版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
关于实验一培养基的配制一、实验目的了解植物外植体离体培养所需各种营养成分及激素种类。初步掌握培养基母液配制方法。第2页,共18页,2024年2月25日,星期天二、实验原理
植物材料培养要获得成功,并正常生长,培养基的成分是一个决定性因素,不同植物要求不同的培养基。大多数植物组织培养所用的培养基由无机营养物、碳源、维生素、生长调节物质和有机附加物等五类物质组成。第3页,共18页,2024年2月25日,星期天
在配制培养基之前,为了使用方便、简化操作、用量准确,减少每次配药称量各种化学成分所花费的时间和误差,常常将配制培养基所需无机大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素成分分别配制成比需要量大若干倍的浓缩母液,置于冰箱内保存。当配制培养基时,按预先计算好的量分别吸取各种母液稀释即可。第4页,共18页,2024年2月25日,星期天三、实验材料与器具1、用具器材灭菌锅、普通及精密天平、烧杯、医用瓷缸、量桶、移液管、试剂瓶、药勺、玻璃棒、pH试纸。2、药品试剂蒸馏水、1NHCl、1NNaOH、95%酒精、蔗糖、琼脂、各种所需化学药品(分析纯)。第5页,共18页,2024年2月25日,星期天四、实验步骤
1、母液配制(1)配制10倍1LMS大量元素母液NH4NO3
16.5gKH2PO4
1.7gKNO3
19g
CaCl2·2H2O
4.4gMgSO4·7H2O
3.7g第6页,共18页,2024年2月25日,星期天
配制成200倍1L母液,依次称取:KI
0.166g
Na2MoO4·2H2O
0.05gH3BO3
1.24g
CuSO4·5H2O
0.005gMnSO4·4H2O
4.46g
CoCl2·6H2O
0.005gZnSO4·7H2O
1.72g(2)配制MS微量元素母液第7页,共18页,2024年2月25日,星期天
配制成200倍lL铁盐母液,依次称取:EDTA二钠(Na2·EDTA·7H2O)7.46g
FeSO4·7H2O
5.56g(3)配制MS铁盐母液
第8页,共18页,2024年2月25日,星期天
配制成200倍1L有机母液,依次称取:盐酸硫胺素(VB1)
0.02g烟酸
0.1g
盐酸吡哆醇(VB6)
0.1g(4)配制MS有机母液①第9页,共18页,2024年2月25日,星期天(5)配制MS有机母液②配制成200倍1L有机母液:肌醇
20.0g
(6)配制MS有机母液③配制成200倍1L有机母液:甘氨酸
0.4g
第10页,共18页,2024年2月25日,星期天
0.1mg/mL的6-BA溶液:取25mg的6-BA,用少量1N的盐酸溶解,再加蒸馏水定容至250mL。0.1mg/mLNAA:取25mg的NAA可溶于热水中或用少量95%乙醇或少量1N的NaOH溶解后,再加水定容至250mL。0.1mg/mL2,4-D:取20mg的2,4-D溶于少量95%乙醇中,再加水定容至200mL。(7)植物激素的配制第11页,共18页,2024年2月25日,星期天
2、培养基的配制(以1L培养基为例)1、计量根据配制培养基的量(1L)和母液的浓度计算需要吸取母液的量,计算公式:吸取量mL=培养基中物质浓度(mg/L)×1000mL/母液浓度(mg/L)。母液浓度/培养基中物质浓度=稀释倍数2、移液取大烧杯(1L)一只,按照计算吸取母液的量依次吸取各母液置于烧杯中备用。3、称取称取10g琼脂,30g蔗糖备用。第12页,共18页,2024年2月25日,星期天4、融化用搪瓷量杯量取600~700mL的蒸馏水放在电炉上,加入琼脂,边加热边用玻璃棒搅拌,直到液体呈半透明状将其取下,加入蔗糖,搅拌使之溶解。5、混合将融化的琼脂和蔗糖倒入装有母液的大烧杯中,充分混合,用蒸馏水定容到1000mL。6、调pH
用滴管吸取物质的量浓度为1mol/L的NaOH或HCl溶液调pH为6.0。第13页,共18页,2024年2月25日,星期天编号6-BA(mg/l)NAA(mg/l)2,4-D(mg/l)第一组0.50.11.0第二组0.50.52.0第三组0.50.050第四组1.00.10共分4组,每组配750mL培养基,每瓶倒25-30mL,共接种28瓶左右每瓶编号1(1/2/3/4)n号分组情况第14页,共18页,2024年2月25日,星期天3、培养基的分装和灭菌溶化的培养基应该趁热分装。分装时,将烧杯中的培养基倒入锥形瓶中,每瓶约25mL-30mL。注意不要让培养基沾到瓶口和瓶壁上。用封口膜封口并编号。灭菌:121℃,15-20min。第15页,共18页,2024年2月25日,星期天五、注意事项
配制铁盐母液时,FeS04和Na2EDTA应分别加热溶解后混合,并置于加热搅拌器上不断搅拌至溶液呈金黄色(约加热20
-
30
min),调pH值至5.5,防止FeS04结晶析出
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 高等职业教育品牌专业申报指南
- 【亲子活动】10-12个月亲子园活动教案:套圈
- 杭州市西湖区2023年九年级上学期《数学》期末试题和参考答案
- 真空绝热板芯材相关行业投资规划报告
- 全球的封装用金属管壳市场规模2020年达到1973.80百万美元
- 江苏开放大学本科行政管理专业060192公共管理学期末试卷
- 信息技术课程与教学(第2版)课件 第1章 我国信息技术课程的发展
- 专题4.6 一元一次不等式(组)(直通中考)(提升练)-2023-2024学年八年级数学上册全章复习与专题突破讲与练(湘教版)
- 人教版必修二《第七章 复数》复习教案
- 中国现代史 练习 高三历史二轮复习
- 美发与形象设计-盘发设计(高职)全套教学课件
- 外包食堂经营可行性方案
- 公共服务满意度调查与分析
- 道德与法治下册:小学三年级的复习计划
- 小学科学实验电池的工作原理
- 教学查房-社区获得性肺炎
- 江苏省徐州市2023-2024学年八年级上学期1月期末语文试题
- 2023中国邮政集团限公司内蒙古分公司招聘考前自测高频难、易考点模拟试题(共500题)含答案详解
- 温儒敏谈读书
- 山西建筑能耗报告
- 夜市项目规划设计方案
评论
0/150
提交评论