胚胎干细胞定向分化为脊髓运动神经元

关于胚胎干细胞定向分化为脊髓运动神经元胚胎干细胞被认为是一种全能细胞，在体外能够分化发育为整个机体所有的细胞，是研究机体发育过程理想的体外实验模型。。探索胚胎干细胞定向运动神经元分化的方案，旨在为脊髓损伤性疾病的替代治疗开辟新途径。第2页,共15页，2024年2月25日，星期天

胚胎干细胞的定向诱导分化是目前研究的热点，对于单纯某种细胞类型缺失所导致的疾病，无疑是一种很好的替代性治疗方案，例如：帕金森病.第3页,共15页，2024年2月25日，星期天人类胚胎干细胞群第4页,共15页，2024年2月25日，星期天研究人员将注意力转移到胚胎干细胞，胚胎干细胞就好比一个空白细胞，可以分化改写为身体内任何类型的细胞。研究人员希望通过操作调控胚胎干细胞的分子,从而产生能够在移植时分化为运动神经元的祖细胞。第5页,共15页，2024年2月25日，星期天第6页,共15页，2024年2月25日，星期天Wichterle等在2002年最早采用RA和Shh诱导鼠胚胎干细胞先向脊髓祖细胞分化，进而诱导脊髓祖细胞向运动神经元分化。

之后Miles等改进了Wichterle等的培养方法，诱导胚胎干细胞分化为运动神经元。研究历史第7页,共15页，2024年2月25日，星期天神经科学家ThomasJessell领导的研究小组培养出只在某些运动神经元中产生绿色荧光蛋白的小鼠品系。他们将小鼠胚胎培养到含有1000个细胞，然后浸泡在视黄酸（retinoicacid）中，视黄酸能够刺激干细胞分化为更接近于神经元祖细胞的中间体。接下来，研究人员又向视黄酸中加入少量名为sonichedgehog的蛋白质，这种蛋白指引这些干细胞走上生长为脊髓神经元的路途。研究小组发现，20％到30％的胚胎干细胞都能够转化为发出绿色荧光的运动神经元祖细胞。第8页,共15页，2024年2月25日，星期天

研究小组接下来分离出含有GFP的神经元祖细胞，将它们注入到消极胚胎的脊髓中，移植的神经元祖细胞在这里能够获得信号。3天后，绿色的神经元从脊髓中伸出触须，触须与肌肉接触。这表明，如果在生长发育期动物中以同样的方式处理，干细胞也能够分化为运动神经元。“现在，如果我们知道哪些是神经元正常发育所需的，我们不仅能够开出产生运动神经元的处方，而且可以开出其它任何类型神经元的处方。”Jessell说。第9页,共15页，2024年2月25日，星期天

方法：用含重组人白血病抑制因子(IJF，1000U／出)的培养液培养胚胎干细胞，第3天，悬滴法培养拟胚体(embryoidbody，EB)，第5天添加音猬酸(sonichedgehog，Shh，5nmol／L)和维甲酸(RA，1肛mol／L)，再培养5d；然后将EB贴于铺有基质胶(mat堍e1)的培养皿上。采用免疫细胞荧光及流式细胞术检测运动神经元的分化.《华中科技大学学报：医学版》2009年第38卷第1期第10页,共15页，2024年2月25日，星期天第11页,共15页，2024年2月25日，星期天第12页,共15页，2024年2月25日，星期天

结果：胚胎干细胞在特殊的细胞因子作用下可以定向分化为特定的神经元；该培养方案可以定向分化胚胎干细胞为运动神经元。第13页,共15页，2024年2月25日，星期天感谢观看小组成员：钟彩婵周嘉舜邹薇薇郑浩畅

李良春