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文档简介

专题14

生物技术实践1/492/493/49答案速填:①酚红指示剂

②尿素

③刚果红染色法

④稀释涂布平板法

⑤显微镜直接计数法

⑥计算→称量→溶化→灭菌→倒平板

⑦碳源、氮源、水、无机盐

⑧琼脂

⑨煮沸消毒法、巴氏消毒法等

⑩灭菌

⑪灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌

⑫平板划线法

⑬萃取

4/49【知识·方法】一、微生物分离和培养1.微生物培养2种基本技术:(1)培养基制备:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。(2)无菌技术:主要包含消毒和灭菌。5/492.微生物分离2种方法:(1)平板划线法:经过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线将聚集菌种分散开。(2)稀释涂布平板法:经过系列梯度稀释,将聚集菌种分散开。6/493.2种微生物筛选与判定:(1)筛选微生物2种选择培养基。①以尿素为唯一氮源培养基:选择培养尿素分解菌。②富含纤维素培养基:选择培养纤维素分解菌。7/49(2)判别微生物2种判别培养基。①添加酚红指示剂培养基:尿素分解菌可使该培养基变红。②添加刚果红培养基:纤维素分解菌菌落周围产生透明圈。8/494.微生物计数2种方法:(1)直接计数法:用血细胞计数板借助显微镜观察计数,试验结果偏大。(2)间接计数法:稀释涂布平板法,试验结果偏小。9/49二、传统发酵技术1.4种传统发酵食品制作:食品菌种呼吸类型原理温度果酒酵母菌无氧无氧呼吸产生酒精18~25℃果醋醋酸菌有氧糖(酒)→醋酸30~35℃腐乳毛霉有氧蛋白酶、脂肪酶水解蛋白质、脂肪15~18℃泡菜乳酸菌无氧无氧呼吸产生乳酸10/492.控制杂菌“4大”办法:(1)经过发酵条件控制杂菌。①无氧发酵时无氧环境能够抑制好氧菌。②乳酸菌发酵、酒精发酵形成酸性环境抑制杂菌繁殖。11/49(2)利用盐控制杂菌:如腐乳制作。(3)利用酒精控制杂菌:假如酒、腐乳制作。(4)利用香辛料控制杂菌:如腐乳、泡菜制作。12/493.影响酒精发酵“2大”原因:(1)发酵前期供氧不足。①结果:酵母菌数量少,产生酒精少。②原因:发酵前期,酵母菌需要经过有氧呼吸大量增殖,所以需要通入空气或在发酵瓶中留有一定空间。13/49(2)发酵后期密封不严。①结果:酵母菌数量充分,不过产生酒精较少或不能产生酒精。②原因:发酵后期要经过密封严格控制无氧环境,以利于酵母菌经过无氧呼吸产生酒精。14/49三、植物有效成份提取1.植物有效成份3种提取方法:(1)蒸馏法:适合提取化学性质稳定、易挥发且不与水混溶物质。(2)压榨法:适合提取高温易分解或原料易焦糊且含量较高物质。(3)萃取法:适合提取易溶于有机溶剂物质。15/492.物质分离5种方法:(1)分液法:分离油水混合物。(2)过滤法:除去固体物和残渣。(3)离心法:除去液体中质量较小固体残留物。(4)加入无水硫酸钠后过滤方法:除去芳香油中残留水分。(5)蒸馏法:除去萃取液中有机溶剂。16/493.冷凝管2种使用方法:(1)冷凝搜集油水混合物:如玫瑰精油提取。(2)冷凝回流:如胡萝卜素提取。17/49【易错·易混】1.自养生物与异养生物所需碳源不一样:(1)自养生物:需要利用CO2作为碳源。(2)异养生物:需要利用含碳有机物作为碳源。18/492.好氧菌、厌氧菌、兼性厌氧菌生活环境不一样:(1)好氧菌:生活在氧气充分环境中,会集中分布在培养液上层。(2)厌氧菌:生活在无氧环境中,会集中分布在培养液底层。(3)兼性厌氧菌:有氧无氧环境均可,会随机分布在培养液中。19/493.选择培养基上长出菌落不一定就是目标微生物:(1)原因:会出现假阳性反应。(2)实例:在以尿素为唯一氮源培养基上可能会长出固氮菌菌落。20/494.酒精发酵条件不适合醋酸发酵:(1)发酵温度不一样:酒精发酵18~25℃,醋酸发酵30~35℃。(2)氧气条件不一样:酒精发酵需要无氧环境,醋酸发酵需要有氧环境。21/495.并非易挥发物质都能够采取蒸馏法提取:(1)不耐热物质不能用蒸馏法提取。(2)原料易焦糊物质不能用蒸馏法提取。22/49题型一微生物培养与应用【典例1】(·全国卷Ⅰ·T37)一些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。回答以下问题:世纪金榜导学号7341408823/49(1)有些细菌能分解尿素,有些细菌则不能,原因是前者能产生___________________________。能分解尿素细菌不能以尿素分解产物CO2作为碳源,原因是__________________________________________,但可用葡萄糖作为碳源,进入细菌体内葡萄糖主要作用是_______________________________________(答出两点即可)。24/49(2)为了筛选可分解尿素细菌,在配制培养基时,应选择_____________________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素+NH4NO3”)作为氮源,不选择其它两组原因是___________________________。(3)用来筛选分解尿素细菌培养基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有______________________(答出两点即可)。25/49【解题技法】→信息推理法1.关键信息:分解尿素、碳源、筛选、无机盐。26/492.思索路线图:27/49答案:(1)脲酶分解尿素细菌是异养生物,不能利用CO2合成有机物为细胞生命活动提供能量,为其它有机物合成提供原材料(2)尿素其它两组都含有NH4NO3,能分解尿素细菌和不能分解尿素细菌都能利用NH4NO3,不能起到筛选作用28/49(3)为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂保持细菌生长过程中pH稳定29/49题型二传统发酵技术【典例2】(·临沂三模)下面为酿酒工艺流程图。请回答:30/49(1)若酒曲中酵母菌菌种被杂菌污染,可采取_________进行纯化培养。接种后,倒置培养皿进行恒温培养,直到出现_________,再进行菌种判定。(2)在发酵前对原料(多为粮食种子)处理主要包含“碎”和“蒸”。在高温条件下“蒸”目标首先是__________________,另首先可使原料“糖化”形成麦芽糖等可发酵性糖。31/49(3)发酵要保持在18~25℃,原因是____________。(4)用稀释涂布平板法进行酵母菌计数时,普通选择菌落数在_________平板进行计数。统计菌落数往往比活菌实际数目低,这是因为_______________。另外,_________也是测定酵母菌数量惯用方法。32/49【解题技法】→信息联络法1.关键信息:纯化培养、高温、发酵、酵母菌计数方法。33/492.思索路线图:34/49答案:(1)平板划线法单菌落(2)毁灭杂菌(消毒灭菌)

(3)此温度范围是酵母菌发酵适宜温度(4)30~300当两个或多个酵母菌连在一起时,平板上只能观察到一个菌落显微镜直接计数35/49题型三植物有效成份提取【典例3】(·洛阳二模)洛阳市某中学生物兴趣小组开展了针对洛阳牡丹产品开发课题研究。下面是他们课题研究几个方向。请分析回答:世纪金榜导学号7341408936/49(1)牡丹花精油提取过程:鲜牡丹花+清水→_________→油水混合物→_________→除水→牡丹花精油。在操作中需要经过________和________来实现提升精油品质目标。37/49(2)牡丹籽油提取:牡丹籽中含油率在20~30%之间,不易挥发,能够采取____________和____________方法进行提取。(3)依据胡萝卜素____________特点,他们采取萃取方法来提取。操作时,要采取沸点高萃取剂,目标是____________。对于提取胡萝卜素粗品可经过____________法判定。38/49【解题技法】→信息推理法1.关键信息:牡丹花精油、牡丹籽油、不挥发、胡萝卜素、萃取剂、判定。39/492.思索路线图:40/49答案:(1)水蒸气蒸馏分离油层严格控制温度延长蒸馏时间(2)压榨萃取(3)易溶于石油醚等有机溶剂充分溶解胡萝卜素,并不与水混合纸层析41/49【思维建模】提升精油品质“2大”办法办法1.严格控制温度,预防高温造成精油部分分解。办法2.适当延长蒸馏时间,确保精油提取量。42/49高考新动向知识迁移应用【典例】(·全国卷Ⅱ·T37)豆豉是大豆经过发酵制成一个食品。为了研究影响豆豉发酵效果原因,某小组将等量甲、乙两菌种分别接入等量A、B两桶煮熟大豆中并混匀,再将二者置于适宜条件下进行发酵,并在32h内定时取样观察发酵效果。回答以下问题:世纪金榜导学号7341409043/49(1)该试验自变量是__________________、__________________。(2)假如发觉发酵容器内上层大豆发酵效果比底层好,说明该发酵菌是_____________。44/49(3)假如在试验后,发觉32h内发酵效果越来越好,且随发酵时间呈直线上升关系,则无法确定发酵最正确时间;若要确定最正确发酵时间,还需要做事情是________________________________________________________________________。45/49(4)从大豆到豆豉,大豆中成份会发生一定改变,其中,蛋白质转变为__________

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