高考生物总复习专题3植物的组织培养技术专题4DNA和蛋白质技术专题5植物有效成分的提取全国公开课一等

专题3、5、6植物组织培养技术、DNA和蛋白质技术、植物有效成份提取第1页考纲内容能力要求命题分析试验：(1)植物组织培养(2)蛋白质提取和分离(3)DNA粗提取与判定(4)从生物材料中提取一些特定成份试验与探究能力试验与探究能力试验与探究能力试验与探究能力 近几年新课标卷以非选择题形式，考查了植物组织培养原理及应用，胡萝卜提取，结合DNA复制考查PCR技术相关知识，以及DNA提取与判定。第2页一、植物组织培养技术1．菊花组织培养：(1)理论基础：植物细胞____________。(2)基本过程：

(3)试验操作步骤：制备MS培养基→外植体消毒→_______→培养→________→栽培。全能性接种移栽第3页2．月季花药培养：全能性四分体时期(1)理论基础：花粉含有____________。(2)花粉发育过程：__________、单核期、双核期等阶段。(3)产生花粉植株两种路径：3．植物组织培养所用培养基为固体培养基。第4页二、DNA和蛋白质技术0.14mol/L蓝色杂质

1．DNA粗提取与判定： (1)试验原理： ①DNA在不一样浓度NaCl溶液中溶解度不一样，浓度为____________时其溶解度最小。 ②DNA不溶于酒精溶液。 ③DNA与二苯胺在沸水浴中呈________。 (2)试验步骤：选材、制备鸡血细胞液→破碎细胞，获取含DNA滤液→去除滤液中__________→DNA析出与判定。第5页

2．多聚酶链式反应扩增DNA片段： (1)PCR原理：在一定缓冲溶液中提供____________、分别与两条模板链结合两种引物、_________________、耐热DNA聚合酶，同时控制温度使DNA复制在______重复进行。 (2)PCR反应过程：变性→________→延伸。3．血红蛋白提取和分离：相对分子质量

(1)凝胶色谱法：也称分配色谱法，是依据_______________________分离蛋白质有效方法。相对分子质量较小移动速度较慢，而相对分子质量较大无法__________________，移动速度较快。进入凝胶内部DNA模板四种脱氧核苷酸体外复性大小第6页(2)缓冲溶液：能够抵制外界___________对溶液pH影响，维持pH基本不变。酸和碱电场(3)电泳：带电粒子在________作用下发生迁移过程。(4)试验操作：①样品处理及粗分离：红细胞洗涤→血红蛋白释放→分离血红蛋白溶液→透析。凝胶色谱柱装填

②凝胶色谱柱操作：凝胶色谱柱制作→_______________→样品加入和洗脱。 ③纯度判定：用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。第7页提取成份提取方法试验流程玫瑰精油 提取水蒸气蒸馏法鲜玫瑰花＋清水―→水蒸气蒸馏―→油水混合物分离油层

橘皮精油 提取压榨法石灰水浸泡―→漂洗―→压榨―→过滤―→静置―→再次过滤―→橘皮油胡萝卜素 提取萃取法胡萝卜―→粉碎―→干燥―→萃取―→过滤―→浓缩―→胡萝卜素三、植物有效成份提取除水玫瑰油第8页[判断正误]1．胚状体是外植体在培养基上脱分化形成一团愈伤组织。()2．外植体消毒标准是既杀死材料表面微生物，又降低消毒剂对细胞伤害。()3．愈伤组织是一团有特定结构和功效薄壁细胞。()4．二倍体植株花粉经脱分化和再分化后可得到稳定遗传植株。()5．用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子。()答案：1.×2.√3.×4.×5.×第9页考点一植物组织培养

1．高度分化植物细胞全能性表示条件： (1)离体状态。 (2)营养物质：有机营养、无机营养。 (3)植物激素：生长素、细胞分裂素。 (4)无菌、适宜外界条件。 2．影响植物组织培养原因： (1)内部原因：材料选取。 (2)外部原因：营养成份种类及配比；植物激素用量及使用次序；pH、温度、光照等。第10页3．取得成功关键：(1)植物组织培养所利用植物材料体积小、抗逆性差，对培养条件要求较高。

(2)培养材料一旦被微生物污染，就会造成试验失败。原因是微生物增殖快，生长快速，消耗养分多，并产生代谢废物毒害培养材料。(3)无菌技术主要包含对操作空间、试验用具、试验材料以及操作者消毒或灭菌。第11页使用次序试验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂又分化同时使用分化频率提升4．植物激素在组织培养过程中主要作用：(1)使用次序不一样，结果不一样：(2)用量比值不一样(生长素/细胞分裂素)，结果也不一样：①比值高：利于根分化，抑制芽形成。②比值低：利于芽分化，抑制根形成。③比值适中：促进愈伤组织形成。第12页5．试验操作中应注意几个问题：

(1)材料选取：菊花组织培养试验中，应选择未开花植株茎上部新萌生侧枝；月季花药培养试验中，应选择花粉发育过程中单核靠边期花粉进行培养。

(2)外植体消毒：所用消毒剂是体积分数为70%酒精和质量分数为0.1%氯化汞溶液，所使用清洗液是无菌水。 (3)培养过程：在早期，菊花组织培养需光照，月季花药培养不需光照，而在后期均需光照。第13页◎高考探究◎考向植物组织培养[典例]下列图是月季花药中未成熟花粉在适宜培养基上形成完整植株过程。以下叙述正确是()A．①②表示脱分化而③表示再分化B．③需要避光处理而①需要光照处理C．①②③说明月季花粉细胞含有全能性D．②过程仍在原培养基中进行，以促进其分化第14页

[解析]图中过程①表示脱分化，过程②表示再分化，过程③表示诱导。脱分化需要避光处理，即过程①需要避光，幼小植株形成后需要光照处理，即过程③需要光照处理。花粉经培养形成愈伤组织不能继续在原培养基中培养，要适时更换培养基方便深入分化成再生植株。[答案]C第15页【考点练透】

1．(年河南三模)请回答以下生物技术方面问题。 (1)菌落是在固体培养基上由____________繁殖而来形态可见子细胞群体。微生物接种方法中最惯用是平板划线法和__________________法。(2)菊花组织培养大致过程以下列图所表示：

图中B、C依次表示__________________过程(填名称)，添加关键激素是______________________。该试验操作成功关键是________________，所以要对外植体、超净工作台等消毒，对培养基(或培养器具)等灭菌。第16页

(3)伴随环境污染加剧和石油危机出现，越来越多国家使用乙醇作为代替燃料，生产中玉米和麦草秸秆能够用来生产燃料乙醇，已知秸秆主要成份是纤维素，人们首先利用纤维素分解菌将纤维素分解，纤维素分解菌多分布在富含____________土壤中，从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制______________培养基并加入特殊染料，当形成菌落以后能够根据菌落周围是否产生____________来筛选纤维素分解菌，这种筛选纤维素分解菌方法是________________法。第17页

解析：(1)菌落是在固体培养基上由单个细胞繁殖而来形态可见子细胞群体。微生物接种方法中最惯用是平板划线法和稀释涂布平板法。(2)图中B、C依次表示脱分化、再分化过程，添加关键激素是细胞分裂素、生长素，该试验操作成功关键是无菌操作。(3)纤维素分解菌多分布在富含纤维素土壤，从土壤中筛选纤维素分解菌需要配制判别培养基，刚果红能够和纤维素结合形成红色复合物，纤维素分解菌将纤维素分解以后，红色复合物消失，形成透明圈。第18页答案：(1)单个细胞稀释涂布平板细胞分裂素、生长素无菌操作(或无

(2)脱分化、再分化菌技术)(3)纤维素判别透明圈刚果红染色第19页方法步骤添加物质及目标操作要求及目标取用与要求目标要求目标

1.制备鸡血细胞液取0.1g/mL柠檬酸钠100mL于500mL烧杯中，加鸡血180mL柠檬酸钠可预防凝血迟缓搅拌混匀血液与柠檬酸钠，防凝血离心或置于冰箱使血细胞与血浆分离2.提取鸡血细胞细胞核物质20mL蒸馏水使血细胞吸水涨破，释放核物质搅拌：单向、快速、5min加速血细胞破裂过滤：1～2层纱布滤取含DNA滤液3.溶解细胞核内DNA2mol/LNaCl溶液40mL

溶解DNA搅拌：单向、迟缓、1min促进DNA溶解考点二DNA粗提取与判定1．试验流程：第20页方法步骤添加物质及目标操作要求及目标取用与要求目标要求目标4.析出含DNA黏稠物加蒸馏水至黏稠物不增加为止降低NaCl溶液浓度，析出DNA搅拌：单向、轻轻混匀溶液，促进析出完整DNA分子5.滤取含DNA黏稠物——3～4层纱布过滤获取含DNA黏稠物6.将DNA黏稠物再溶解 2mol/LNaCl溶液20 mL再溶解 DNA单向搅拌使黏稠物尽可能多地溶解于溶液中7.过滤含有DNA氯化钠溶液——3～4层纱布过滤滤取含DNA滤液（续表）第21页方法步骤添加物质及目标操作要求及目标取用与要求目标要求目标8.提取含杂质较少DNA加入冷却、体积分数为95%酒精50mL让部分杂质溶于酒精，析出含杂质较少DNA搅拌：单向促进杂质溶解、DNA析出用玻璃棒卷起丝状物，用滤纸吸水取得DNA(白色乳状丝状物)9.DNA判定向2支20mL试管各加0.015mol/LNaCl溶液一支对照，一支溶解DNA(作溶媒)搅拌促进DNA溶解各加4mL二苯胺试剂作为DNA鉴定剂沸水浴5min，冷却观察颜色DNA所在试管溶液变蓝色（续表）第22页2.试验关键：(1)取材不能用哺乳动物血细胞，原因是其成熟红细胞无细胞核。(2)获取DNA时要向鸡血细胞液中加入足量蒸馏水，以便使细胞膜和核膜破裂，把核内物质释放出来。

(3)试验中有6次搅拌，除最终一次搅拌外，前5次搅拌均要朝一个方向。而且在析出DNA、DNA再溶解和提取DNA中，各步骤搅拌都要轻缓，玻璃棒不要直插烧杯底部，预防DNA分子断裂。第23页(4)两次加蒸馏水目标：①第一次加蒸馏水是为了使血细胞吸水膨胀破裂(注：植物细胞是用洗涤剂溶解细胞膜)。②第二次加蒸馏水是为了稀释NaCl溶液，析出DNA。(5)用纱布过滤3次目标：①过滤血细胞破裂液，提取细胞核物质(滤液)。②滤取0.14mol·L－1NaCl溶液中析出DNA(黏稠物)。③过滤溶有DNA2mol·L－1NaCl溶液(滤液)。(6)用NaCl溶液4次目标：①加2mol·L－1NaCl溶液，溶解提取细胞核物质。②(加蒸馏水)0.14mol·L－1NaCl溶液使DNA析出。第24页③加2mol·L－1NaCl溶液，溶解滤取DNA黏稠物。④用2mol·L－1NaCl溶液，溶解丝状物用于判定DNA。(7)DNA易吸附在玻璃容器上，所以试验中最好使用塑料烧杯、试管、容器，以降低DNA损失。3．去除滤液中杂质其它方案：(1)方案一：用嫩肉粉(蛋白酶)，它能水解蛋白质，但对DNA没有影响。(2)方案二：加热至60～75℃，大多数蛋白质不能忍受60℃～75℃高温而变性，但DNA不变性。第25页◎高考探究◎考向DNA粗提取与判定

[典例](年湖北模拟节选)请回答以下相关细胞和分子生物学技术问题：(导学号57130093) (1)DNA粗提取试验原理是：DNA在不一样浓度NaCl溶液中溶解度不一样，在____________mol/LNaCl溶液中最低；判定DNA所用试剂是______________，沸水浴加热呈_______色；试验中使用酒精目标是___________________；试验过程中两次用到蒸馏水，第一次目标是使成熟鸡血红细胞涨破释放出DNA，第二次目标是______________________。第26页

(2)PCR技术汉字全称是______________，在操作过程中需要添加引物，它化学本质是__________________。反应过程中控制不一样温度意义是不一样：90℃以上时___________，双链DNA解聚为单链；50℃左右时____________________，引物与两条单链DNA结合；72℃左右时延伸，TaqDNA聚合酶有最大活性，使DNA新链沿着______________方向延伸。第27页

[解析](1)DNA在不一样浓度NaCl溶液中溶解度不一样，在0.14mol/LNaCl溶液中最低；DNA遇二苯胺(沸水浴)会展现蓝色，所以，二苯胺能够作为判定DNA试剂；DNA不溶于酒精溶液，不过细胞中蛋白质等一些物质则能够溶于酒精溶液，利用酒精能够除去溶于酒精蛋白质等物质获取较纯净DNA；试验过程中两次用到蒸馏水，第二次加蒸馏水目标是稀释NaCl溶液浓度，使DNA析出。(2)PCR技术中文全称是多聚酶链式反应；引物本质是DNA或RNA；反应过程中控制不一样温度意义是不一样：90℃以上时DNA变性形成单链，50℃左右时，单链DNA与引物结合，叫复性，72

℃左右时延伸，DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5′－3′)方向合成互补链。第28页[答案](1)0.14二苯胺蓝除去溶于酒精蛋白质稀释NaCl溶液(2)多聚酶链式反应DNA或RNA变性复性5′端向3′端第29页【考点练透】

2．自1973年博耶和科恩成功地使外源基因在原核细胞中表示开始，基因工程正式问世了，人们对DNA关注也越来越多。分析并回答以下问题：(导学号57130094)

(1)从生物组织中提取DNA时，若要获取含有DNA滤液，需破碎细胞；若为鸡成熟红细胞，能够加入一定量蒸馏水，原因是细胞______________而涨破；若为植物细胞能够加入一定量洗涤剂。第30页

(2)利用DNA和RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面差异，能够将它们分离。如DNA溶解度在NaCl溶液浓度为________时最小，能够使DNA与其它杂质初步分离。 (3)为了纯化提取DNA，能够用95%酒精去除滤液中杂质。其原理是DNA不溶于酒精溶液，但细胞中一些物质却能够溶于酒精溶液，能够推测溶于酒精中物质可能有____________________。(4)普通DNA判定试剂为________，沸水浴后溶液中有DNA则颜色为________。第31页

解析：(1)常采取吸水膨胀方法使动物细胞涨破。(2)当NaCl溶液浓度为0.14mol/L时，DNA溶解度最低。(3)DNA不溶于酒精，而蛋白质、脂质等杂质溶于酒精。(4)DNA在沸水浴条件下与二苯胺反应呈蓝色。

答案：(1)吸水膨胀 (2)0.14mol/L (3)蛋白质、脂质(4)二苯胺蓝色第32页考点三蛋白质提取和分离(以血红蛋白提取和分离为例)、PCR

反应过程及结果

1．蛋白质提取和分离： (1)样品处理： ①红细胞洗涤：目标是去除杂蛋白，分离时采取低速短时间离心，直至上清液不再展现黄色，表明红细胞已洗涤洁净。 ②血红蛋白释放：在蒸馏水和甲苯(溶解细胞膜)作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白。第33页(2)粗分离：

①分离血红蛋白溶液：将搅拌好混合溶液离心后，将试管中液体用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层红色透明液体。

②透析：取1mL血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛有300mL物质量浓度为20mmol/L磷酸缓冲液中，透析12h，去除样品中相对分子质量较小杂质。 (3)纯化：利用凝胶色谱柱可对血红蛋白进行纯化。凝胶色谱法分离蛋白质原理，见下表：第34页分离 种类相对分子质量直径大小运动方式运动速度运动旅程洗脱次序大分子 物质大大于凝胶颗粒空隙垂直向下 运动较快较短先小分子 物质小小于凝胶颗粒空隙无规则扩散运动较慢较长后(4)纯度判定：使用最多是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(可测定蛋白质相对分子质量)。第35页项目DNA粗提取与判定血红蛋白提取与分离材料选择鸡血细胞等含DNA丰富生物组织哺乳动物成熟红细胞破碎细胞方式①动物细胞：吸水涨破②植物细胞：洗涤剂、食盐搅拌研磨等加蒸馏水和甲苯搅拌去除杂质方式①用不一样浓度NaCl溶液处理②用酒精处理③用蛋白酶处理等①透析处理②纯化处理判定方式二苯胺，沸水浴SDS-聚丙烯酰胺凝胶电 泳法测定相对分子质量DNA与血红蛋白提取和分离过程比较第36页2.PCR反应过程及结果：(1)过程：①变性：当温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链。②复性：温度下降到50℃左右，两种引物经过碱基互补配对与两条单链DNA结合。

③延伸：温度上升到72℃左右，溶液中四种脱氧核苷酸(A，T，G，C)在DNA聚合酶作用下，依据碱基互补配对标准合成新DNA链。(2)结果：①PCR一般要经历三十屡次循环，每次循环都包含变性、复性、延伸三步。②两引物之间固定长度DNA序列呈指数扩增。第37页项目细胞内DNA复制PCR技术不同点解旋在解旋酶作用下边解旋边复制80℃～100℃高温解旋，双链完全分开酶DNA解旋酶、DNA聚合酶TaqDNA聚合酶引物RNADNA或RNA温度体内温和条件高温相同点①需提供DNA复制模板②四种脱氧核苷酸做原料③子链延伸方向都是从5′端到3′端(3)细胞内DNA复制与PCR技术比较：第38页◎高考探究◎考向蛋白质提取和分离、PCR反应过程及结果

[典例](年江西一模)下面是某研究小组开展“猪血浆某白蛋白提取及分子量测定”研究，请帮助完成相关问题： 材料仪器：新鲜猪血、低速冷冻离心机、透析袋、电泳仪等。 化学试剂：pH为7.4缓冲液、柠檬酸钠、奈氏试剂(与

盐水等。第39页试验步骤：(1)样品获取：向新鲜猪血中加入______________，静置一段时间后取上层__________。(2)盐析法粗提蛋白质：

①向血浆中加入一定体积饱和(NH4)2SO4

溶液，使(NH4)2SO4

浓度到达50%，充分混合后静置、离心，取沉淀物。

②向沉淀物中加入适量生理盐水使之溶解，再向其中加入一定体积饱和(NH4)2SO4

溶液，使(NH4)2SO4

浓度到达33%，充分混合后静置、离心，取沉淀物。第40页剂检测透析液中NH4量。利用缓冲液做透析液目标是

③重复步骤①、②2～3次，最终用生理盐水将沉淀溶解即得粗提品。盐析粗提“血浆某白蛋白”主要原理是____________________________________________，重复步骤①、②主要目标是____________________________。

(3)透析除盐：将粗提品装入透析袋，以pH为7.4缓冲液做透析液，每隔4h更换一次透析液，每次更换前利用奈氏试＋______________________________。检测中，若观察到透析液________________时，即可终止透析。(4)凝胶色谱法分离：透析后样品经凝胶柱洗脱，取得纯净血浆某白蛋白样品。第41页

(5)分子量测定：化学物质SDS能使蛋白质变性，解聚成单条肽链。在聚丙烯酰胺凝胶电泳中加入一定量SDS，电泳迁移率完全取决于肽链分子大小。上图为本试验中用SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳判定血浆某白蛋白结果。依据电泳结果，某同学得出“提取血浆某白蛋白有两条肽链”结论，这种说法可靠吗？理由是_________________________________________________________________________________________。第42页

[解析](1)样品获取：向新鲜猪血中加入(适量)柠檬酸钠以预防血液凝固，静置一段时间后取上层血浆。(2)盐析法粗提蛋白质：分析试验步骤可知，盐析粗提“血浆某白蛋白”主要原理是该血浆白蛋白在50%和33%(NH4)2SO4

溶液中溶解度低，重复步骤①、②主要目标是除去更多杂蛋白。(3)利用缓冲液做透析液目标是维持pH相对稳定，预防pH改变对蛋白质结结构成破坏。检测中，若观察到透析液不出现黄色或红棕色沉淀时，说明小分子血浆蛋白已去除洁净，即可终止透析。(5)这种说法不可靠，由图可知，只能得出提取血浆某白蛋白含有两种大小不一样肽链，而不一定是只有两条。第43页[答案](1)(适量)柠檬酸钠血浆(2)该血浆白蛋白在50%和33%(NH4)2SO4溶液中溶解度低除去更多杂蛋白(3)预防pH改变对蛋白质结结构成破坏不出现黄色或红棕色沉淀 (5)不可靠，只能得出提取血浆某白蛋白含有两种大小不同肽链，不一定是两条第44页【考点练透】3．RT-PCR是将RNA逆转录(RT)和cDNA聚合酶链式扩增反应相结合技术，详细过程以下列图所表示：第45页(1)过程Ⅰ需要加入缓冲液、原料、___________________、____________________和引物A等。

(2)过程Ⅱ首先要将反应体系温度升高到95℃，其目标是___________________________，该反应体系中所用TaqDNA聚合酶最少应能耐受________℃。(3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循环扩增，理论上至少需要________个引物B。

(4)利用RT-PCR技术获取目标基因________(填“能”或“不能”)在物种之间交流；该技术还可用于对一些微量RNA病毒检测，可提升检测灵敏度，原因是______________________________________________________________________。第46页

(5)RT-PCR过程中主要借助对________控制，影响酶活性，从而使得化学反应有序高效地进行。答案：(1)RNA提取物逆转录酶(2)让逆转录酶变性失活、使mRNA-cDNA杂合双链解开(答95对一点即可) (3)2n－1(4)能增加了待测RNA逆转录产生DNA数量(或浓度)，便于检测 (5)温度第47页提取方法水蒸气蒸馏法压榨法有机溶剂萃取法试验原理利用水蒸气将挥发性较强植物芳香油携带出来 经过机械加压，压榨出果皮中芳香油使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂取得芳香油方法步骤①水蒸气蒸馏②分离油层③除水过滤①石灰水浸 泡、漂洗②压榨、过滤、 静置③再次过滤①粉碎、干燥②萃取、过滤③浓缩考点四植物有效成份提取1．植物有效成份提取三种方法比较第48页提取方法水蒸气蒸馏法压榨法有机溶剂萃取法适用范围适适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强芳香油适适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料提取适用范围广，要求原料颗粒要尽可能细小，能充分浸泡在有机溶剂中优点简单易行，便于分离生产成本低，易保持原料原有结构和功效出油率高，易分离局限 性水中蒸馏会造成原料焦糊和有效成份水解等问题分离较为困难，出油率相对较低使用有机溶剂处理不妥会影响芳香油质量(续表)第49页

(1)水蒸气蒸馏法要适当延长蒸馏时间，温度不能太高。

(2)压榨法必须在常温条件下进行，不然会影响产物产量和质量；压榨时原料必须要浸透，这么压榨时不会滑脱，出油率高，不堵塞筛眼；使用石灰水充分浸泡原料目标是破坏细胞结构，分解果胶，预防橘皮压榨时滑脱，提升出油率。第50页◎高考探究◎考向植物有效成份提取方法和过程

[典例](年新课标卷Ⅱ)回答与胡萝卜素相关问题： (1)胡萝卜含有胡萝卜素中，最主要是____________(填“α-胡萝卜素”“β-胡萝卜素”或“γ-胡萝卜素”)，该胡萝卜素在人体内能够转变成两分子___________，后者缺乏会引发人在弱光下视物不清病症，该疾病称为__________，胡萝卜素是____________(填“挥发性”或“非挥发性”)物质。 (2)工业生产上，用养殖盐藻作为原料提取胡萝卜素时，__________(填“需要”或“不需要”)将鲜活盐藻干燥。第51页

(3)现有乙醇和乙酸乙酯两种溶剂，应选用其中______________作为胡萝卜素萃取剂，不选取另外一个理由是_______________________________________。维生素A夜盲症非挥发性[答案](1)β-胡萝卜素(2)需要(3)乙酸乙酯萃取胡萝卜素有机溶剂应不与水混溶，而乙醇为水溶性有机溶剂第52页【考点练透】

4．(年长春质检)玫瑰在人们生活中含有各种用途。某同学进行玫瑰组织培养和玫瑰精油提取试验，请回答：(导学号57130095)(1)在进行玫瑰组织培养时，能够选取生长旺盛嫩枝作________，并要进行________处理。

(2)玫瑰组织培养接种操作前，用体积分数为70%_____将工作台擦拭一遍。接种后，还要经过__________________、______________和栽培才能得到开花玫瑰。第53页

(3)某同学用水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油，简便易行是________(填“水中”“水上”或“水气”)蒸馏方法。蒸馏过程中需要监控蒸汽温度和时间，原因是______________________________________________。

(4)搜集乳浊液水油分层，需向其中加入________。要除去分液得到油层中水分，需向其中加入无水________。第54页

解析：(1)植物组织培养时，应选取生长旺盛嫩枝作外植体，并对外植体进行消毒处理。(2)在接种操作前要用体积分数为70%酒精擦拭工作台，接种完成后还要经过培养、移栽和栽培等过程。(3)用水蒸气蒸馏法提取玫瑰精油时，最简便易行是水中蒸馏方法，在蒸馏过程中，假如蒸馏温度太高、时间太短，产品品质就较差，所以要控制好蒸馏温度和时间。(4)向搜集乳浊液中加入NaCl，能够增加水层密度，利于油水分层，向分离出油层中加入无水Na2SO4能够除去油层中水分。答案：(1)外植体消毒(2)酒精培养移栽(3)水中假如温度太高，时间太短，产品质量就比较差(4)NaClNa2SO4第55页外植体――→愈伤组织――→长出丛芽――→生根――→1．下面是植物组织培养过程示意图，请回答相关问题：①②③④移栽成活(1)外植体若是菊花茎段组织，则在配制MS固体培养基时，________(填“必须”或“无须”)添加植物激素。

(2)外植体若是月季花药，则图中①过程________(填“需要”或“不需要”)光照，而经②③④过程培养出植物一般称为________植株。第56页

(3)外植体若是菊花根尖组织，则在正常环境下培养成新菊花植株叶片颜色是________，这个过程表达了植物细胞含有________。(4)植物激素中生长素和细胞分裂素是开启细胞分裂和分化关键性激素，在植物组织培养过程中：①若先使用细胞分裂素，后使用生长素，试验结果是细胞____________________________。

②当同时使用这两种激素时，生长素用量与细胞分裂素用量比值________(填“高”“低”或“适中”)时，促进愈伤组织形成。第57页

解析：(1)因为菊花茎段组织培养比较轻易，所以无须添加植物激素。(2)月季花药培养早期不需要光照，幼小植株形成后才需要光照。花药离体培养得到植株为单倍体植株，也称花粉植株。(3)植物组织培养取得植株是正常植株，不论外植体取自植物何种组织器官，因为这些细胞均含有全能性，所以利用菊花根尖组织在正常环境下培养成新菊花植株叶片颜色是绿色。(4)植物激素中生长素和细胞分裂素是开启细胞分裂和分化关键性激素，在植物组织培养过程中，若先使用细胞分裂素，后使用生长素，则细胞既分裂也分化。当同时使用这两种激素时，生长素用量与细胞分裂素用量比值适中时，促进愈伤组织形成。第58页答案：(1)无须(2)不需要单倍体(花粉)(3)绿色全能性(4)①既分裂也分化②适中第59页2．某生物兴趣小组开展DNA粗提取相关探究活动，具体步骤以下：(导学号57130096)

材料处理：称取新鲜花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g。剪碎后分成两组，一组置于20℃，另一组置于－20℃条件下保留24h。 DNA粗提取：第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。

第二步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95%冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第60页保留温度/℃材料花菜辣椒蒜黄20＋＋＋＋＋＋－20＋＋＋＋＋＋＋＋＋第三步：取6支试管，分别加入等量2mol/LNaCl溶液溶解上述絮状物。

DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液颜色深浅，结果如下表。注：“＋”越多表示蓝色越深。第61页分析上述试验过程，回答以下问题：

(1)该探究性试验课题名称是__________________________________________________________________________。 (2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了降低___________。 (3)依据试验结果，得出结论并分析。①结论1：与20℃相比，相同试验材料在－20℃条件下保存，DNA提取量较多。

结论2：______________________________________。 ②针对结论1，请提出合理解释：__________________________________________________________________________。第62页

(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了深入提升DNA纯度，依据氯仿特征，在DNA粗提取第三步基础上继续操作步骤是：______________________________________________，然后用体积分数为95%冷酒精溶液使DNA析出。第63页

解析：(1)从表格能够看出，该试验有两个自变量：材料和保留温度。所以该探究性试验课题名称为探究不一样材料和不一样保留温度对DNA提取量影响。低温抑制了相关酶活性，DNA降解速度慢，提取DNA较多。(2)第二步中用玻璃棒搅拌目标是获取DNA絮状物，所以若速度快，易造成DNA断裂。(3)本试验结论可从两个方面来考虑：①相同材料在不一样温度下结论；②不一样材料在相同温度下结论。(4)氯仿能使蛋白质变性，而对DNA影响极小，所以可将第三步取得溶液与氯仿混合，又因为氯仿密度大于水，所以蛋白质沉淀位于溶液下部，DNA位于上清液中。第64页答案：(1)探究不一样材料和不一样保留温度对DNA提取量影响(2)DNA断裂(3)①等质量不一样试验材料，在相同保留温度下，从蒜黄提取DNA量最多②低温抑制了相关酶活性，DNA降解速度慢(4)将第三步取得溶液与等量