药理学实验的基本知识

一、药理学试验课目标在试验过程中使学生初步掌握药理学试验基本操作技术验证和巩固药理学基本理论。经过试验培养学生含有科学思维方法和科学工作态度。药理学实验的基本知识第1页药理学试验特点

药理学试验普通以活体为对象，包含其正常功效、整体动物和离体器官或组织均在含有活性前提下用于试验。小心、规范地操作注意保护动物或标本于最正确活性状态。药理学实验的基本知识第2页三、药理学试验课要求试验前仔细阅读本课程和相关课程讲义，了解试验目标、要求、步骤和操作程序。结合试验内容复习相关理论。药理学实验的基本知识第3页（二）试验时保持试验室整齐、清洁，保持试验室平静，不要高声谈笑，不得进行与试验无关活动。爱护公共财物,各组仪器和器材由各组使用按照试验步骤，认真操作，注意保护试验动物和标本，节约试验器材和药品。仔细、耐心地观察试验过程中出现现象，真实客观地统计试验结果，并加上必要文字注释，有时还需要绘制图形或曲线进行分析。药理学实验的基本知识第4页

（三）试验后

将试验用具整理就绪，所用器械冲洗洁净后，交还借用器械。假如器械有损坏或短少，应马上汇报负责教师。动物尸体、标本、纸片和废品应放到指定地点。搞好试验室清洁卫生工作，离开试验室前应关灯，关窗，关水龙头。认真整理试验结果并撰写试验汇报。药理学实验的基本知识第5页试验汇报书写每次试验，均要求写出试验汇报。试验汇报应注意文字简练，通顺，书写清楚，整齐，正确使用标点符号。药理学实验的基本知识第6页惯用手术器械惯用试验仪器药理学实验的基本知识第7页动物试验基本操作技术试验动物是指人工喂养，对其携带微生物实施控制，遗传背景明确或者起源清楚动物。这些个体含有很好遗传均一性、对外来刺激敏感性和很好重复性。药理学实验的基本知识第8页1．青蛙与蟾蜍2．小白鼠3．大白鼠4．豚鼠：性情温顺，胆小怕惊吓，对组胺敏感。惯用于免疫学研究和过敏性疾病模型5．家兔：耳大，血管清楚，便于静脉注射和取血。眼大易观察，惯用于眼科研究。因其体温改变较敏感，也惯用于体温试验及热原检验。药理学实验的基本知识第9页6．猫：猫血压比较稳定，较大鼠、家兔等小动物更靠近于人体，且与人相同，故可用于循环药理研究。7．狗：是医学试验中最惯用大动物。血液、循环、消化和神经系统均很发达、与人类较靠近。适合用于药理学、毒理学和药品代谢、营养学和药理学研究。8、小型猪：毛发、皮肤厚薄，形态学和增殖动力学与人非常相同。理想烧伤模型9、猴：最相同生物学和行为学特征药理学实验的基本知识第10页试验动物编号、捉拿与固定1．染料标识法惯用染料：红色染料：5％中性红或品红液；黄色染料：3%～5％苦味酸溶液；咖啡色染料：2％硝酸银溶液；黑色染料：煤焦油酒精溶液。药理学实验的基本知识第11页（2）标识规则：依据试验动物被毛颜色不一样选择不一样化学药品涂染动物。A、兔、猫、狗等动物标识方法：用毛笔蘸取不一样颜色染料溶液直接在动物背部涂写号码。若用硝酸银溶液涂写，则需在日光下暴露1分钟。B、大鼠、小鼠标识：通常在动物不一样部位涂上有色斑点来表示不一样号码。常规涂染次序是从左到右、从上到下。左前肢为1号、左侧腹部2号、左后肢3号、头部4号、背部5号、尾根部6号、右前肢为7、右侧腹部8号、右后肢9号、不作染色标识为10号。在每组试验动物不超出10只情况下适用。

药理学实验的基本知识第12页双色涂染法是采取两种颜色同时进行染色标识方法。双色法色法可标识100位以内号码。比如用苦味酸（黄色）染色标识作为个位数，用具红（红色）染色标识作为十位数。个位数染色标识方法同单色涂染法；十位数染色标识方法参考单色涂染法，即左前肢为10号、左侧腹部20号、左后肢30号、头部40号、背部50号、尾根部60号、右前肢70号、右侧腹部80号、右后肢90号，第100号不作染色标识。比如标识第12号试验动物，在其左前肢涂染品红（红色），在其左侧腹部涂上苦味酸（黄色）即可。药理学实验的基本知识第13页2．穿耳打孔法：用专门打孔器在动物耳朵不一样部位打孔或缺口来表示一定号码。此法是小鼠惯用标识方法之一。3．挂牌编号法：惯用于狗、猴、猫等大动物编号。试验前将之固定于动物颈圈或耳上4．人工针刺号码法：先将动物被毛去除，用针在动物皮肤上刺出号码，再用酒精墨汁涂染即可药理学实验的基本知识第14页动物抓取小鼠抓取固定方法

小鼠温顺，普通不会咬人，抓取时先用右手抓取鼠尾提起，置于鼠笼或试验台向后拉，在其向前爬行时，用左手拇指和食指抓住小鼠两耳和颈部皮肤，将鼠体置于左手心中，把后肢拉直，以无名指按住鼠尾，小指按住后腿即可。有经验者直接用左手小指钩起鼠尾，快速以拇指和食指、中指捏住其耳后颈背部皮肤亦可。这种在手中固定方式，能进行试验动物灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其它试验操作。药理学实验的基本知识第15页大鼠抓取固定方法

大鼠抓取斯基本同小鼠，只不过大鼠比小鼠牙尖性猛，不易用攻击方式抓取，不然会被咬伤手指，抓取时为防止咬伤，可带上帆布手套。动物抓取药理学实验的基本知识第16页药理学实验的基本知识第17页试验动物给药方法

经消化道给药1．小鼠灌胃法灌胃法

12~16号注射针头，尖端部磨钝，针头长4~5cm进针2~3cm后。灌药量普通为0.1~0.3ml/10g体重药理学实验的基本知识第18页大鼠灌胃法长约6～8cm，直径约为1.2mm，一次灌胃量普通在1ml/100g体重。

药理学实验的基本知识第19页豚鼠灌胃法豚鼠体重<200g以下时，灌胃方法可与大鼠相同；体重>200g以上时，应用木制开口器和导尿管灌胃。

插管完成后，先回抽注射器针栓，无空气抽出时，再慢慢推注药液。如回抽出空气，说明可能插入气管，应拔出重插。药品注完后应再注入生理盐水2ml，将管内残余药品冲入药理学实验的基本知识第20页兔灌胃法：用兔固定箱，可一人操作。右手将开口器固定于兔口中，舌压在开口器下面，慢慢沿兔口腔上腭壁插入食道约15～18cm。插管完成将胃管外口端放入水杯中，切忌伸入水过深。如有气泡从胃管逸出，说明不在食道内而是在气管内，应拔出来重插。如无气泡逸出，则可将药推入并以少许清水冲洗导尿管确保管内药液全部进入胃内。药理学实验的基本知识第21页二、注射给药法小鼠皮下注射

通常在背部皮下注射。注射时以左手拇指和中指将小鼠颈背部皮肤轻轻提起，食指轻按其皮肤，使其形成一个三角形小窝，右手持注射器从三角窝下部刺入皮下，轻轻摆动针头，如易摆动时则表明针尖在皮下，此时可将药液注入，针头拔出后，以左手在针刺部位轻轻捏住皮肤片刻，以防药液流出。药量普通为0.1ml—0.3ml/10g体重。药理学实验的基本知识第22页大鼠皮下注射注射部位可在背部或后肢外侧皮下，操作时轻轻提起注射部位皮肤，将注射针头刺入皮下后推注药液。一次注射量不超出1ml/100g体重。药理学实验的基本知识第23页豚鼠皮下注射通常在大腿部内侧面注射。固定豚鼠后，左手固定注射侧后肢并充分提起皮肤，右手持注射器，针头与皮肤呈45度角方向刺入，确定针头在皮下后推入药液。注射完成后应指压刺入部位并轻轻揉之。药理学实验的基本知识第24页兔皮下注射法可在背部或颈部注射，方法参考小鼠皮下注射法。给药量普通为0.5~1.0ml/kg体重。

药理学实验的基本知识第25页2．腹腔注射法（1）小鼠腹腔注射

左手固定动物，使腹部向上，头呈低位。右手持注射器，在小鼠下腹部腹白线稍向左或右位置，从下腹部朝头方向刺入皮肤，针头抵达皮下后，沿皮下向前推进3～5mm，然后使注射器针头与皮肤呈45°角刺入腹膜。针头刺入腹膜后感抵抗力消失，此时在保持针头不动状态下回抽针栓，如无回血或尿液，则可推入药液。一次可注射量为0.1～0.2ml/10g体重。药理学实验的基本知识第26页大鼠、豚鼠、兔、猫等腹腔注射皆可参考小鼠腹腔注射法。但应注意家兔与猫在腹白线两侧注射（应在离腹白线约1cm处进针）。药理学实验的基本知识第27页3．肌肉注射法小鼠、大鼠、豚鼠肌肉注射普通因肌肉少，不作肌肉注射，如需要时，可将动物固定后，一手拉直动物左或右侧后肢，将针头刺入后肢大腿外侧肌肉内，小鼠一侧药液注射少于0.4ml，针头选取5～7号。兔肌肉注射可选两臂或股部。药理学实验的基本知识第28页静脉注射法

小鼠大鼠普通采取尾静脉注射。注射前先将动物固定于固定器内（可采取铁丝笼、金属筒或底部有小孔玻璃筒），使其整个尾部外露，以右手食指轻弹尾尖部，必要时可用45～50℃温水浸泡尾部1～2分钟或用75％乙醇擦拭尾部，或者将小鼠先放在40~50℃左右加热板上做运动，使其全部血管扩张充血。以拇指与食指捏住尾根部两侧，无名指和小指夹持尾尖部，中指从下托起尾巴固定之。药理学实验的基本知识第29页选择一根最为充盈血管，右手持4号针头使其与尾部呈30度角刺入静脉，针头在静脉内平行推进少许，左手三指连针头和鼠尾一起捏住固定，以防动物活动时针头脱出。回抽见血，且推进药液无阻力、并可见沿静脉血管出现一条白线说明针头在血管内，可注药。如碰到阻力较大，局部发白变硬时，说明针头不在静脉内，需拔出针头重新穿刺。注射完成后拔出针头，轻按注射部止血。普通选择尾两侧静脉，针刺宜从尾尖端开始，渐向尾根部移动，以备重复应用。普通一次注射量为0.05～0.2ml/10g体重。药理学实验的基本知识第30页大鼠亦可舌下静脉注射或待其麻醉后，切开其大腿内侧皮肤进行股静脉注射，也可颈外静脉注射。药理学实验的基本知识第31页豚鼠：可选取前肢皮下头静脉、耳壳静脉、外颈静脉、或脚背中足静脉等多部位进行注射。偶还可心内注射。药理学实验的基本知识第32页家兔：家兔静脉注射普通采取耳缘静脉。注射前先剪除其表面皮肤上毛并用水湿润局部，血管即显现出来。可先轻弹或用酒精棉球揉擦耳尖部并用左手食指和中指轻压耳根部，拇指小指夹住耳边缘部分，以左手无名指放在其下作垫，待静脉显著充盈后，右手持带有6~8号针头注射器刺入静脉（第一次进针点要尽可能靠远心端，以备重复应用），顺着血管平行方向深入1厘米后，放松对耳根处血管压迫，左手拇指和食指移至针头刺入部位，将针头与兔耳固定针头刺入血管后再稍向前推进，轻轻推进针栓，若无阻力和局部皮肤发白、隆起现象，即可进行药品注射，药理学实验的基本知识第33页试验动物麻醉1.局部麻醉浸润麻醉、阻滞麻醉、和椎管麻醉惯用0.5～1％普鲁卡因，表面麻醉宜选取2%丁卡因溶液。2.全身麻醉（1）吸入麻醉小鼠、大鼠和兔惯用乙醚吸入麻醉。将浸过乙醚脱脂棉花铺在麻醉用玻璃容器底部，试验动物置于容器内，容器加盖。乙醚具挥发性，经呼吸道进入肺泡后对动物进行麻醉，吸入后约15～20分钟开始发挥作用，适合用于时间短手术过程或试验。内放置乙醚棉球可追加麻醉时间。但在麻醉早期，动物常出现强烈兴奋现象，因其对呼吸道有较强刺激作用，可使粘液分泌增多以致堵塞呼吸道。另外，乙醚易燃、易爆，故需要专员管理。使用时应避火、通风、注意安全。药理学实验的基本知识第34页（2）注射麻醉

适合用于各种动物，注射方法不一。不一样动物对注射麻醉药反应不尽相同，故需依据试验目标针对不一样试验动物选取适当麻醉药种类和剂量。药理学实验的基本知识第35页表3-6-1注射麻醉药剂量与给药路径药物（惯用浓度）动物给药法剂量（mg/kg）维持时间（小时）备注戊巴比妥钠（1～5％）犬猫兔豚鼠大鼠小鼠I.V.I.P.I.H.I.P.I.P.I.P.3030504545451～21～21～21～21～21～2硫喷妥钠（5％）犬、猫兔、大鼠I.V.I.P.I.V.I.P.20～3030～500.25～0.50.25～0.5抑制呼吸，I.V.宜慢，应临用时配乌拉坦（20％）猫、兔大鼠、小鼠蛙I.V.I.P.I.M.淋巴囊90～100013002～42～42～4毒性小，较安全氯醛糖（2％）猫、兔大鼠I.V.I.P.I.V.I.P.80805～65～6安全，肌松不全氯乌合剂猫兔I.V.I.P.氯75乌7505～6I.V.静脉注射I.P.腹腔注射I.M.肌肉注射I.H.皮下注射*氯:氯醛糖乌：乌拉坦药理学实验的基本知识第36页在麻醉过程中，除参考上述普通药品用量标准外，还必须亲密注意动物状态，以决