进出口食品中异稻瘟净残留量的检测方法

进出口食品中异稻瘟净残留量的检测方法5试样制备与保存5.1试样制备5.1.1水果或蓝菜取有代表性样品500g,将其可食用部分切碎后不可用水洗涤，用捣碎机将样品加工成案状。混匀，装入洁净的盛样容器内，密封并标明标记。5.1.2茶叶及粮谷取有代表性样品500g.用粉碎机粉碎并通过2.0mm圆孔筛。混匀.装入洁净的盛样容器内，密封并标明标记。5.1.3肉及肉制品取有代表性样品500g,将其切碎后，用捣碎机将样品加工成浆状，混匀，装入洁净的盛样容器内，密封并标明标记。茶叶、蜂产品、调味品及粮谷类等试样于0C～4C保存；水果蔬菜类和肉及肉制品类等试样于-18℃以下冷冻保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。6测定步骤对于茶叶、板粟、蜂蜜、大米样品·称取1g均匀试样《精确至0.001g),对于菠菜、葬头、苹果、食醋、鸡肉、牛肉、鱼肉样品，称取2g均匀试样(精确至0.001g)。将称取的试样置于15mL.离心管中，加入1g氯化的，加入2mL蒸馏水，于混匀器上混匀30s,放置15min。加入3mL丙酮+正已烷混合液(3.5),在混匀器上混匀2min。2500r/min离心1min,吸取上层正已烷萃取液于另一试管中。再分别加入3mL丙酮+正已烷混合液重复提取两次，合并提取液。6.2.1茶叶、菠菜、养头、苹果、板栗、蜂蜜样品：将石墨化碳黑固相萃取柱(柱内填约1cm高的无水硫酸的层)安装在固相萃酸的真空抽滤装置上，先用1ml×3丙酮预淋洗萃取柱，再用1mL×3正已烷预淋洗萃取柱，弃去全部预淋洗波。将正己烷提取液加入到石墨化碳黑固相萃取柱中，待提取液全部流出后，再用3mL.丙酮+正己烷混合液(3.6)洗脱萃取柱，保持流速1.5mL/min.收集全部流出液，于45℃下，氮气流吹至近干。最后用正己烷定容至0.5mL,供GC-MS分析。6.2.2食醋、大米、鸡肉、牛肉，鱼肉样品；将中性氧化铝固相苯取柱(柱内填约1cm高的无水硫酸钠层)安装在固相苯取的真空抽滤装置上，先用3mL丙酮预淋洗萃取柱，再用3ml.正己烷预淋洗萃取柱，弃去全部预淋洗液。将正已烷提取液加入到中性氧化铝固相萃取柱中，待提取液全部流出后，再用3mL.丙酮十正已烷混合液(3.6)洗脱萃取柱，保持流速1.5ml./min,收集全部流出液，于45℃下，氮气流吹至近干。最后用正己烷定容至0.5ml,,供GC-MS分析。6.3.1气相色谱-质谱条件a)色谐柱：HP-5MS石英毛细管柱.30m×0.25mm《内径),膜厚0.25μm,或相当者；b)色谱柱温度；初始温度80℃,以7C/min升至205℃,再以25℃/min升至280℃保持5min;e)进样口温度；280℃;d)色谱-质谐接口温度；270℃;e)载气：氮气，纯度大于等于99.995%,0.8mL/mint允许范围内(允许范围见表1)则可判定样品中存在对应的待测物。在第6.3.1条规定的色谱条件下，异稻癌净的参考保留时间是17.70min,其监测离子(m/z)丰度比是203:204:246:288=17:100;15:19。色谱图和质谱图参见附录A。表1使用定性气相色谱-质谱时相对离子丰度最添加浓度和回收率见表2。添加浓度/(mg/kg)表2(续)梁加浓度/(mg/kg)86.8~110.M9-03.本标准规定了食品中异稻癌净残留量的气相色谱测定方法。本标准适用于大米、菠菜、苹果、牛肉、鸡肉、鱼肉、蜂蜜、板栗、茶叶、食醋等食品中异稻瘟净残留量在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。13测定步骤13.1提取与净化13.1.1对于大米、板栗，蜂蜜样品，称取2g(精确至0.001g)均匀试样于10ml.离心试管中，加人2mL.水，加入无水硫酸钠使之饱和，加入2ml.丙酮十正已烷混合液(10,4)振荡提取两次，每次2min,然后离心3min(离心速度为2000r/min),吸取上层提取液于刻度离心管；残渣再用2mL正己烷提取两次，合并提取液于刻度离心管中.在多功能微量化样品处理仪或其他相当的仪器上，于40℃下用氮气流吹至1.0mL.供进样分析。13.1.2对于菠菜、苹果、食酷样品，称取2g(精确至0.001g)均匀试样于10ml.离心试管中。对于茶叶样品，称取0.5g(精确至0.001g)均匀试样于10mL离心试管中，加入2mL水，加入无水硫酸钠使之饱和，用2mL丙酮十正己烷混合液(10.4)振荡提取两次，每次2min,然后离心3min(离心速度为2000r/min),吸取上层提取液于另一离心试管中。残渣再用2mL正已烷提取两次，合并上层提取液，待净化。在石墨化碳黑固相萃取柱上端装入1cm高的无水硫酸钠，先用4ml.丙酮十正已烷混合液(10.4)预淋洗固相萃取柱，弃去全部预淋洗液，然后将上述提取液顿入固相萃取柱中，待提取液全部流出固相萃取柱后，再用4ml.丙酮十正己烷混合液(10,4)洗脱，收集全部流出液于刻度离心管中，最后在多功能微量化样品处理仪或其他相当的仪器上，于40℃下用氮气流吹至1.0mL,,供进样分析。13.1.3对于牛肉、鸡肉、鱼肉样品·称取2g(精确至0.001g)均匀试样于10mL.离心试管中，加入无水硫酸钠使之饱和，用6mL丙酮+正己烷混合液(10.4)振荡提取一次，时间2min.然后离心3min(离心速度为2000r/min),收集上层提取液于另一试管中。残渣再用2mL正已烷提取两次，合并上层提取液，待净化。在中性氧化铝固相萃取柱上端装入1cm高的无水硫酸钠，先用4ml.丙酮十正己烷混合液(10.4)预淋洗固相萃取柱，弃去全部预淋洗液，然后将上述提取液倾入固相苯取柱中，待提取液全部流出固相萃取柱后，再用4mL.丙酮十正已烷混合液(10.4)洗脱，收集全部流出液于刻度离心管中，最后在多功能微量化样品处理仪或其他相当的仪器上，于40℃下用氮气流吹至1.0mL,供进样分析。13.2.1色谱条件a)色谱柱：EQUTTYI-1701毛细管桂，30m×0.32mm(内径)×1.0pm或相当者；b)升温程序；初始温度100℃,以10℃/min升至220℃,保持10min;c)进样口温度；250℃,d)检测器温度；250℃;e)载气：氮气，纯度大于等于90.99%,流量5.0mL/minti)进样方式：无分流进样，1.0min后开阀；13.2.2色谱测定根据样液中异稻癌净含量情况.选定与样液浓度相近的标准工作溶液。异稻瘟净标菲工作溶液和样液中异稻疽净响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定，以保留时间定性，测量峰面积与标准工作液比较进行定量。在上述色谱条件下，异稻瘟净标准物质的色谱图参见附录B中图B.1。除不加试样外，按上述测定步骤进行。 添加浓度/(mg/kg)表3(续)梁加浓度/(mg/kg)(资料性附录)异稻瘟净标准物质的色请图图B.1异稻癌净标准物质的色谱图DeterminationofThefirstmethodGaschromatography-massThisstandardspecifiesthedeterminstionandraphy-massspectrometryiThisstandardisapplicabletothedeterminatitea,leek.Alliumchinese,apple,chestnut,beehoney,vinegar,rice,beef,chicken,fish.TheiprobenfosresiduesinthetestsampleareextractedwithacetobypassingthroughagraphitizedcarbonblackcartridgeelutessolutionisevaporatedandmmadebymeansofgaschromatographequippedwithmassselectivedeUnlessotherwisespecified,thereagentsshouhdbeanalyticallypure3.4Anhydroussodiumsul3.5Acatone-n-hexanesolution;Acetone+n-hexane(1+2).3.6Acatone-n-hexanesolution;Acetone+n-hexane(3.7lprobenfosstandard(CgH,O₂PS,CAS;26087-47-8);Pur3.8lprobenfosstandardstocksolution:Accuratelard,dissolveinasmallvolumeofacetone.Dilutew1000pg/mLinconcerntration.Thconcerntrationasthestandardworkingsolution.Thestand3.9Graphitizedcarbonblackcar3.10Neutralaluminumoxidecart4.1Gaschromatograph,equippedwithmass4.6Multifunctionalsampletrestmentunitformicro-chemica4.8Centrifugetu5PreparationandstoraTherepresentativesamplesroot,coronal(donotwanizedthoroughlyinahighspeedblender,aTherepresentativesamplesisreducedtocaTherepresentativesamplesisreducedtoca5mogenizedinameatgrinThetestsamplesoftea,beeproducts.grainsorcerealssamplesoffreshfruits,vegetables,meatandmeatproductsshouldcourseofsamplingandsamplepreparatfactorswhichmaycausethechangeofresicentrifugetube,Forleek,Alliumchinense,apple,vinegar,beef,chicken,fish,weighca20.001g)ofthetestsadistilledwater,blendfor30s,standforinvortexmixer,centrifugefor1minundintoanother15mLgraduatedtube.Repeattheproce6.2.1Tea,leek,Alliumchinense.apple,chestnut,beehoney;Setupcummanifoldandmechanicalpump(about1cmgraphitizedcarbonblackcartridge).Firstwashthegracetone,thenwashitwith1mL×3n-hexane,kTransfertheextractsintothecartridge.Washthetesttubewith(3.6)andaddintothecartridge.Collectthe6.2.2Vinegar,rice,beef,chicken,fish;Setupthesolidphasechanicalpump(about1cmoxidecartridge).Firstwashneutralaluminumoxidecartr3mLn-hexane,keepflowspeedat1.5mL/min.Dcartridge.Washthetesttubewith3mLacetome+n-hexantridge.Collectthetotaleluentandblowmearlyanddiluteexactlyto0.5ma)Column;HP-5MSfusedquartzcapillarycolumn.30m×0.25mm(b)Columntemperature;Initialtemperature80℃,rampat7℃/mintd)GC/MSinterface)Carriergas;Helium,purity>99.995%,0.8j)Acquistionmode;Sk)Monitorion(m/z):203.204,246,288;quantAccordingtotheapproximateconcentrationofiprobanfosinthetestsamplenitoringions(m/z)is203120412461288=17Table1—Maximumpermittedtolera10.5lprobenfosstandard(CwH,O₂PS,CAS12608710.6lprobenfosstandardsolution:Accuratelyweightanadequateamountdissolveinasmallvolumeofacetone.Dilutewithacetonetoforma1000pg/mLinconcerntration.Thendilutethestandardquiredconcerntrationasthestandardworkingso10.7Graphitizedcarbonblackcartridge10.8Neutralaluminumoxidecartridge;11Apparatusa11.2Vortexmixer.11.4Multifunctionsampletreatmentunitformicro11.5Centrifugetubewit11.8Micro-adjustablevolunmeTherepresentativesamplesiroot,coronal(donotwanizedthoroughlyinahighspeedblender,a4mLacetona+hexane(10.4).Discardedthealuent.Transferallaxtractsblackcartridge,thenelutethecartridgewith4mLacecentrifugetubewithgroundstoptratedsolutionisreadyforgas13.1.3Forbeef,chicken,fish,weigh2gofthetefugetube,Add2mLwater,thensaturateth