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进出口危险化学品安全试验方法第11部分：种系突变试验24试验方法4.1试验动物成年小鼠(体重25g~30g),或大鼠(体重180g～220g)。动物总数不少于30只，雌雄各半。试验动物饲养条件应符合GB14924.1和GB14925有关规定。溶剂通常采用燕馏水，等渗盐水、植物油、食用淀粉、羧甲基纤维素钠等。如使用特殊溶剂或载体，应有参考资料说明其成分。4.3剂量分组应进行预试验以选择最高剂量，为避免出现假阴性结果应适当增大剂量范图。如果受试样品具有毒性，应在第一个采样时间点设三个剂量，设置的剂量应包括从最大毒性至最小毒性或无毒性的范围。第二次采样时间点仅需设置最高剂量。按等比级数2向下设置中、低剂量组。5试验步骤如果单次染毒剂量不小于2000mg/kg,未出现毒性效应，且根据资料预期受试物无遗传毒性，则不需要进行其他染毒剂量的试验。一般情况下染毒—次.或者为便于大容量给药，也可分散剂量染毒，即同一日染毒两次，其间隔时间不超过几小时。高剂量组动物分为A,B两个亚组·分两次采集样品，啮齿类动物采样时间一般为1.5个正常期中的间隔期，即A组于末次染毒后12h~18h采集样品。B组于末次染毒后36h~42h采集样品；中、低剂量组均于末次染毒后12h~18h采集样品。如果采用多次染毒方式，只需在最后一次染毒后12h~5.1.3制备细胞混悬液用颈椎脱白法处死动物，迅速摘取一侧睾丸，用TIM液冲去血污，置于小平皿中，去除白膜，将曲细精管剪成碎段，加入3ml.TIM液的反复吹打后，经钢网过滤到5ml.离心管中，以1500r/min离心5min,弃上清，加TIM被洗涤细胞2次，再加1.5mL的TIM液制成细胞混悬液。取细胞混悬液于洁净玻片上滴片，每只动物制片两张，静置5min后，滴加Helly氏固定液数滴预固定10min,染缸中Helly氏液再固定1h,用70%乙醇冲洗几次后，故到70%乙醇待染。将有细胞的玻片用蒸馏水冲洗几次后，1%高碘酸浸泡10min,Schiff's液浸泡10min,自来水冲洗5min,蒸馏水冲洗2次，15%苏木素染色5min,自来水冲流5mih,蒸馏水冲洗2次，用1%盐酸酒精中分色70s,自来水浸泡10mim,蒸馏水冲洗2次，依次用50%、75%、80%、90%、95%、95%、100%、100%酒精脱水，酒精二甲苯透明，二甲苯透明，树胶封片，镜检。6试验结果——所有玻片，包括阳性对照和阴性对照，在镜检前要分别编号。——在低倍镜下检查制片质量，制片应全部染色体较集中，而各个

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