洁净区环境消毒方法及效果验证专项方案

验证文件类别：清洁验证方案编码：QJ—YZ001R00页码：共17页第1页消毒剂消毒效果及使用周期验证方案目录1.概述2.职责3.验证内容3.1消毒方法及效果验证3.1.1臭氧消毒3.1.1.1概述3.1.1.2臭氧消毒原理3.1.1.3消毒时间确定3.1.1.4可接收标准3.1.1.53.1.1.6检验方法3.1.1.7消毒效果评价3.1.2甲酚皂消毒剂消毒灭菌法3.1.2.1原理3.1.2.2取样计划3.1.2.3检验方法3.1.2.4确定可接收程度标准3.1.3新洁尔灭消毒剂消毒灭菌法3.1.3.1原理3.1.3.2取样计划3.1.3.3检验方法3.1.3.4确定可接收程度标准3.1.4消毒剂消毒频次，消毒剂更换频次验证3.1.4.1消毒剂消毒频次验证3.1.4.1.1原理3.1.4.1.2沉降菌检测取样计划3.1.4.1.3沉降菌检测方法3.1.4.1.4表面细菌检测取样计划3.1.4.1.5表面细菌检测方法3.1.4.1.6确定可接收程度标准3.1.4.2消毒剂更换频次验证3.1.4.2.1原理3.1.4.2.2沉降菌检测取样计划3.1.4.2.3沉降菌检测方法3.1.4.2.4表面细菌检测取样计划3.1.4.2.5表面细菌检测方法3.1.4.2.6确定可接收程度标准4.验证实施5.验证汇报1.概述。1.1背景。洁净生产厂房用于D级口服固体制剂、外用制剂、丸剂生产。设备厂房于8月全方面完成安装施工。依据GMP要求，结合生产实际情况，决定于10月～6月对其清洁消毒效果进行验证。1.2验证目标。清洁消毒方案及效果是否达成标准要求。2.职责。2.1验证领导小组。验证方案同意，验证协调工作，验证数据及结果审核，验证汇报审批，发放验证证书。2.2生产部。制订验证方案，并负责验证方案实施，搜集各项验证试验统计，报验证领导小组，起草洁净区清洁消毒操作程序。2.3质量部。验证方案审核，按验证方案要求取样计划和标准操作规程进行取样和试验，并汇报检验结果；审核验证中评价结论。2.4工程部。仪器校正、公用系统、设备监护等项工作提供可靠服务。3.验证内容。3.1消毒方法及效果验证。3.3.1.1.1概述：臭氧可消亡空气中细菌和微生物。在常温常压下，分子结构不稳定，很快分解成氧和单个氧原子，单个氧原子含有很强氧化作用，可破坏细菌内部氧化葡萄糖所必需酶，从而破坏其细胞膜，将细菌和微生物杀死。臭氧经过高频臭氧发生器来取得。3.1.1.2原理：将臭氧发生器通向组合式空调器内，经过和空气接触发生臭氧而随空气流动进入洁净区，保持一定时间起到消毒目标。3.1.1.3口服制剂、外用剂、丸剂HVAC系统分别设有臭氧消毒功效，来完成洁净区空间消毒工作。使用时依据洁净区消毒后微生物检验情况，确定消毒时间及消毒周期。3.1.1.4可接收标准。项目可接收标准总菌落数≤10个/皿3.1.13.1.13.1.13.1.3.1.1.5.43.1外用剂洁净区洁净区域面积m2取样点（个）称量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更92口服制剂洁净区洁净区域面积m2取样点（个）粉碎室182称量室92湿混制粒室362整粒混合室272压片室172胶囊填充室332包衣室102男二更92女二更923.1〇〇在房间部位均匀部署，一次和一次取样位置不能反复。3.1.3.1.3.1.将已准备好肉汤琼脂培养皿置于取样点，打开培养皿，使培养基表面暴露0.5h，再盖上盖。根据《中国药典》（二部）附录ⅪJ微生物程度检验法项下平皿菌落计数法检测菌落数。检验结果以算术平均值计算。并跟踪检验三个批次。检验结果和可接收程度标准相比较，消毒效果达成预期标准而且照射时间最短时间即为所要选最好照射时间。结果计算：C1+C2A××室=----------2A××室：为××室平均菌落数。C1：为第一取样点取样菌落数。C2：为第二取样点取样菌落数。3.1.1.7取样周期：每次消毒后连续取样10天进行检测；累计进行三次消毒和取样。3.1.1.8结果判定：3.1.1.8.1消毒效果判定：依据已知臭氧消毒量、消毒时间，依据取样检测微生物结果，判定消毒效果是否符合标准。3.1.1.8.2消毒周期判定：依据已知臭氧消毒量、消毒时间，依据取样检测微生物结果，以微生物出现不合格或不合格边缘线时间为基准，缩短三天后时间既定为消毒周期。3.1.1.9消毒效果评价及周期确定：依据连续三个周期检测结果，由质量管理部做出臭氧消毒效果评价，并确定消毒周期及确定每次消毒时间。3.3.1甲酚皂溶液溶于水，呈碱性反应，有除垢作用，并能破坏细菌细胞膜，造成细胞内物质外渗或漏出，从而展现出抑菌或杀菌作用。其杀菌作用和浓度有着直接关系。所以经过对甲酚皂消毒液浓度确实定并和要求可接收程度标准相比较，若在可接收程度标准范围之内，则可判定该消毒方法有效性及稳定性。具体方法为：在洁净区内指定多个房间，然后设定3个浓度梯度，分别为1.5%、2.5%、3.5%，根据浓度梯度，配制好对应浓度甲酚皂溶液。然后用不一样浓度甲酚皂溶液擦拭洁净区墙壁（指定位置），并在擦拭后对应位置上分别取样，做洁净区房间表面污染试验。依据试验结果和洁净区最大许可微生物浓度程度标准来确定最好消毒浓度。3.13.13.1.23.13.13.130万级洁净区（液体制剂车间）洁净区域面积m2取样点（个）称量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更9230万级洁净区（固体制剂车间）洁净区域面积m2取样点（个）粉碎室182称量室92制粒室362整粒混合室272压片室172胶囊填充室332包衣室102男二更92女二更923.1〇〇在地面上均匀部署。3.13.13.1用灭菌生理盐水润湿灭菌脱脂棉按要求取样面积充足擦拭取样部位，然后放入装有生理盐水灭菌容器内，充足振摇。根据《中国药典》（二部）附录ⅪJ微生物程度检验法项下平皿菌落计数法检测浸出液含菌量即可。并做空白试验。检验结果以算术平均值计算。并跟踪检验三个批次。检验结果和可接收程度标准相比较，消毒效果达成预期标准而且消毒浓度最低浓度即为所要选最好消毒浓度。结果计算：C1+C2A××室=----------2A××室：为××室平均菌落数。C1：为第一取样点取样菌落数。C2：为第二取样点取样菌落数。3.1项目可接收标准菌落数≤10CFU/inch23.1.2.5消毒效果及周期评价。3.3.1.新洁尔灭为阳离子型表面活性剂，能吸附于细胞表面，改变细胞壁通透性，从而展现出强大杀菌作用。其杀菌作用和浓度有着直接关系。所以经过对新洁尔灭消毒液浓度确实定并和要求可接收程度标准相比较，若在可接收程度标准范围之内，则可判定该消毒方法有效性及稳定性。具体方法为：在洁净区内指定多个房间，然后设定3个浓度梯度，分别为0.05%、0.10%、0.15%，根据浓度梯度，配制好对应浓度新洁尔灭溶液。然后用不一样浓度新洁尔灭溶液擦拭洁净区墙壁（指定位置），并在擦拭后对应位置上分别取样，做洁净区房间表面污染试验。依据试验结果和洁净区最大许可微生物浓度程度标准来确定最好消毒浓度。3.1.3.1.3.1.3.3.1.3.13.1.30万级洁净区（液体制剂车间）洁净区域面积m2取样点（个）称量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更9230万级洁净区（固体制剂车间）洁净区域面积m2取样点（个）粉碎室182称量室92制粒室362整粒混合室272压片室172胶囊填充室332包衣室102男二更92女二更923.1.〇〇在墙壁水平面上均匀部署。3.13.1.3.1用灭菌生理盐水润湿灭菌脱脂棉按要求取样面积充足擦拭取样部位，然后放入装有生理盐水灭菌容器内，充足振摇。根据《中国药典》（二部）附录ⅪJ微生物程度检验法项下平皿菌落计数法检测浸出液含菌量即可。并做空白试验。检验结果以算术平均值计算。并跟踪检验三个批次。检验结果和可接收程度标准相比较，消毒效果达成预期标准而且消毒浓度最低浓度即为所要选最好消毒浓度。结果计算：C1+C2A××室=----------2A××室：为××室平均菌落数。C1：为第一取样点取样菌落数。C2：为第二取样点取样菌落数。3.1项目可接收标准总菌落数≤30CUF/inch23.1.3.5消毒效果评价。3.2消毒剂消毒频次、消毒剂更换频次验证。3.23.2不一样等级洁净区有不相同级洁净度要求。洁净度受到人员、内环境、设备等很多原因影响。洁净区工作人员每日虽按SOP对洁净区环境进行全方面清洁，但却不能确保把进入室内人员或物品散发细菌全部杀死或清除出洁净区。所以洁净区应定时进行消毒。经过对洁净区沉降菌及表面污染细菌这两项指标跟踪检测（一天一次，连续十天），以出现不符合可接收程度标准（一个指标不符合即为不符合）那一天（dx）为界，统计dx以前天数，此天数即为消毒剂消毒频次确定理论依据，从而判定该消毒频次确定有效性及合理性。3.23.2.3.2.3.230万级洁净区（液体制剂车间）洁净区域面积m2取样点（个）称量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更9230万级洁净区（固体制剂车间）洁净区域面积m2取样点（个）粉碎室182称量室92湿混制粒室362整粒混合室272压片室172胶囊填充室332包衣室102男二更92女二更923.2〇〇3.2.13.23.23.23.23.2.13.2.13.21号培养皿菌落数+2号培养皿菌落数A=2其中A为各个室平均菌落数。3.23.2.3.23.2.13.2.13.230万级洁净区（液体制剂车间）洁净区域面积m2取样点（个）称量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更9230万级洁净区（固体制剂车间）洁净区域面积m2取样点（个）粉碎室182称量室92制粒室362整粒混合室272压片室172胶囊填充室332包衣室102男二更92女二更923.2〇〇在墙壁水平面上均匀部署。3.23.23.2用灭菌生理盐水润湿灭菌脱脂棉按要求取样面积充足擦拭取样部位，然后放入装有生理盐水灭菌容器内，充足振摇。根据《中国药典》（二部）附录ⅪJ微生物程度检验法项下平皿菌落计数法检测浸出液含菌量即可。检验结果以算术平均值计算。结果计算：C1+C2A××室=----------2A××室：为××室平均菌落数。C1：为第一取样点取样菌落数。C2：为第二取样点取样菌落数。3.2.1项目可接收标准沉降菌≤15CFU/皿表面细菌≤30CFU/inch23.2.1.7消毒频次dx值确定：依据检测结果，确定消毒剂消毒频次dx值。3.2.1.8消毒频次评价汇报。3.23.2细菌和其它生物一样，存在着遗传和变异。细菌变异按其本质原因可分为遗传型变异和非遗传型变异两大类型。其中和消毒灭菌有很大关系就是耐药性变异。耐药性变异是指细菌对很多药品（包含消毒剂）是敏感，但在使用一段时间后，细菌会对该种药品（包含消毒剂）产生抵御力，从而影响到疗效或消毒灭菌效果。所以洁净区使用消毒剂品种应定时更换，以防耐药菌株产生。经过使用一个消毒剂（甲酚皂或新洁尔灭溶液）根据SOP要求对洁净区环境定时消毒（消毒频次已验证过），每消毒一次，对洁净区环境沉降菌和表面细菌这两项指标就取样检测一次。连续消毒检测多个周期（以周为单位，共设定12个时间周期，分别为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12），然后将检测结果和洁净区沉降菌、可接收程度标准相比较，以出现不符合可接收程度标准（一项指标不合格即为不合格）那一个消毒周期（Wx）为界，统计Wx以前消毒周期，此周期即为消毒剂更换频次确定理论依据，从而判定该消毒剂更换频次确定有效性及合理性。3.23.2.3.23.230万级洁净区（液体制剂车间）洁净区域面积m2取样点（个）称量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更9230万级洁净区（固体制剂车间）洁净区域面积m2取样点（个）粉碎室182称量室92湿混制粒室362干燥整粒混合室272压片室172胶囊填充室332包衣室102男二更92女二更923.2〇〇3.2.23.23.23.23.23.2.23.2.23.21号培养皿菌落数+2号培养皿菌落数A=2其中A为各个室平均菌落数。3.23.2.2.4.13.23.2.23.23.230万级洁净区（液体制剂车间）洁净区域面积m2取样点（个）称量室92配液室302灌封室342洗烘瓶室402男二更92女二更9230万级洁净区（固体制剂车间）洁净区域面积m2取样点（个）粉碎室182称量室92制粒室362整粒混合室272压片室172胶囊填充室332包衣室102男二更92女二更