药物分析 第六章芳酸类非甾体抗炎药物的分析

胺芳胺芳伯氨基1羧酸芳酸2第六章芳酸类非甾体抗炎药物的分析

3第一节典型药物的结构与性质4一、苯甲酸类Benzoicacid很常用的食品防腐剂，有防止变质发酸、延长保质期的效果5丙磺舒（pKa3.4）

Probenecid

羧苯磺丙胺（1）高尿酸血症伴慢性痛风性关节炎及痛风（2）抗生素治疗的辅助用药，可抑制抗生素的排出，提高血药浓度，维持较长时间。

6甲芬那酸

Mefenamicacid

本品为非甾体抗炎镇痛药具有镇痛、解热和抗炎作用用于轻度及中等度疼痛软组织损伤性疼痛及骨骼、关节疼痛用于痛经、血管性头痛及癌性疼痛等

7理化性质Physicochemicalproperties1.酸性

直接滴定法

苯甲酸、丙磺舒、甲酚那酸及片剂、胶囊双相滴定法

苯甲酸钠2.苯环及其取代基

特征的紫外和红外吸收光谱3.三氯化铁反应

苯甲酸及钠盐4.丙磺舒

受热分解生成亚硫酸盐8二、水杨酸类

Salicylicacid水杨酸：抗真菌、止痒、溶解角质等作用，常与苯甲酸等配成外用制剂，治疗多种慢性皮肤病

阿司匹林：

1、镇痛、解热2、抗炎、抗风湿3、关节炎

4、抗血栓

5、儿科用于皮肤粘膜淋巴结综合征

9氧氢键的极性增强，使其酸性较苯甲酸强。10结核分枝杆菌所致的肺及肺外结核病。主要用作二线抗结核药物。仅对分枝杆菌有效必须与其他抗结核药合用。

重氮化偶合，亚硝酸钠滴定11贝诺酯乙酰氨基苯酚乙酰水杨酸水解后重氮化偶合，用于鉴别羟肟酸铁反应用于鉴别12缓解各类疼痛，包括头痛、牙痛、神经痛、关节痛及软组织炎症等中等度疼痛

13二氟尼柳适用于类风湿性关节炎、骨关节炎、以及各种轻、中度疼痛。

1415主要性质邻羟基苯甲酸1.酸性强于苯甲酸可用直接酸碱滴定法

阿司匹林片两步滴定法2.羟基三氯化铁反应163.芳伯氨基

对氨基水杨酸钠亚硝酸钠滴定法测含量

贝诺酯水解后显芳伯氨基的鉴别反应174.易水解

特殊杂质检查阿司匹林、贝诺酯、双水杨酯及片剂：检查游离水杨酸水杨酸、对氨基水杨酸钠和贝诺酯：检查苯酚、间氨基酚、对氨基酚18三、其他芳酸类药物氯贝丁酯高血脂、高脂血症其降甘油三酯作用较降胆固醇作用明显

19布洛芬

用于缓解轻至中度疼痛如头痛、关节痛、偏头痛、牙痛、肌肉痛、神经痛、痛经。也用于普通感冒或流行性感冒引起的发热

20主要性质布洛芬

酸性较弱，在中性乙醇中可被氢氧化钠直接滴定氯贝丁酯油状液体易水解

两步滴定法测定含量羟肟酸铁反应鉴别21第二节鉴别试验

一、与铁盐反应

具酚羟基或水解后能产生酚羟基的药物

直接：水杨酸（钠）、对氨基水杨酸钠、双水杨酯、二氟尼柳例：水杨酸钠[鉴别]（1）取本品的水溶液，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。23

间接：阿司匹林、贝诺酯

阿司匹林[鉴别]（1）取本品约0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色。24

苯甲酸盐的铁盐反应25

丙磺舒的铁盐反应（Ferricsalt)26

布洛芬的铁盐反应布洛芬高氯酸羟胺DCC温水中20min放冷高氯酸铁紫色N,N′-双环己基羧二亚胺27

氯贝丁酯的铁盐反应氯贝丁酯盐酸羟胺氢氧化钾稀盐酸1%三氯化铁紫色28二、重氮化—偶合反应

Diazotizationcouplingreaction

芳香第一胺类鉴别反应

29

直接：对氨基水杨酸钠间接：贝诺酯

30三、氧化反应

Oxidizingreaction

甲芬那酸△黄色（绿色荧光）重铬酸钾深蓝色棕绿色硫酸溶液31四、水解反应Hydrolysisreaction

阿司匹林NaCO3水杨酸钠醋酸钠++▲过量硫酸酸化水杨酸白色沉淀醋酸臭气+溶于醋酸铵试液熔点：156-161℃32水解反应33

五.分解产物的反应Catabolitereaction

苯甲酸盐苯甲酸钠▲H2SO4苯甲酸升华物34

含硫的药物可分解后鉴别丙磺舒△SO2臭气NaOH▲NaSO3SO42-HNO335六、紫外分光光度法UV1.测定λmax法2.测定λ

max和λmin3.规定λ

max和/或λmin下测定A3.不同最大吸收波长处测定A的比值

甲芬那酸：在251nm和350nm有最大吸收，A分别为0.69~0.74和0.56~0.60二氟尼柳：在251nm和350nm有最大吸收，A的比值为4.2~4.6之间36

七、红外分光光度法IR

本书中收载的原料药均采用红外吸收光谱法鉴别373300-2300cm-1ν-OH—羧基和羟基1660cm-1νc=O—羧基1610、1570、1480、1440cm-1νC=C—苯环775cm-1δAr-H—苯环38八、薄层色谱法TLC主要对制剂进行分离后鉴别例：二氟尼柳胶囊硅胶ＧＦ２５４为固定相四氯化碳－丙酮－冰醋酸（２０：２：１）为展开剂，在紫外灯下检视，主斑点的位置与颜色应与对照品的一致。39九、高效液相色谱法HPLC

在含量测定的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致40第三节特殊杂质检查

※一、阿司匹林中特殊杂质的检查Specifiedimpuritytest

水杨酸1.杂质来源

生产中乙酰化不完全

贮存过程中水解产生合成工艺422.检查方法

曾经：对照法

原理水杨酸中游离酚羟基可与高铁盐反应呈紫堇色，而阿司匹林结构中无游离酚羟基，不能发生反应

Chp2010:HPLC-UV法ODS柱303nm外标法，不得过0.1%43方法：取本品0.1ｇ，加乙醇1ml溶解后，加冷水适量使成50ml，立即加新制的稀硫酸铁胺溶液1ml，摇匀；30s内如显色，与对照液比较，不得更深。对照液的配制：精密称取水杨酸0.1g加水溶解后加冰醋酸1ml，摇匀，再加水使成1000ml，摇匀；精密量取1ml,加乙醇1ml，水48ml与上述新制的稀硫酸铁胺溶液1ml，摇匀44限量(Impuritylimits)原料：0.1%；阿司匹林片：0.3%；阿司匹林肠溶片：1.5%；阿司匹林栓：3.0%（HPLC）45溶液的澄清度（Clarity）

酚、苯酯类杂质原理：根据杂质和阿司匹林的酸性强弱不同，在碳酸钠中的溶解度也有差异。杂质不溶于碳酸钠试液，阿司匹林可溶。

46酚乙酸苯酯水杨酸苯酯乙酰水杨酸苯酯方法：取阿司匹林样品0.5０ｇ，加温热至约４５℃的碳酸钠试液１０ｍｌ溶解后，溶液应澄清。47易炭化物检查易被硫酸炭化呈色的低分子有机物方法：取供试品0.5g，缓缓加入至含硫酸[含H2SO494.5-95.5%(g/g)]5ml的比色管中，振摇使溶解，静置15min后观察，溶液如显色，与对照液相比较，不得更深48对照液比色用氯化钴液0.25ml比色用重铬酸钾液0.25ml比色用硫酸铜液0.40ml加水使成5ml49第四节含量测定一、酸碱滴定法Acid-basetitration1.直接滴定法pKa3～6▲阿司匹林Ch.P（2005）

取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。5152（1）测定方法及计算反应摩尔比为1∶1

53（2）讨论

①中性乙醇溶解阿司匹林乙醇对酚酞显酸性，可消耗氢氧化钠滴定液使结果偏高

“中性”指对酚酞显中性54

②优点：简便、快速。

缺点：酯键水解干扰（不断搅拌、快速滴定）；酸性杂质干扰（如水杨酸）

55③适用范围不能用于含水杨酸过高或制剂分析，只能用于合格原料药的含量测定阿司匹林、苯甲酸、水杨酸、二氟尼柳、双水杨酯、布洛芬、甲酚那酸562.水解后剩余滴定法

利用阿司匹林酯结构在碱性溶液中易于水解的特性，加入定量过量的氢氧化钠滴定液，加热使酯键水解，剩余的氢氧化钠滴定液用硫酸滴定液回滴定57USP（29),加入氢氧化钠滴定液（0.5mo1/L）50.0m1，混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（0.25mo1/L）滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧化钠滴定液（0.5mol/l）相当于45.04mg的C9H8O4。582NaOH（过量）＋H2SO4Na2SO4＋2H2O剩余滴定：水解：59

氢氧化钠与阿司匹林反应摩尔比为2∶1

优点：消除了酯键水解的干扰

缺点：酸性杂质干扰60

3.两步滴定法

Two-steptitrationmethod

阿司匹林片阿司匹林肠溶片氯贝丁酯

61

中和：取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）溶解后，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至溶液显粉红色62第一步中和Neutralization63水解与测定再精密加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）40m1，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液（0.05mol/L）滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。64第二步水解后剩余滴定

Hydrolysisanddetermination

水解剩余滴定2NaOH（过量）＋H2SO4Na2SO4＋2H2O65氢氧化钠液与阿司匹林反应摩尔比为1∶1本法消除了酸性杂质的干扰降低了酯键水解的干扰66片剂含量测定结果的计算

67剩余滴定法

68氯贝丁酯：取本品2g，精密称定（2.0631g），加中性乙醇10ml与酚酞指示液数滴，滴加氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）至粉红色（0.25ml),再精密加氢氧化钠滴定液（0.5mol/L）20ml，加热回流加酚酞指示液数滴，用盐酸滴定液（0.5mol/L，F=0.9950）滴定（消耗3.36ml），将滴定结果用空白实验校正（消耗20.34ml）。每1mL氢氧化钠滴定液（0.5mol/L)相当于121.4mg

氯贝丁酯。69

（1）为什么采用两步滴定法（2）1分子氯贝丁酯消耗几分子氢氧化钠（3）中性乙醇对什么显中性？怎样制备：为什么要采用中性乙醇作溶剂？（4）计算含量？70二、亚硝酸钠滴定法具芳伯氨基或潜在芳伯氨基（芳酰氨基水解或硝基还原）的药物对氨基水杨酸钠71

三.双相滴定法

Diphasictitration

芳酸碱金属盐

如苯甲酸钠Ch.P(2005)溶剂：水——乙醚72

取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25m1、乙醚50ml及甲基橙指示液2滴，用盐酸滴定液（0.5mo1/L）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5ml洗涤，洗液并入锥形瓶中,加乙醚20m1，继续用盐酸滴定液0.5mo1/L)滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每1ml的盐酸滴定液（0.5mol/L）相当于72.06mg的C7H5NaO2。

苯甲酸苯甲酸钠73乙醚

萃取生成的苯甲酸，使水相中的中和反应进行到底滴定中要强力振摇苯甲酸不断被萃取入有机溶剂层，使滴定反应完全，终点清晰。优点消除了反应产物的干扰74四、紫外分光光度法直接紫外分光光度法对照品法贝诺酯

吸收系数法贝诺酯片

丙磺舒片75原料药对照品法76紫外分光光度法吸收系数法77

取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于丙磺舒60mg），置200m1量瓶中，加乙醇150ml与盐酸溶液（9→100）4m1，置70℃水浴上加热30min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液5ml，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9→100）2m1，用乙醇稀释至刻度，摇匀。78