血凝单位的标准抗原。(五)血凝抑制试验ul生理盐水；2、在第1孔内加入被检血清50ul，然后倍比稀释至第11孔，最后弃50ul；3、第1－12孔内加入4单位抗原50ul(第12孔为病毒对照)；4、每孔加入1％鸡红细胞悬液50ul；室温或37℃中静置30分钟定1234567892×4××－－＋＋＋－孔底，即100％凝集；2、＋＋＋：红细胞均匀铺于孔底，当边缘不整齐而稍向孔底集中，即75％凝集；环状，四周有凝集块，即50％凝集；胞于孔底形成圆团，边缘不够光滑，四周稍有凝集块，即25％凝集；边缘光滑整齐，即无凝集。凝集；如果孔底的红细胞铺平孔底，凝成均匀薄层，倾斜病毒所凝集。能将4单位病毒物质凝集红细胞的作用完全该血清的红细胞凝集抑制效价，用被检血清的稀释倍数HI2×4××——＋＋＋—出现正确结果的情况下，已完全抑制红细胞凝集的最大稀释度为该血清。城疫流行的地区或鸡场，鸡的免疫临界水平应稍提高。(3)鸡群的HI抗体水平(血凝抑制滴度)是以抽检样品的HI抗体效价(㏒2)的几何平均值表I的有2份样品，它们的平均值为：(8×3＋7×5＋6×2)/(3＋5＋2)＝平均水平在4(10g2)以上，说明该鸡群为免疫鸡群。若在检I水平以下的样品数在全部样品中所占的百分比决定免疫与否。，一般认为理想的抽样率应为％。周测血清中的HI抗体效价，若提高2个滴度以上，表示鸡的免疫应答良好，疫苗接种成功；若HI抗体效价无明显提高，表示免疫失败。(6)若有10%以上的鸡群出现11(10g2)以上的高血凝抑制滴度，说明鸡群已受新城疫强的免疫水平，用血凝抑制滴度在4(10g2)的鸡群保护率为50%左右；在g护率达90-