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文档简介

细胞培

养细胞的原代培养自主查阅（课后）（1）什么是动物细胞的原代培养？（2）什么是组织块培养法？（3）组织块培养法的基本流程如何？（4）什么是消化培养法？（5）消化培养法的基本流程如何？细胞培养什么是动物细胞的原代培养？原代培养也叫初代培养，是从供体进行细胞分离之后至第一次传代之前的细胞培养阶段。原代培养方法最基本和常用的有两种：组织块培养法和消化培养法细胞培养什么是组织块培养法？组织块培养法：将体内取出的组织块切割成一定大小的植块后再接种进行培养的方法。对于大多数动物组织而言，在植块培养1～3天后，即有细胞从植块向外迁移，随着培养时间的推移，迁出的细胞会越来越多，而且迁出的细胞不断分裂繁殖，逐渐涨满支持物表面为什么组织块培养法能用于培养细胞？细胞培养着装细胞培养操作者进入无菌室前先用肥皂洗净双手，然后用1‰

新洁尔灭浸泡消毒5分钟细胞培养组织块培养法基本流程如何？取材细胞培养接种组织块细胞培养移入培养箱中（注意贴有组织块的一面朝上）静止2～3小时，然后将细胞培养瓶轻轻翻转，继续静止培养。细胞培养观察24～48小时后若培养液变成黄色且混浊，表示已被污染；若培养液变成紫色，一般细胞生长不好，则培养液pH过高；若培养液显为橙黄、橘红且清澈，一般显示细胞生长良好。在显微镜下观察，若此时见细胞自组织边缘长出。继续培养3～5日，再换部分或全部培养液，待多数组织块的生长晕相接，小心挑掉组织块，继续培养3～4天，细胞贴满细胞培养瓶壁时便可进行传代培养。细胞培养什么是消化培养法？将体内取出的组织块制备成单细胞悬液后再接种进行培养的方法。分散的细胞若属于贴壁依赖型细胞,就能黏附、铺展于培养器皿和载体表面生长而形成细胞单层，所以这种培养方式又称为单层细胞培养法。细胞培养消化培养法的基本流程如何？细胞培养操作步骤较多，操作时要特别注意无菌操作防止消化过度,组织块变得疏松，颜色略变白时，终止消化一个鸡胚配成20-30

mL悬液接种到培养瓶中细胞培养如何进行细胞计数？血细胞计数板：人工计数自动细胞计数仪：利用仪器进行细胞计数血球计数板自动细胞计数仪细胞培养原液中细胞密度(细胞数／毫升)=(4大格细胞数之和／4)×104×稀释倍数含有两个室，每个室被划分为9个方阵，其中4个方阵有16个小方格，为0.1

mm3 或1

x10–4ml。细胞培养若已知4个大方格的细胞数为160个，试计算原液中的

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