5.3 基因工程疫苗及其研发原则

主讲老师：邢煜骞基因工程疫苗及其研发原则合成多肽疫苗(syntheticpeptidevaccine，是用化学手段合成病原微生物的保护性多肽或表位并将其连接到大分子载体上，再加入佐剂制成的疫苗。基础：将抗原表位精确定位于某几个氨基酸残基合成多肽疫苗合成多肽疫苗的优缺点不需培养病原体，可大量生产不含病毒核酸，也无毒力返祖的危险，安全在同一载体上可连接多种人工合成的氨基酸序列，可制备多价合成肽疫苗抗原表位的局限性某些肽段构象必须与完整病毒上的抗原决定簇构象一致才能发挥作用免疫原性弱多肽合成和纯化技术的局限性合成多肽疫苗的改进与其他颗粒抗原进行融合蛋白表达将其与无毒力的结合菌素或霍乱菌素等细菌蛋白连接自身串联表达，形成复合肽多肽疫苗可在同一个载体上连接多种保护性肽链或多个血清型的保护性抗原肽链合成多肽疫苗的研发原则抗原表位的鉴定与选择具有良好免疫原性的抗原位点主要集中于VP1上，VP1141-160氨基酸序列和VP1200-213氨基酸序列疫苗载体的选择牛血清白蛋白、钥孔鏚血蓝蛋白、破伤风类毒素等免疫佐剂的优化霍乱毒素、鸟嘌呤核苷酸（CpG基序）及两者的联合应用传统的亚单位疫苗(subunitvaccine）（组分疫苗）指的是除去病原体中无免疫保护作用的有害成分，保留其有效的免疫原成分制成疫苗。亚单位疫苗基因工程亚单位疫苗又称重组亚单位苗(recombinantsubunitvac-cine)，是指将病原体保护性抗原基因在原核或真核系统中表达，再以表达产物制成亚单位苗。亚单位疫苗的优势首先是安全性好。疫苗中不含有活性的完整病原体，接种后不会发生急性、持续或潜伏感染，可适用于一些不利于使用活疫苗的情况，如幼龄的动物或人、妊娠动物或人。不含病毒核酸，也无毒力返祖的危险，安全其次，这些疫苗减少或消除了常规活疫苗或死疫苗难以避免的热原、变应原、免疫抑制原免疫原性弱亚单位疫苗所产生的免疫应答可以与感染产生的免疫应答相区别，因此更适合于疫病的控制和消灭计划。亚单位疫苗的研发原则免疫保护性基因的确定（新冠病毒的S蛋白基因等）外源免疫保护性抗原表达系统的选择基因缺失疫苗Cdeletion-mutantvaccine)是用基因工程技术将病毒或细菌的致病性基因进行缺失，从而获得弱毒株活疫苗。基因缺失疫苗基因缺失疫苗的研发原则伪狂犬病病毒基因缺失疫苗TK基因，gE、gC和gG基因中的一种缺失霍乱弧菌基因缺失疫苗94%的A1基因缺失大肠杆菌基因缺失疫苗LT基因的A亚基基因缺失缺失的为非必需基因基因工程重组活载体疫苗(recombinantlive-voctorvaccine）是用基因工程技术将病毒或细菌（常为疫苗弱毒株〉构建成一个载体（或称外源基因携带者)，把外源保护性抗原基因（包括编码重组多肽、肽链抗原位点等基因片段）插人其中使之表达的活疫苗。重组活载体疫苗重组DNA病毒活载体疫苗(复制缺陷型病毒载体)(复制型病毒载体)重组RNA病毒活载体疫苗重组细菌活载体疫苗重组DNA病毒活体疫苗牛痘病毒鸡痘病毒金丝雀痘病毒人腺病毒火鸡疱疹病毒伪狂犬病毒水痘-带状疱疹病毒重组痘病毒载体疫苗宿主范围广增值滴度高稳定性好基因容量大非必需区基因多重组