实验一小液流法测定植物细胞水势

关于实验一小液流法测定植物细胞水势植物生理学实验室规则1、认真预习实验。明确目的，掌握原理，列出步骤，提出问题。2、认真操作，仔细观察，从实记录。3、正确操作仪器，不乱开仪器。4、注意安全和清洁卫生（包括值日）。5、正确处理废物。第2页,共33页，2024年2月25日，星期天实验报告要求实验目的：简明扼要实验原理：简明扼要材料：用什么？方法：实际操作过程（文字或图示，简洁）数据计算：原始数据，计算公式，结果。讨论和分析：针对自己的结果进行，分析错误原因。实验报告下周二上交。第3页,共33页，2024年2月25日，星期天植物生理学实验评分标准课上：1、预习报告2、认真实验，操作规范，实验结果符合要求3、不迟到，不早退，积极参与卫生清扫第4页,共33页，2024年2月25日，星期天课下：实验报告评分标准l、卷面清洁，字迹工整2、语句通畅，简明扼要，逻辑性强，表达准确，无概念错误3、预习报告、实验原始记录、实验报告齐全4、实验报告格式规范，重点突出5、实验原始记录要如实认真记录实际操作、观察及测定结果6、对实验结果的讨论要充分有据，论点要正确，与该实验无关的内容不要写入报告中7、抄袭别人报告者0分第5页,共33页，2024年2月25日，星期天本学期实验内容与安排1、植物组织水势的测定2、植物体内硝酸还原酶活力的测定3、溶液培养与矿质元素缺乏症***4、光合作用的Hill反应5、净光合速率的测定与叶绿素的提取和测定6、植物生长物质的生理效应7、激动素对离体小麦叶片中超氧化物歧化酶活性的影响***第6页,共33页，2024年2月25日，星期天实验一植物组织水势的测定

（小液流法）第7页,共33页，2024年2月25日，星期天

【实验目的】

掌握一种植物组织中水势的测定方法。第8页,共33页，2024年2月25日，星期天植物细胞的水势1.水势（waterpotential）的概念：指每偏摩尔体积水的化学势，是水可以用来作功的能量大小的度量，用ψw表示。ψw＝＝

：水的偏摩尔体积μw：水溶液的化学势μw0：纯水的化学势ΔμwVwμw-μw0VwVw第9页,共33页，2024年2月25日，星期天偏摩尔体积溶液中水的偏摩尔体积：即在一定温度、压力和浓度下，1mol水在混合物（均匀体系）中所占的有效体积。1个大气压和25℃，1mol的水体积18ml，但在相同条件下，将1mol的水加入到大量的水和酒精等摩尔的混合物中时，这种混合物增加的体积不是18ml而是16.5ml，16.5ml就是水的偏摩尔体积。第10页,共33页，2024年2月25日，星期天纯水的水势(ψw0)最大ψw0=0，植物细胞的水势都为负值。水势的单位：帕（Pa）、巴(bar)、大气压(atm)。1巴=0.987大气压=105Pa＝0.1MPa第11页,共33页，2024年2月25日，星期天植物细胞水势的组分通常认为植物细胞的水势由3部分组成：水势=渗透势+衬质势+压力势

第12页,共33页，2024年2月25日，星期天小液流法

【实验原理】

植物材料浸入不同浓度溶液中植物材料水势低于溶液水势植物材料水势等于溶液水势植物材料水势高于溶液水势材料吸水外界溶液浓度变大比重变大外界溶液浓度不变比重不变材料失水外界溶液浓度变小比重变小第13页,共33页，2024年2月25日，星期天浸过材料的溶液滴回同一浓度而未浸过材料的溶液中比重小的液流上浮比重不变的液流静止比重大的液流下沉此溶液的水势即等于所测材料的水势第14页,共33页，2024年2月25日，星期天

【器材与试剂】

实验仪器：试管、离心管、直角弯头的毛细吸管、镊子、打孔器（直径0.7cm）、解剖针、移液管实验试剂：1mol/L蔗糖溶液、甲基蓝实验材料：马铃薯第15页,共33页，2024年2月25日，星期天

【实验步骤】

取8只试管编号，配制0.1~0.8M梯度蔗糖溶液第16页,共33页，2024年2月25日，星期天另取8只试管编号为实验组，分别吸取上述溶液4ml。用打孔器打取马铃薯圆柱，切片，放入实验组试管中（每管5片），放置30min，其间摇动数次；每个离心管中挑入少许甲基蓝，摇匀，使溶液呈蓝色。第17页,共33页，2024年2月25日，星期天5.用毛细吸管从实验组离心管中吸取少量溶液，小心插入装有相同浓度蔗糖的对照组试管的中部，缓慢从毛细吸管尖端放出一滴蓝色溶液，轻轻取出滴管，观察蓝色液滴的移动方向并记录。6.计算叶片细胞的水势：

ψcell＝ψout＝－IcRT

第18页,共33页，2024年2月25日，星期天【注意事项】试管、移液管和毛细管等要洗净烘干，移液管与毛细移液管要各个浓度专用。如只用一支则应从低浓度到高浓度依次吸取溶液。

甲基蓝不宜加得过多（溶液呈稍深的蓝色即可），否则将使实验组各管中溶液的比重均加大。蔗糖溶液用前一定要摇匀，时间放久了的蔗糖溶液会分层，影响结果。释放蓝色液滴时要缓慢，防止过急挤压冲力影响液滴移动。

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【思考题】

如果小液滴在各对照溶液中全部上升（或下降），说明什么问题？应如何改进实验设置？

第20页,共33页，2024年2月25日，星期天实验二

植物组织渗透势的测定（质壁分离法）

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一、实验目的

观察植物组织在不同浓度溶液中细胞质壁分离的产生过程及测定植物组织渗透势的方法。第22页,共33页，2024年2月25日，星期天二、实验原理当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态，植物细胞内的压力势为零时，细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。这种渗透势相等的溶液称为等渗溶液。该溶液的浓度称为等渗浓度。第23页,共33页，2024年2月25日，星期天当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时，细胞的等渗浓度将介于刚刚引起初始质壁分离的浓度和尚不能引起质壁分离的浓度之间的溶液浓度。代入公式即可计算出其渗透势。第24页,共33页，2024年2月25日，星期天三、实验材料洋葱表皮第25页,共33页，2024年2月25日，星期天四、实验用具显微镜滤纸载玻片盖玻片镊子刀片解剖针第26页,共33页，2024年2月25日，星期天五、实验步骤切取洋葱表皮，投入1~8号对照组试管中使之完全浸没5~10分钟。依次从试管中取出洋葱表皮放载玻片上（事先滴上同样浓度蔗糖溶液），盖上盖玻片于显微镜下观察。确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度，和不引起质壁分离的最高浓度。第27页,共33页，2024年2月25日，星期天六、实验结果第28页,共33页，2024年2月25日，星期天未发生质壁分离第29页,共33页，2024年2月25日，星期天箭头所示角隅处发生初始质壁分离第30页,共33页，2024年2月25日，星期