生物安全省公开课金奖全国赛课一等奖微课获奖课件

临床生物安全陆家海教授公共卫生学院2016.10lujiahai@qq:2318663482微信：yugongcr1/105年11月19日,《健康报》在头版报道,北京市某医院某临床护士在捆扎病房污物口袋时,左手食指被1支用于艾滋病病人输液针刺破。2/105

早在19世纪中期，医院流行病学之父塞麦尔韦斯就发觉一位参加尸解试验同学在尸解时刺破了手，所感染病菌与当初引发产褥热病菌相同。

发生于美国密执安州立大学布氏杆菌病试验室一起布氏杆菌泄露事件，共感染了45人，死亡1人。医务人员HBV感染率比普通人高10倍，全世界3500万医务人员，每年300万人发生职业暴露，7万人感染HBV

1967年德国马尔堡；马尔堡病毒（31人感染，1/4死亡）1976年刚果埃博拉河，埃博拉病毒（全世界1100感染，793人死亡）

生物安全事件3/105

以黑框标出逝世作者有：MbaluFonnie，AlexMoigboi，AliceKovoma，MohamedFullah，SheikHumarrKhan和SidikiSaffa。让人震惊和难过是，他们名字后面有个共同点，都注明了个“3”，即隶属于塞拉里昂凯内马政府医院（KenemaGovernmentHospital,Kenema,SierraLeone－KGH），他们是工作在抗埃博拉第一线医护人员和科技人员。一篇Ebola论文之沉重：六名作者逝世4/105

EbolaLatestavailablesituationsummary,18September5/105

GenomicsurveillanceelucidatesEbolavirusoriginandtransmissionduringtheoutbreakA：圆圈大小代表发病人数，颜色代表暴发年份；B：此次暴发发病数时间推移改变，两个最多国家是利比里亚和塞拉利昂；C：塞拉利昂行政区划病例数，颜色越深越多；D：78个患者中分离出来病毒基因组；E：分离出来判定基因组（红色）都在正常改变范围内（蓝色）；6/105

A：病毒基因组（无根）进化树，长度代表核苷酸不一样多少；B：暴发病毒与1976年暴发至暴发（根到枝）拟合比很好（蓝点离线最近）；C：病毒基因组时间上（有根）进化树7/105

A：软件分析此次暴发病毒与前次暴发病毒间亲缘关系；B：推定传输病毒株序列改变和亲缘关系（SL=塞拉利昂，GN=几内亚，DRC=民主刚果共和国）8/105

生物安全事件A：最上面一长条代表病毒基因组，突变，一列代表一个患者，最上面一行表示基因突变类型（绿色：同义[氨基酸无改变]，粉红色：非同义[氨基酸有改变]，基因间：灰色）；B：每日确诊埃博拉出血热患者；单独列出来突变类型（2和3）；C：78个患者体内都有单核苷酸多态性（SNP）D&E：12个患者都带有iSNV这个突变；F：疫情和历次暴发病毒株基因组替换率；G：不一样时间尺度观察到非同义突变（粉）和同义突变（绿）改变；H：一段时间内采集病毒株遗传变异。50个突变（短横线）和29个新病毒谱系（长破折号）观察。9/105outline总论一临床试验室生物安全管理办法二血液及代替品生物安全三10/105一、总论凡是为预防、诊疗、治疗任何人类疾病或损伤、或者评价人类健康而对人体物质进行生物、微生物、血清化学、血液、生物物理、细胞或者其它类型检验部门，统称为临床试验室。11/105年北京再度发觉SARS病例，WHO驻中国代表处讲话人沃雷·罗迪亚在谈及这次被定性为“重大责任事故”SARS病毒试验室感染时说，人为错误有好几个，比如，试验室本身条件、试验室里粗心、试验室里管理不善等等。不过，不论怎么样，不论在哪里，试验室总会发生一些错误。

12/105临床试验室天天要处理来自临床标本，如血液、穿刺液、分泌物等，对这些“未知疾病标本”无法知其危险程度，所以，每个临床试验室天天都面临生物安全隐患。13/105临床试验室危害源细菌病毒真菌寄生虫易燃性、腐蚀性、有毒性、强酸性化学品等电器设备、辐射、噪声等14/105细菌（bacteria）结核杆菌（职业：3-9倍感染率）Mycobacteriumtuberculosis.Rod-shapedBacterium

白喉杆菌Corynebacteriumdiphtheriae.Rod,clubed-shapedBacterium(causesdiphtheria)15/105病毒（viruses）狂犬病病毒

RabiesDNA肿瘤病毒

DNAtumorviruses脊髓灰质炎病毒polio16/105Harrington和Shannon在1976年调查中发觉，结核分枝杆菌、乙型肝炎病毒与志贺菌已成为英国临床试验室工作人员最为常见职业性感染原因。我国某传染病医院30年结核病发病人数占全院职员10.8%。其中：医师占31.48%、护士53.70%、医技人员占11.1%、机关后勤人员占3.70%.17/105临床试验室生物污染原因和种类对空气污染对水污染对物体表面污染试验室排出及扩散出空气是主要原因之一医院污水操作不妥或感染性物质溢出造成地面、仪器等污染18/105试验室工作人员在试验过程中受到试验室生物污染而发生感染。试验室感染19/1053起严重试验室SARS病毒感染事件追述

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２００３年９月９日，新加坡一名患者被确诊感染了非典病毒。这名２７岁新加坡华人男子是新加坡国立大学专门研究西尼罗病毒微生物试验室一名硕士。由１１名教授组成国际调查小组认为，不恰当试验程序、以及西尼罗病毒样本与SARS冠状病毒在试验室里交叉感染，可能是这名患者感染非典病毒原因。新加坡试验室SARS感染事件21/105中国大陆试验室感染事件

年4月安徽、北京先后发觉新SARS病例，经证实分别来自于在中国疾病预防控制所试验室受到SARS感染两名工作人员中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所腹泻病毒室跨专业从事非典病毒研究，采取未经论证和效果验证非典病毒灭活方法，在不符合防护要求普通试验室内操作非典感染材料，发觉人员健康异常情况未及时上报。

22/10523/105中国台湾地域试验室感染事件

年12月一名台湾SARS研究人员在试验室感染SARS病毒。台湾这名感染非典詹姓研究人员工作台湾“国防预防医学研究所”属台湾军方研究单位，位于台北县三峡，设置在山洞中，以两层阻绝设施与外界隔离。24/105

这所试验室拥有全台最顶尖试验设备，试验室等级列为P4，是台湾唯一“第四级生物安全试验室”，超出“卫生署疾病管制局”及“台大医院”等P3等级试验室，被誉为台湾生化资源重镇。在亚洲仅有日本拥有同等级生物试验室，当前，全球有8个P4试验室在运行，均在发达国家和地域。25/105直接原因是因为研究人员詹姓中校在试验室内未能恪守规章，因操作疏忽而感染SARS。另外，依据世界卫生组织调查，台湾SARS试验室一个主要问题是人手不足，科研人员经常单独工作，提升了发生意外和错误被忽略风险。“詹中校条款”制订：试验室双人操作，研究人员不可兼做工友和清洁职员等。

26/105试验室感染路径空气传输：接种环、吸管、注射器使用时经口传输直接接种：针刺、划伤等黏膜接触：如HIV能经过眼结膜进入人体节肢动物媒介27/105临床试验室安全管理硬件管理试验室设备个人防护设备一级防护二级防护软件管理：包含组织机构、管理制度、操作规程、人员素质等。28/105管理责任试验室管理层对全部员工和试验室来访者安全负责，试验室责任人应制订要求和程序，以确保试验室符合国家相关安全要求，并定时检验、维护、更新。29/105试验室标准操作程序（SOP）依据试验对象、生物危害程度评定、研究内容和设备设施等特点，对包括任何危险以及怎样在风险最小情况下开展工作详细作业指导书。30/105试验室人员培训制度持证上岗新工作人员经过培训经过考评后，还须与有资格工作人员一同工作1个月，才能取得上岗证。全部些人员每年最少要接收一次新培训建立并保留人员培训和考评统计档案31/105试验室设施设备监测、检测和维护制度尤其关注高效过滤器、高压灭菌器检验、维护和更新生物安全柜检测高压灭菌器定时检测灭菌效果32/105安全统计职业性疾病、伤害和不利事件统计危害评定统计危险标识危险废弃物统计事件、伤害、事故和职业性疾病汇报33/105试验室分区清洁区(工作区)：包含办公室、休息室、培养基室等半污染区（防护区）：包含缓冲间、更衣室和卫生通道等污染区（关键工作间）：包含样本搜集区、处理区、培养区和废弃物处理区等34/105试验室出口和通道必须保持通畅无阻，不准堆放物品、垃圾、装置或设备。出口通路35/105临床试验室工作人员安全普通要求食物不能存放在血液或其它有潜在传染性材料存放处，应禁止在试验室工作区内吸烟工作区内应禁止化装（手霜除外）和处理隐形眼镜不应佩戴戒指，耳环，腕表和手镯等36/105利器，包含用过针头不应折断、重新戴套或被动戴套。应勉励全部试验室工作人员接收免疫以预防其可能被接触生物体感染。丢弃利器应马上放入耐扎容器中全部离心机应该有封闭盖子，旋转时不能掀开37/105禁止使用口吸吸液全部样本和废弃物应假定含有活性病原体，应以安全方式处理。全部进行涡流搅拌样本应置于有盖容器内标本应以确保承运人员、公众和接收试验室安全方式运输，并恪遵法规要求（危险物品运输法规）38/105二、临床试验室生物安全管理办法临床试验室理化安全准则临床试验室生物安全防护临床试验室废物处理通则39/105年09月25日,西安交大电气绝缘教学楼内试验室突然发生爆炸并起火，正在试验室弟兄俩不幸被烧伤，其中一人为西安交大在校博士生。

40/105年3月13日晚上，南京东南大学四牌楼校区动力楼发生特大火灾，过火面积达1000多平方米，有30多个房间被烧毁，包含约10个试验室，多年收藏学术资料也遭到毁坏。41/105电气设备安全准则

连线：仪器连线必须使用带有接地三根线护套线，不可使用普通塑料绞线。禁止私拉乱扯。接地：仪器应有良好接地，提升仪器稳定性及安全系数。检验：如遇线路老化或损坏应及时地更换。触电：断电或绝缘脱离抢救42/105防火隐患预计和研究易燃易爆物火源隐患（电、火、气、试剂）43/1051.加热

进行蒸馏试验和消化样品时应使用加热套和封闭式电炉，不应使用明火加热。

安全使用酒精灯。2.明火

在使用易燃气体和易燃试剂试验室内不得使用明火。44/105灭火学会使用灭火器（一拔、二握、三瞄、四扫）。易燃固体、易燃气体、易燃液体和带电物体着火时，可用干粉灭火器灭火。导线或电器着火时，应先断电，再用干粉灭火器灭火。切不可用泡沫灭火器，此灭火器导电。衣服着火时，应尽快地脱掉衣服，并用水灭火。或就地滚动，切忌外跑。45/105化学危险物品使用安全准则全部化学危险品容器都应有清楚标识，试验室管理人员有责任向工作人员介绍化学危险物品，应有材料安全数据表显示每一个化学危险物品特征。46/105清华才女朱令离奇铊中毒复旦大学中毒硕士不治身亡经典事故47/105年9月9日，据香港明报报道，香港科技大学一间试验室9日发生有毒化学品泄漏事件，一名职员打开试验室内储存柜时，发觉柜内一樽一公升已稀释丙烯醛出现液体泄漏及冒出浓烈刺鼻气味，职员吸入气体不适要送院治理。48/105气体直立放置时要稳妥；气瓶要远离热源；防止曝晒和强烈振动；普通试验室内存放气瓶量不得超出两瓶。氢气瓶和氧气瓶不能同存一处。1.珠海市斗门遵义医学院第五从属医院120救护车司机错将胃管接入氧气瓶老人七窍流血而死。2.错将氮气当氧气，放在手术室49/105年3月12日，德国汉堡BernhardNocht热带医学研究所一名女科学家，因被含有埃博拉病毒注射器刺到，被怀疑已经感染埃博拉病毒，即使被注射器刺到，但因为进入体内病毒量较小，所以发病几率并不大。但当前并无被认可埃博拉病毒治疗方案，而它致死率则高达90%。50/105临床试验室生物安全防护试验室生物安全防护（biosafetycontainmentforlaboratories）是指试验室工作人员所处理试验对象含有致病微生物及其毒素时，经过在试验室设计建造、个体防护装置、严格恪守标准化操作程序和规程确保试验室工作人员不受试验对象侵染，确保周围环境不受其污染。51/105病原微生物危险度分级

WHO&通用要求危险度1~4级(渐高)

条例危险度一~四类（渐低）危险度1级无或极低个体和群体危险危险度2级个体危险中等，群体危险低危险度3级个体危险高，群体危险低危险度4级个体和群体危险均高52/10553/10554/105临床检验相关生物危险等级分布55/105试验室生物危害评定评定应从三个方面给予考量微生物致病性和流行性试验室环境及试验室操作特殊性试验室工作人员免疫状态56/105在对相对信息了解较少时进行危险度评定时，应慎重地采取一些较为保守标本处理方法。在临床试验室，标本取自患者，处理这类标本时最低需要二级生物安全水平。57/105试验室生物安全防护水平依据使用一级和二级防护屏障不一样，试验室生物安全防护水平（biosafetylevel,BSL）分为四级。按防护水平由低到高排列即：一级生物安全水平（BSL-1）二级生物安全水平（BSL-2）三级生物安全水平（BSL-3）四级生物安全水平（BSL-4）58/105一级生物安全防护（BSL-1）试验室

如用于教学普通微生物试验室等，适合用于非常熟悉致病因子，在开放试验台上开展工作。二级生物安全防护（BSL-2）试验室

试验人员接收过致病因子处理培训，进行试验时，限制进入。一些可能产生传染性气溶胶过程，应在生物安全柜中或其它物理安全设备中进行。

59/105用于主要经过呼吸路径使人感染上严重甚至是可造成生命危害致病微生物及其毒素。三级生物安全防护（BSL-3）试验室60/105年9月2日，中国合格评定国家认可委员会（CNAS）对中山大学生物安全三级试验室下达了认可决定通知书，并颁发试验室认可证书，该试验室正式成为卫生系统在华南地域获同意第一家生物安全三级试验室。中山大学生物安全三级试验室于年6月开始筹建，挂靠在中山医学院，位于北校区微生物楼八楼。61/105适合用于对人体含有高度危险性、经过气溶胶路径传输或传输路径不明、当前尚无有效疫苗或治疗方法致病微生物及其毒素。当前世界上最先进高危病毒试验室———让．梅里厄P4试验室。四级生物安全防护（BSL-4）试验室62/105你知道吗？科研人员进入四级生物安全防护（BSL-4）试验室，必须换上特制正压防护服。进入到试验室关键区，先后得穿4层防护服、戴两层口罩、眼罩、防护鞋、手套等。有时手套要戴6层。如室内病原微生物可经过空气传输，还得戴上面具。光穿防护设施最少得花30分钟。有些人把P4试验室叫做“魔鬼试验室”，特殊空调系统，空气过滤程度到达99.999%，试验室采取定向负压系统，其关键区压强到达负40帕，这么试验室空气流动，只能是经过高效过滤器从外面进来，而确保试验室内空气不向外流动。63/1051.澳大利亚：（1）Geelong澳大利亚动物健康试验室（VIC）。（2）Coopers平原昆士兰卫生署（QLD）病毒学试验室。（3）国家高安全性试验室，维多利亚传染病参考试验室在北墨尔本（VIC）主持下运作。2.法国LABORATOIREP4让·梅里厄在里昂。德国(1)菲利普斯马尔堡大学病毒学研究所，(2)theBernhardNocht热带医学研究所在汉堡。意大利（1）拉扎罗斯帕兰扎尼医院国家传染病研究所。（2）PoloUniversitario-(Milano).美国保持最少8个生物安全4级设施，当前正在规划最少7个：国际（BSL-4）试验室64/105防护装备壁挂式洗眼器护目镜防护服65/105年7月23日，中国科学院与武汉市人民政府签署《共建生物安全四级（

P4）试验室协议书》，这意味着中国内地首座

P4试验室将落户武汉。66/105临床试验室基本安全操作规程临床试验室标本处理全部操作戴手套采血人员受过培训血清分离时注意眼和黏膜保护规范操作技术以降低气溶胶产生使用消毒剂处理使用后移液管和溢出标本67/105用于显微镜观察盖玻片和涂片应用镊子夹取，丢弃前应去除污染和高压灭菌。移液管和移液辅助器使用禁止口吸，污染移液管应完全浸泡在盛有消毒液容器中。68/105锐利物品禁止直接用手处理破碎玻璃器具离心机全部能够产生气溶胶进行播散生物制品或标本，都应使用密封离心管。69/105生物安全柜保持负压每隔一段时间应对其运行性能进行验证可降低气溶胶暴露

70/105相关试验室意外处理规程泄露事故：马上清洗发生泄漏区域，上报吸净漏出液体清洗发生泄漏区域尽可能使用漂白剂、酒精或苯酚对工作台进行消毒71/105血液或其它体液发生泄漏或工作结束后，均应使用适当化学杀菌剂对试验室工作区进行表面消毒。无法彻底消毒设备必须贴上生物危害标签。个人防护服装应定时更换以保持清洁，遇被危险物品严重污染时，则应马上更换。72/105LyndaAnold1992年5月以外科护理学士毕业，当年9月一天，在为急诊病人用套管针进行静脉输液时，拔出针芯时意外刺伤了手指，93年4月确诊感染了HIV，她当年只有23岁。由她提倡在全美国掀起了自觉使用安全锐器运动已经有十年。KarenDaley（公共卫生硕士，注册护士）以她自己1998年在丢弃使用过针头时刺伤了手指不幸感染上HIV和丙肝遭遇，对提出设置预防针尖扎伤法案做了一个非常生动陈说，所以加紧了该法案立法进程。73/105锐器所致事故性划伤或擦伤

①用肥皂液和流动水清洗污染皮肤；如有伤口，应该在伤口旁端轻轻挤压，尽可能挤出损伤处血液，再用肥皂液和流动水进行冲洗，禁止进行伤口局部挤压。②受伤部位伤口冲洗后，应该用消毒液，如75%酒精或0.5%碘伏进行消毒，并包扎伤口。③随即向相关责任人汇报74/105美国调查：医务人员中每年最少发生60万次钝器伤埃及：医务人员中69.4%一生中最少发生1次针刺伤，35.6%医务人员最近3个月曾发生过针刺伤；台湾：医务人员每年高达87.3%发生针刺伤和其它锐伤；医生中42.5%锐器伤是侵入性操作；护士中39.1%锐器伤是处理针头；清洁工中95.4%是清理医疗垃圾污染针头刺伤。锐器所致事故性划伤或擦伤75/105传染性物质溅入黏膜①标本或传染性物质溅入黏膜或间接接触，应马上用专用装置清洗，再用滴眼液或漱口液清洗。②向相关责任人汇报。76/105微生物试验室相关安全准则微生物试验室相关标志在试验室门口应贴上生物危险标志，并显示以下信息:

相关致病因子名称、生物安全级别、免疫接种要求、研究人员姓名电话、试验室中佩戴个人设施、出入试验室特殊要求与程序77/105微生物菌种分类及保留分类：依其危险程度大小分为四类。

保留：详细历史和试验资料；对菌种采取妥善可靠保留；建立严密安全保管制度。78/105临床试验室废物处理废物（waste）：

使用者不再使用一切物品称为废物。化学废物安全处理感染性废物安全处理锐利物安全处理无害废物处理79/105化学废物安全处理1.废物分离:

有害化学废物不能与普通废物、无害化学废物、放射性或感染性废物相混合。有害化学废物在产生后应分别搜集、运输、贮存和处理。2.工程控制:

通风办法、相对封闭及隔离系统、安全办法、防火办法和安全通道。

3.操作控制:

试验室应有完备处理技术，以确保仪器、工作面和防护设备污染在最低水平80/1054.化学废物处理选择对无法确定特征废物，不能做任何处理去除废物前尽可能降低其有害程度严格禁止有害废料与普通废料或固体废料混合处理81/105感染性废物安全处理感染性废物指能传输感染性疾病废物操作感染性或任何有潜在危害废物时，必须穿戴手套和防护服。对有各种成份混和医学废料，应按危害等级较高者处理。处理含有锐利物品感染性废料时应使用防刺破手套。82/105感染性废料最惯用处置方法是灭菌和焚烧。其储存地应有“生物危险”标志和进入管理限制。试验室应有针对传染物泄露等处理计划。83/105生物废物容器废针头容器生物危害样品转移箱84/105锐利物安全处理锐利物指全部能穿透皮肤物品。需与其它废物分别存放。

针处理尽可能降低对针具操作，放入硬质、防刺破容器内。85/105美国于1987年防护办法中提出禁止回套针帽。应采取先进预防针刺伤护理用具，使用带有保护设计针头，如自动套帽静脉导管、安全型注射器（自动回缩针头）、使用锐器搜集箱等，有资料显示，锐器搜集箱使用使针刺伤发生率降低50%。86/105血液安全是指血液以及血液相关生物制品在临床应用中安全问题，因为血液以及血液相关生物制品不但能够治病救人，也能够作为许多传染病载体，如艾滋病毒、乙肝病毒、丙肝病毒等引发传染病流行，能够给个人、家庭和社会带来极大伤害，所以血液以及血液相关生物制品安全备受关注。三、血液生物安全87/1051983年3月美国疾病控制中心提出要把高危人群（吸毒者、同性恋、性工作者等）排除出献血员队伍，1983年4月《柳叶刀》杂志报道首例经输血传输艾滋病事例。在80年代及90年代初，仍有许多发达国家及发展中国家出现经输血传输艾滋病现象。全世界经采供血传输艾滋病病例，占总报道病例3％～5％。88/105

据中国台湾网报道，台湾高雄惊传艾滋病感染者献血案例，一名30岁男子献血时被验出艾滋病毒，因为他9年来已献血10屡次，台“疾管局”紧急追查发觉，已经有3名民众在今年接收了这名男子献血，其中1人在手术后死亡，另外两名确定感染艾滋病毒。

89/105英国媒体报道了一则令人震惊消息：在上世纪70年代初到80年代中期，英国约有4500名血友病患者因使用血液制品感染了致命艾滋病毒（HIV）或丙肝病毒，当前已经有超出人死亡，还有一些人处于重病晚期。而造成这一重大医疗事故原因可能是多届政府都没有理会教授提出关于从美国进口血液制品受污染警告，依然允许医院使用这些制品。90/105

安全血液是指不含有任何病毒、寄生虫、药品、酒精、化学物质或其它能给受血者带来损害、危险或疾病外来物质，没有也未曾患过任何严重疾病供者血液。91/105能够经过血液传输疾病HIV梅毒疟疾病毒性肝炎等92/1051998年10月1日施行了《中华人民共和国献血法》，全国无偿献血占临床用血百分比由1998年22%上升到年95.5%，其中自愿无偿献血百分比由1998年5.5%上升到年84.7%。93/105年我国年献血总人次到达1100余万，全国自愿无偿献血占临床用血百分比从1998年5.5%上升到年99%以上，已经有超出二分之一城市临床用血100％来自自愿无偿献血，我国已基本实现了由计划无偿献血到自愿无偿献血转轨。94/105广东佰易血液制品被指携带丙肝病毒年1月22日，卫生部、国家药监局公布公告，叫停广东佰易药业有限企业生产静注人免疫球蛋白。此药品疑被感染了丙肝病毒，多位患者用药后出现“丙肝抗体呈阳性”。95/105

２０世纪８０年代和９０年代初，加拿大２万多名血友病患者因误用被污染血液和血制品，而感染艾滋病病毒和丙型肝炎病毒，许