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文档简介

1本标准适用于苹果叶片、枝条和果实中苹果轮纹病菌的快速检测。方法检出限：10-7GB/T27403实验室质量控制规范食品分根据苹果轮纹病菌的ITS序列中特异性序列设计特异性内、外引物及环引物各一对，特异性序列参见附录A。三对引物特异性识别靶标序列上的六个独立区域，利用Bst酶启动循DNA结合时，荧光信号是游离状态的800～1000倍。在不发生扩增反应时，SYBR染料分子的荧光信号不发生改变，颜色显现为橙色；当发生扩增反应时，随着双链DNA的增加，SYBR染料的荧光信号也随之大LAMP：环介导等温扩增（loop-mediatedisothDNA：脱氧核糖核酸（deoxyriboBst酶：BstDNA聚合酶（BstDNApolymerase）25.2BstDNA聚合酶：酶浓度8U/μL。5.5DNA快速提取液：DNA-EZReagentsAll3LAMP反应体系见表1。每个试样各做2个平行管。加样时应使试样DNA溶液完全加入反应液中，不要BstDNA聚合酶8U/μL--水--8.1待测样品2个平行样反应管中液体均呈8.2待测样品2个平行样反应管中液体至少A.1苹果轮纹病菌ITS基因特异性序列（accessionn1ATTGCGCCCTTTGGTATTCCGAAGGGCATG61TCTGCTTGGTATTGGGCACCGTCCTTTGCGGGCGCGCCTCAAAGAC121CTTGCCTCAAGCGTAGTAGAACATACATCTCG181ACGAACCTTCTGAACTTTTCTCAAGGTTGAC内引物1（FIP，5’-3’CACCGC内引物2（BIP，5’

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