人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座

概述人绒毛膜促性腺激素（HCG）简单介绍人绒毛膜促性腺激素（HCG）定量检测人绒毛膜促性腺激素（HCG）临床应用人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第1页关于人绒毛膜促性腺激素（HCG）HCG是由两个非共价键相连肽链组成糖蛋白激素。其单个亚基不含有生物活性，当连接成完整化合物时始具活性，分子量约为4.7万。HCGα亚单位氨基酸排列与黄体生成素（LH）α亚单位相同，故用完整抗HCG分子抗体测定HCG时与LH间有免疫交叉反应。但它们β亚单位各不相同。所以为防止交叉反应，当前均采取抗β-HCG单克隆抗体进持特异HCG检验，近年来还有报道采取抗β-HCG羧基末端肽单克隆抗体以深入提升检测敏感性和特异性。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第2页HCG与其它激素区分HCG与LH、FSH、TSH有一个相同α亚基和一个不一样β亚基。LHβ亚基含121个氨基酸，HCGβ亚基相当于在LHβ亚基C末端延伸了24个氨基酸，共有145个氨基酸。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第3页HCG检测最初为胶体金法进行定性检测（试纸条定性）上世纪九十年代，使用放射免疫法当前主流使用化学发光、电化学发光（贝克曼库尔特Access，雅培Axsym，德普DPC系列，罗氏Elecsys，强生Eci）人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第4页定性检测局限定性检测应用与局限1、因为是定性方法也就是说只是给出阳性阴性结果，而不能给出正确数值。所以在用于判定其它疾病方面用定量检测血清HCG来代替。2、因为检测者可能是取随机尿液检测，就有可能在妊娠早期出现假阴性结果。3、一些与HCG有相同或相适片断激素可能会与尿试纸条上抗体结合而造成假阳性。如黄体生成素(LH)、一些前列腺素、一些激素类避孕药人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第5页定量检测放射免疫分析因为其灵敏度及稳定性不如现在化学发光也已被淘汰。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第6页（电）化学发光检测（电）化学发光检测相比较放射免疫分析灵敏度，准确度，稳定性及线性范围都有显著优势，不过因为临床所需检测HCG范围极广，且因为免疫检测钩状效应存在使得（电）化学发光检测HCG检测依然存在一定局限。在日常检测中我们经过利用HCG试纸条联合应用到达节约试剂目标，同时能够有效防止钩状效应出现。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第7页钩状效应钩状效应是指免疫检测中因为抗原、抗体浓度百分比不适当而致检测结果呈假阴性现象。1929年Heidelberger利用等量抗体检测浓度递增抗原，当抗原浓度较低，抗体浓度相对较高时，沉淀反应不显著；当抗原浓度增加到与抗体浓度百分比适当时，沉淀反应显著；继续增加抗原浓度时，沉淀反应反而减弱。据此绘出双对应答曲线，曲线高峰区域，抗体、抗原浓度呈最适比，沉淀反应显著，称等价带。高峰区域左侧，因为抗体浓度过高，沉淀反应不显著，称前带；高峰区域右侧。因为抗原浓度过高，沉淀反应也不显著，称后带。抗体浓度过高所致结果称前带现象，抗原浓度过高所致结果称后带现象，统称为带现象。1977年Green把此现象称为钩状效应（hookeffect），包含了前后带现象。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第8页定量检测HCG现实状况 在HCG定量检测中经常会碰到一些高值标本，超出仪器分析范围，只能汇报：>线性。而临床要求检验科提供准确检验结果，方便采取适当治疗办法。为了防止盲目选择稀释倍数，造成无须要试剂浪费和延长检验时间。我们发觉能够借助HCG试纸条先定性检测血HCG，依据检测带（以下简称T带）出现或不出现时间和颜色深浅，经过与质控带（以下简称C带）比较来选择稀释倍数，从而使超出仪器分析范围高值标本尽快地、并尽可能地一次就汇报准确结果。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第9页定量检测HCG现实状况因为HCG在体内改变很快，个体差异极大。而且在妊娠期不一样时间（平均2.2天，HCG上翻一倍）HCG水平差异极大。尤其是对于葡萄胎，恶性葡萄胎，绒毛膜癌等疾病，血清HCG极高。这么就有一些极高值HCG标本，无法准确汇报结果。但临床又要求一个准确检验结果，方便采取适当治疗方法。这么，有试验室盲目地选择稀释倍数，必定浪费试剂和时间。假如稀释倍数选择太小，稀释后仍大于仪器分析范围，必定要试着增加稀释倍数后重新测定。假如稀释倍数过大，会造成过分稀释后标本中HCG含量极微量而测不出，或者不在仪器线性范围内造成很大误差，必定要缩小稀释倍数再进行测定。即使该仪器有机内稀释功效，不过固定为某一稀释倍数如2、3、5、10、20、50、100。而且只有在第一次测试超线。才会采取机内稀释。这么就有两个问题：第一，不稀释或稀释倍数过小必定会浪费试剂。第二，在大多数情况下，固定高稀释倍数，会造成稀释后标本，不在测试线性范围内，造成很大测定误差，影响临床判断。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第10页试纸条初筛与定量检测联合应用试纸条显示情况

判断稀释倍数结果1100>10000002503878273502038814209072552093019651495675195098不稀释327.69不稀释194.7

判断稀释倍数结果1100>10000002503878273502038814209072552093019651495675195098不稀释327.69不稀释194.7人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第11页试纸条显色分析T带不出现，C带出现。血HCG定性试验阴性，说明HCG含量为零或极低，可直接原倍检测T带出现，颜色很浅，说明HCG含量较低，可直接定量测定。T带出现，颜色略浅于C带。有就T带分析有两种情况，就T带本身而言为一长方形，a：此长方形内左侧颜色比右侧深，这种标本普通浓度不会太高，只需选择较低倍数（不超20倍）稀释上机检测即可。b:右侧颜色深者，标本HCG浓度普通很高，最少在就我们经验来看，在罗氏E601仪器上普通要选最少20倍上机稀释检测。其浓度最少在七八万，高者达两三百万。T带出现，但颜色与C带深浅相当或是深于C带，前提是T带长方形内着色均匀，这类标本血HCG较高，但其浓度普通低于b种情况下浓度人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第12页试纸条初筛与定量检测联合应用我们在定量测定前，首先用HCG定性试纸条定性测定血HCG，依据T带与C带出现时间以及颜色深浅等来选择对应稀释倍数进行定量测定，无须屡次进行定量测定。极大地提升了一次汇报成功率，而且定性试纸条相对于定量试剂来说，要廉价得多。这么既节约了试剂成本；又能够防止钩状效应出现同时缩短了时间，能够说是到达了事半功倍得效果。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第13页在我们之前发觉几例钩状效应标本中试纸条分析情况均同于b种情况，详细检测数据见下表：以下数据来至于西门子标本稀释检测结果钩状效应原倍结果11825030236518631188在此种情况中，如缺乏试纸条先期判断，恐怕我们就会发犯错误汇报了。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第14页HCG临床意义HCG检验对早期妊娠诊疗有主要意义，对与妊娠相关疾病、滋养细胞肿瘤等疾病诊疗、判别和病程观察等有一定价值。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第15页HCG临床意义1．诊疗早期妊娠：孕后35-50天HCG可升至大于2500IU/L。60-70天可达8万IU/L，多胎妊娠者尿HCG常高于一胎妊娠。在妊娠最初3个月，HCG水平每（2.2±0.5）天约升高一倍，人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第16页HCG临床意义2．异常妊娠与胎盘功效判断：①异位妊娠：如宫外孕时，本试验只有60%阳性率，在子宫出血3天后，HCG仍可为阳性，故HCG检验可作为与其它腹症判别。HCG常为312-625IU/L。假如用HCG难以确认，还可用血孕酮来做辅助性诊疗。宫外孕患者血孕酮水平低，这是公认。故可作为早期诊疗方法之一。临界值为63nmol/L.异位妊娠引发腹腔内出血时，腹腔血β-HCG均大于正常值，且显著高于静脉血β-HCG。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第17页HCG临床意义妇女受孕后，从第９－11天起即可测出血中β－HCG升高，以后每两天β－HCG量可升高２倍（就算有先兆流产，HCG增加比率不会变）。

比如今天是234，假如后天测出来是450左右就就可认为是正常宫内早孕。异位妊娠时,因为输卵管肌层菲薄、滋养细胞发育不良,血供差,合体滋养细胞合成hCG量显著降低,天天升高幅度也降低假如连续两次增加速度迟缓，表明宫外孕或者胚胎不正常发育迟缓。比如今天是10，后天是15，再2天才17，这么HCG值必定不正常，保胎成功率极低。假如HCG值连续而显著下降，就算B超测到胎心也最好做清宫手术，表明胎儿其实已经脑死亡。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第18页HCG临床意义CA-125是一个起源于体腔上皮、生殖道粘膜和卵巢上皮细胞表面衍生肿瘤相关抗原,胎儿绒毛膜羊水和母体脱膜中都有大量CA-125。有资料表明异位妊娠流产患者血清CA-125水平显著高于异位妊娠成活组;相反,βhCG水平显著低于异位妊娠成活组;而且血清CA-125水平有伴随β-hCG水平降低而增高趋势,认为CA-125水平升高是对β-hCG降低一个赔偿,并有利于判别异位妊娠流产和成活性异位妊娠;但血清CA-125与β-hCG之间无统计学相关性。对于流产型异位妊娠患者可在血清CA125和连续β-hCG监测条件下采取期待疗法或药品治疗。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第19页HCG临床意义②流产诊疗与治疗：不完全流产如子宫内还有胎盘组织残存，HCG检验仍可呈阳性；完全流产或死胎时HCG由阳性转阴性，所以可作为保胎或吸宫治疗参考依据。③先兆流产：如尿中HCG仍维持高水平多不会发生难免流产。如HCG在2500IU/L以下，并逐步下降，则有流产或死胎可能，当降至600IU/L则难免流产。在保胎治疗中，如HCG仍继续下降说明保胎无效，如HCG不停上升，说明保胎成功④在产后4天或人工流产术后13天，血清HCG应低于1000IU/L，产后9天或人工流产术后25天，血清HCG应恢复正常。

如不符合这一情况，则应考虑有异常可能。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第20页HCG临床意义3．滋养细胞肿瘤诊疗与治疗监测①葡萄胎、恶性葡萄胎、绒毛膜上皮癌及睾丸畸胎瘤等患者尿中HCG显著升高，有可达10万到数百万IU/L，可用稀释试验诊疗如妊娠12周以前1：500稀释尿液呈阳性，妊娠12周以后1：250稀释尿液呈阳性，对葡萄胎诊疗有价值。1：100-1：500稀释尿液呈阳性对绒毛膜癌也有诊疗价值，如男性尿中HCG升高，要考虑睾丸肿瘤如精原细胞癌、畸形及异位HCG瘤等。假如HCG增加速度非常快，表明有葡萄胎可能，必须紧密监测。当然也有可能是双胞胎。②滋养层细胞肿瘤患者术后3周后尿HCG应<50IU/L,8-12周呈阴性；如HCG不下降或不转阴，提醒可能有残留病变，这类病例常易复发，故需定时检验。人绒毛膜促性腺激素HCG稀释经验分享和临床应用介绍专家讲座第21页4．其它更年期、排卵及双侧卵巢切除术均可致黄