非洲猪瘟的流行特征和传播路线

摘要：2018年8月3日辽宁省沈阳市某猪场首次暴发非洲猪瘟疫情。为了解全球非洲猪瘟流行形势，正确认识非洲猪瘟的病原学和流行病学特征，防止非洲猪瘟在我国进一步扩散和传播，本文简明阐述了非洲猪瘟特有的病原学特征、主要感染源、传播途径以及监测技术要点，分析了需特别关注的4种传染源，供相关人员参考，以便及早根除国内的非洲猪瘟疫情，保障我国养猪业健康发展。非洲猪瘟（Africanswinefever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（Africanswinefevervirus，ASFV）引起的一种急性、热性、高度接触性传染病，发病时间短，病死率高达90%~100%。ASF是对养猪业危害最为严重的疫病，被世界动物卫生组织（OIE）列为法定报告疫病，被我国列为一类传染病。2018年8月3日，沈阳市沈北新区某猪场证实发生ASF疫情。这是我国首次发生ASF。此次疫情引起了国内外高度关注。如何正确认识ASFV病原学特征和流行规律成为当务之急。本文结合国内外ASF研究进展，阐述了ASFV病原学特征、流行病学特征、诊断要点，分析了国内需要特别关注的几种传染源，以期为采取有效措施，防范、控制和清除ASF提供参考。1、全球ASF流行概况全球ASF流行大体可以分为三个阶段。第一阶段，主要在非洲大陆暴发和流行。1921年，非洲肯尼亚最早报道ASF发生，随后非洲南部、中部和东部先后发生ASF疫情，至今非洲中南部仍是非洲猪瘟的主要疫区。第二阶段，ASF传出非洲大陆进入欧洲和南美洲。1957年ASF首次传出非洲大陆，在葡萄牙的里斯本地区发生。随后西班牙、法国、意大利、荷兰等西欧国家陆续发生ASF疫情。通过扑杀等措施，到20世纪90年代，除意大利撒丁岛外，欧洲基本清除了ASF。1971年南美洲的古巴首次报道ASF，随后巴西、多米尼加等国也报道有ASF疫情发生。第三阶段，ASF传入东欧和俄罗斯。2007年ASF经轮船泔水长距离传播至东欧的格鲁吉亚，继而传播到阿塞拜疆、亚美尼亚、波兰、立陶宛、白俄罗斯、俄罗斯等，至今仍在局部暴发和流行（图1）。2018年以来，中东欧国家通报发生的ASF疫情就有2710起。2017年俄罗斯通报发生160起ASF疫情，其中俄罗斯远东地区发生疫情的伊尔库茨克州还是重要的商贸枢纽，与我国的交通贸易非常频繁，对我国形成了极大威胁。

图1目前全球非洲猪瘟疫区分布2ASFV特有的病原学特征2.1存活时间长，抵抗力强ASFV属于双链DNA病毒目非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟病毒属。该属目前仅有一个ASFV病毒种。ASFV的基因组为单分子线状DNA，长度约170~190kb。ASFV个体较大，直径可达200nm，表面为二十面体结构和一层含类脂的囊膜，因此高温和一些破坏囊膜的消毒剂均可有效杀灭ASFV。但是由于其复杂的分子结构，ASFV对消毒剂的抵抗力较其他的囊膜病毒稍强，特别是在一些猪肉制品或血液中存活时间更长。据报道，ASFV在干腌火腿中的感染性可持续140d，在帕尔马火腿中的感染性可持续300~399d，在血液、粪便和组织中存活时间长达半年，在生肉或者未完全煮熟的猪肉制品中存活时间长达3个月。这就导致ASFV一旦传入，往往在疫源地长期存在，造成二次或次级感染。2.2基因组庞大，易变异ASFV基因组庞大，且差异较大。有的毒株致病性很强（E75），有的则较弱（细胞适应毒BA71V）。研究发现，在ASFV基因组的保守区，不同毒株的左端48kb和右端22kb存在较大差异，这可能是ASFV毒力存在差异较大的主要原因。与痘病毒和虹彩病毒类似，ASFV也属于细胞质内增殖的病毒。到目前为止，已经测定至少11株ASFV的全基因组序列，分析其结构发现，ASFV基因组至少含有151~167个ORFs，至少110个ORFs在11株ASFV中都高度保守。在ASFV的包装和侵染过程，至少有pp220、pp62、p72、p54、p30、CD2V、p10、p14.5、p17等50种蛋白参与。其中pp220分子质量为281.5ku，在病毒感染过程中属于晚期表达蛋白，由基因CP2475L编码，在S273R酶的作用下裂解为p150、p37、p14和p34等成熟的病毒蛋白；pp62的分子质量为60.5ku，由基因CP530R编码，在S273R酶的作用下裂解为p35和p15等成熟的病毒蛋白；p150、p37、p14、p34、p35和p15等蛋白在病毒衣壳的组装过程中起关键作用。P72的相对分子质量为73.2ku，由基因B46L（VP72）编码，是病毒的主要结构蛋白和核心抗原蛋白，是病毒二十面体的主要成分。目前很多检测ASFV的PCR、荧光PCR方法等都是基于VP72基因建立的。研究显示，ASFV的基因组变异非常频繁，根据编码p72基因的C端序列可以将ASFV至少分为24个基因型，进一步根据p54和PB602L基因的中央可变区（CVR）序列，ASFV的分型数量会更多。3ASFV主要感染源与传播途径ASFV宿主是家猪和野猪，主要通过间接和直接接触传播。发病猪、隐性感染猪及其排泄物和污染物以及软蜱等媒介吸血昆虫都是ASFV的传染源，这也是ASF不易清除的主要原因。3.1软蜱在非洲，野猪-软蜱-野猪形成的“森林循环”比较常见。一些疣猪ASF感染率较高，软蜱叮咬后，病毒可长期在软蜱体内存活，再通过叮咬野猪进入下一个循环，从而导致“森林循环”长期稳定存在。3.2野猪野猪与家猪的接触是ASFV的另一个重要的传染源。野猪在野外适应性很强，喜欢高密度群居生活，导致野猪之间很容易通过直接接触传播本病。有些野猪还经常出没于农户田舍周围，与家猪接触密切。一旦ASFV在野猪中定殖，则会形成一个移动传染源，加上野猪活动性隐蔽，活动范围大，短期内很难清除。3.3餐余垃圾及非生物媒介带毒的餐余垃圾是一个很重要的感染源。巴西、葡萄牙等首次暴发的ASF疫情都是有交通工具携带的餐余垃圾喂猪引起的。此外，一些污染的衣服、鞋子、车辆、设备等非生物媒介也可以传播ASFV。4ASFV监测与灭源由于ASFV在外界环境中存活时间长，对普通消毒剂抵抗力强，病毒基因型多，易变异，无有效疫苗预防，因此ASF在沈阳市的暴发，对我国养猪业是一种巨大威胁。考虑到ASFV的潜伏期长达15d，再加上现代发达的物流业，15d的时间足以让处于潜伏期内的猪到达国内所有地区，造成疫情大面积扩散和传播。另外，ASFV的传播方式多样，当前尚无有效疫苗，因此国内防控本病的最主要措施就是监测和灭源。4.1监测要点4.1.1临床检查ASF根据临床表现可以分为最急性、急性、亚急性和慢性等4种类型。最急性非洲猪瘟往往不表现典型症状，有时猪刚出现精神沉郁、饮食下降后，第2~3天就突然死亡。急性非洲猪瘟在临床上的表现主要是高烧，肢体末端出血性紫斑，病理变化为主要脏器的出血和淋巴结肿大，如脾脏严重肿大出血、肺脏肿大出血、膀胱出血、心内膜出血、胃和肠黏膜出血，颌下淋巴结、腹腔淋巴结、肠系膜淋巴结等肿大出血。临床上一头猪不一定能全部显现出所有症状，但多剖检几头基本上可以看到这些症状。因此，在临诊上排除ASF疑似病例时要慎重，不可轻易放过任何一个可疑病例。另外，ASF很容易与古典猪瘟和高致病性猪蓝耳病引起的病变相混淆，所以在临床诊断和病理剖检时要注意鉴别。4.1.2实验室检测目前，如果临床上发现类似猪瘟或者高致病性猪蓝耳病病例时，一定要进行ASF排查，一旦发现可疑样品，就必须进行实验室检测。现有的实验室检测方法主要有血清学方法和病原学方法。血清学方法主要有间接酶联免疫吸附试验、阻断酶联免疫吸附试验和间接荧光抗体试验等，其中酶联免疫吸附试验已经有商品化的试剂盒出售。ASFV的病原学方法也有很多，如病毒的细胞培养和分离、直接免疫荧光法、双抗体夹心ELISA法、普通PCR和荧光PCR方法等，其中OIE推荐的普通PCR和荧光PCR方法最为常用。我国《非洲猪瘟防治技术规范（试行）》中提到了3种ASFV病原学检测方法：双抗体夹心酶联免疫吸附试验、聚合酶链式反应和实时荧光聚合酶链式反应（OIE官方网站都有这些方法详细操作步骤）。除此以外，还要加大ASF防控技术研制工作力度，尽快开发简易、高效、特异的诊断试剂和诊断方法，并能够与古典猪瘟、高致病性猪蓝耳病等其他猪群疫病相鉴别。4.2需特别关注的几种传染源4.2.1用来喂猪的泔水泔水是来自城市的饭店、餐馆、工厂餐厅等的餐余垃圾。一直以来，泔水喂猪作为处理餐余垃圾的方法很受小型养殖户欢迎。这种养殖模式在部分城市城乡结合部较多，感染疫病风险极高。如果饭店中使用的猪肉携带ASFV，由于病毒存活时间较长，ASFV就会随泔水饲喂而感染猪群，因此泔水是传播ASFV的重要传染源。4.2.2屠宰场如果感染ASFV的病猪进入待宰间，会通过粪便、尿液以及直接接触等将ASFV传递给健康猪群并能在待宰间长期存在。当感染ASFV的猪进入屠宰间后，屠宰时产生的粪便、血液等会污染屠宰间，屠宰中使用的刀具、车间流水间、屠宰工人等都可以使猪肉制品污染ASFV，从而使屠宰场成为ASFV的传染源。4.2.3生猪肉制品ASFV可在生肉或者未完全煮熟的猪肉制品中存活3个月，一旦污染猪肉，则会通过销售而污染其他生猪肉，从而导致病毒向外传播，并通过泔水饲喂感染健康猪群，导致疫情发生。4.2.4生猪贩运人或经纪人一些小型养殖户经常任由猪贩子或经纪人到自己猪场选猪。这些人在不