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文档简介
项目17-7胰蛋白酶消化法制备蛋白胨(一)加工工艺流程
项目17-7胰蛋白酶消化法制备蛋白胨(二)加工技术要点1.胰浆处理
胰蛋白酶原和糜蛋白酶原共存于胰脏细胞中,必须用捣碎机破碎细胞,使胰蛋白酶原和糜蛋白酶原从细胞中分离,然后用胰酶自身激活,生成具有生物活性的胰蛋白酶和糜蛋白酶。胰浆在开始激活后5小时内,每隔1小时要求轻度并按一定的顺序方向搅拌和调整pH值。由于酶是生物活性物质,在胰浆制作过程中,要尽量减少酶活力的损失,操作需在0~5℃下进行,防止过度搅拌。项目17-7胰蛋白酶消化法制备蛋白胨(二)加工技术要点2.原料预处理
废蛋液用单层纱布过滤,去除杂质。以过滤后1kg废蛋液汁,加水lkg,用氨水调pH至9.5~10.0,搅拌均匀后,置沸水浴加热40min,然后冷却至50℃左右即可。项目17-7胰蛋白酶消化法制备蛋白胨(二)加工技术要点3.水解
废蛋液经预处理后,每千克废蛋液加水1kg,捣碎成糊状,再加水0.5kg,搅拌成为浑浊液,加胰浆350g,以氨水调pH值8.5左右,置46℃左右水浴锅中进行水解,每半时搅拌一次,并加氨水维持pH在8.5左右。当溶液由暗绿色转为黄色时(约需6时),进行水解程度检验。方法同胃蛋白酶消化法,不过要用酸调pH值至4.6~5.0。项目17-7胰蛋白酶消化法制备蛋白胨(二)加工技术要点4.过滤
水解液经检验合格后即可停止水解,进行第一次过滤,以除去碱性条件下的凝聚物。滤渣取1倍量水洗滤,合并滤液。项目17-7胰蛋白酶消化法制备蛋白胨(二)加工技术要点5.排氨、中和
滤液煮沸15min以上,直至溶液pH值接近于7.0,以排除溶液中的碱性氨并起到浓缩作用。在保持沸腾的情况下,缓慢加入冰醋酸,使料液pH值达到蛋白质的等电点4.6~5.0,以使尚未水解的蛋白质沉淀。然后继续煮沸15min,趁热过滤,以除去热凝聚性杂质。滤渣加水煮沸再滤,合并滤液。项目17-7胰蛋白酶消化法制备蛋白胨(二)加工技术要点6.冷却、低温冷藏处理
待滤液冷却至室温后,置冰箱0℃左右冷藏24~48小时使料液中的酪氨酸和硬脂油等结晶较充分地析出,以免影响产品的透明度。项目17-7胰蛋白酶消化法制备蛋白胨(二)加工技术要点7.小样检验
为了比较有把握地控制成品质量,可借助感官检验和小样试验。方法如下:取少量滤液至比色管中,在亮光处观察应呈深黄色澄明无沉淀;用试管取少量滤液,加热至沸,再倒入比色管,感官检查也应证明无沉淀;用5%NaOH溶液调节至pH9.2煮沸,再观察也应澄明;否则,应作相应处理后再浓缩。项目17-7胰蛋白酶消化法制备蛋白胨(二)加工技术要点8.浓缩
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