酵母细胞的固定化课件

酵母细胞的固定化课件4果胶的单体是________，果胶酶的单体是________。5果胶酶是______的总称，包括____

_、_______、_______等。果胶酶能够将_____分解为________，使果汁变得澄清。6___、____、_____等条件都会影响酶的活性。半乳糖醛酸氨基酸一类酶多聚半乳糖醛酸酶果胶分解酶果胶酯酶果胶半乳糖醛酸温度pH酶的抑制剂第2页,共47页，2024年2月25日，星期天

在食品、化工、轻纺、医药等领域大规模使用酶制剂，说明酶制剂使用有很多优点，你能举出一些例子吗？

催化效率高、低能耗、低污染等。但是从刚才的问题中，我们还可以发现酶制剂也存在着一些缺点，你能找到吗？第3页,共47页，2024年2月25日，星期天酶制剂存在的缺陷：

1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活；

2、溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；

3、反应后会混在产物中，可能影响产品质量。第4页,共47页，2024年2月25日，星期天

如果你是工程技术人员，你如何解决这个问题？第5页,共47页，2024年2月25日，星期天专题4酶的研究与应用课题3酵母细胞的固定化第6页,共47页，2024年2月25日，星期天

优点：摧化效率高，低耗能，低污染实际问题：①对环境条件敏感，易失活；②溶液中的酶很难收回，不能被再次利用，提高了生产成本；③反应后酶混在产物中，如不去除，会影响产品的品质

设想：将酶固定在不容于水的载体上课题背景酶如何解决？第7页,共47页，2024年2月25日，星期天优点：酶即能与反应物接触，又容易与反应物分离，同时，还可以反复利用实际问题：一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都是通过一系列的酶促反应才能完成的

设想：酶是细胞合成的，能否将合成酶的细胞直接固定？

固定化细胞（操作简单，成本更低）固定化酶(利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间内)第8页,共47页，2024年2月25日，星期天

阅读P49-50，并思考：1、什么是高果糖浆？使用它有何好处？2、生产高果糖浆需要什么酶？其作用是什么？这种酶有何特点？3、了解高果糖浆生产过程。一、固定化酶的应用实例第9页,共47页，2024年2月25日，星期天1、高果糖浆高果糖浆是果糖含量为42%左右的糖浆。作为蔗糖的替代品，高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病，对人的健康有利。第10页,共47页，2024年2月25日，星期天2、用到的酶生产高果糖浆需要葡萄糖异构酶；其作用是将葡萄糖转化为果糖；这种酶稳定性好，可持续发挥作用。你能写出果糖的分子式吗?它属于什么糖?C6H12O6单糖第11页,共47页，2024年2月25日，星期天3、固定化酶技术生产高果糖浆的图示：注意反应柱的各部分名称。你能说出反应柱的优点吗？第12页,共47页，2024年2月25日，星期天

反应柱能连续使用半年，大大降低了生产成本，提高果糖的产量和质量。优点：第13页,共47页，2024年2月25日，星期天生产流程含淀粉的浆液α-淀粉酶糊精糖化酶葡萄糖葡萄糖异构酶葡萄糖的异构化42%～45%转化成果糖果葡糖浆果糖和葡萄糖分离葡萄糖再次异构化反复多次果糖含量70%～90%高果糖浆第14页,共47页，2024年2月25日，星期天练习：1、下列说法不正确的是（）A、葡萄糖与固定化葡萄糖异构酶接触，转化成的是果糖B、从固定化酶反应柱下端流出的是果糖C、高果糖浆不会像蔗糖那样诱发肥胖、糖尿病、龋齿和心血管病D、酶溶解于葡萄糖溶液，可以从糖浆中回收D第15页,共47页，2024年2月25日，星期天2、研究认为，用固定化酶技术处理污染物是很有前途的。如将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可以用来降解残留在土壤中的有机磷农药，与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的（）A、温度B、PHC、水分D、营养D第16页,共47页，2024年2月25日，星期天

在生产实际中使用固定化酶技术有无不足?如有不足,怎么办?

有。一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实际中很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能进行，所以操作比较麻烦。可采用固定化细胞技术。第17页,共47页，2024年2月25日，星期天二、固定化细胞技术1、概念：利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间的技术。细胞中含有一系列酶，在细胞正常生命活动的过程中，通过代谢产生所需要的代谢产物。阅读P50：思考第二段的问题第18页,共47页，2024年2月25日，星期天2.将酶或细胞固定化的方法将酶（或细胞）包埋在细微网格里将酶（或细胞）相互连接起来将酶（或细胞）吸附在载体表面上包埋法化学结合法吸附法第19页,共47页，2024年2月25日，星期天酶和细胞固定方法的选择①酶适合采用化学结合和物理吸附法固定②细胞适合采用包埋法固定（1）、方法（2）、原因①细胞个大，酶分子很小②个体大的细胞难以被吸附或结合而个小的酶容易从包埋的材料中漏出第20页,共47页，2024年2月25日，星期天3、固定化细胞常用的载体常用的不溶于水的多孔性载体有哪些？明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺等

第21页,共47页，2024年2月25日，星期天练习：1.使用固定化细胞的优点是()。A.能催化大分子物质的水解B.可催化一系列化学反应C.与反应物易接近D.有利于酶在细胞外发挥作用B第22页,共47页，2024年2月25日，星期天2、如果反应物是大分子物质，采用那种方法催化受限制()。A．直接使用酶B．使用化学方法结合的酶C．使用固定化细胞D．使用物理吸附法固定的酶C第23页,共47页，2024年2月25日，星期天3、下列关于酶和细胞的固定叙述不正确的是()。A．酶分子很小，易采用包埋法B．酶分子很小，易采用化学结合或物理吸附法固定的酶C．细胞个大，难被吸附或结合D．细胞易采用包埋法固定A第24页,共47页，2024年2月25日，星期天4、固定化细胞对酶的活性影响最小，根本原因是()。A．避免了细胞破碎、酶的提取纯化过程B．固定化细胞在多种酶促反应中连续发挥作用C．促化反应结束后，能被吸收和重复利用D．细胞结构保证了各种酶在细胞内化学反应中有效的发挥作用D第25页,共47页，2024年2月25日，星期天三、实验操作（一）制备固定化酵母细胞阅读P50~51思考下列问题：（1）制备过程包括哪几个步骤？（2）你认为哪个步骤的操作是最重要的一环？（3）各步骤应当分别注意什么问题？第26页,共47页，2024年2月25日，星期天1、酵母细胞的活化思考：关于酵母菌你有哪些知识？什么是活化？怎样活化？应注意什么？第27页,共47页，2024年2月25日，星期天第28页,共47页，2024年2月25日，星期天活化：让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态；本质：加快新陈代谢；方法：加入适量的水。你能说出理由吗？第29页,共47页，2024年2月25日，星期天取1g干酵母，放入50ml的小烧杯中，加入蒸馏水10ml，用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀，成糊状，放置1h左右使其活化第30页,共47页，2024年2月25日，星期天思考：

你认为酵母的活化操作有哪些注意事项？1、所用容器要大一些；2、要保证酵母菌的活性；3、物种要单一；4、注意水的用量。第31页,共47页，2024年2月25日，星期天2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液称取无水Cacl20.83g。放入200mL的烧杯中，加入150mL的蒸馏水，使其充分溶解，待用。第32页,共47页，2024年2月25日，星期天3、配制海藻酸钠溶液第33页,共47页，2024年2月25日，星期天操作：称取0.7g海藻酸钠，放入50mL小烧杯中.加人10mL水，用酒精灯加热，边加热边搅拌，将海藻酸钠调成糊状，直至完全溶化，用蒸馏水定容至10mL。注意，加热时要用小火，或者间断加热，反复几次，直到海藻酸钠溶化为止第34页,共47页，2024年2月25日，星期天

加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，涉及到实验的成败，一定要按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。应当注意什么问题？第35页,共47页，2024年2月25日，星期天4、海藻酸钠溶液与酵母细胞混合

将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的醉母细胞，进行充分搅拌，使其混合均匀，再转移至注射器中。为什么海藻酸钠溶液要冷却？第36页,共47页，2024年2月25日，星期天第37页,共47页，2024年2月25日，星期天5、固定化酵母细胞

以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的Cacl2溶液中，观察液滴在Cacl2溶液中形成凝胶珠的情形。将这些凝胶珠在Cacl2溶液中浸泡30min左右。

第38页,共47页，2024年2月25日，星期天第39页,共47页，2024年2月25日，星期天课后思考：检验凝胶珠的质量是否合格，有哪些方法？如何用固定的酵母细胞进行酒精发酵？如果凝胶珠的质量不合格，对之后的酒精发酵有怎样的影响？第40页,共47页，2024年2月25日，星期天练习:1、制备固定化酵母细胞的过程中错误的是（）A、取干酵母，加入蒸馏水，使其活化B、配制海藻酸钠时，加热用大火，直到海藻酸钠溶化为止C、将溶化好的海藻酸钠溶液冷却至室温，加入已活化的酵母细胞D、将凝胶珠在Cacl2溶液中浸泡30min左右B第41页,共47页，2024年2月25日，星期天2、下列叙述不正确的是（

）A、从操作角度来考虑，固定化细胞比固定化酶容易B、固定化细胞比固定化酶对酶的活性影响更小C、固定化细胞固定的是一种酶D、将微生物的发酵过程变成连续的酶反应应选择固定化细胞技术C第42页,共47页，2024年2月25日，星期天

刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结