冻鸡肉中金黄色葡萄球菌LAMP快速检测方法的建立

冻鸡肉中金黄色葡萄球菌LAMP快速检测方法的建立标题：冻鸡肉中金黄色葡萄球菌LAMP快速检测方法的建立摘要：金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）是一种常见的食品中毒性细菌，其存在对公共卫生和食品安全产生了严重威胁。为了保障食品安全，本研究旨在建立一种快速、可靠的检测方法，以检测冻鸡肉中的金黄色葡萄球菌。本研究采用LAMP（环介导等温扩增）技术，并对其反应条件进行优化。结果表明，通过LAMP扩增，金黄色葡萄球菌的检测灵敏度可达到10CFU/g，并且具有良好的特异性。此外，该方法还具有快速反应、简单易行和操作简便等特点，适用于食品安全领域的快速检测。关键词：金黄色葡萄球菌；LAMP技术；冻鸡肉；快速检测；食品安全引言：金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus）是一种革兰氏阳性细菌，广泛分布于自然界中，可以导致多种疾病，包括皮肤感染、肺炎和食物中毒等。特别是在食品中的污染，引起了广泛关注。冻鸡肉是一种常见的食品，但由于生产和储藏条件的不当，往往容易受到金黄色葡萄球菌的污染。因此，建立一种快速、可靠的金黄色葡萄球菌检测方法对于食品安全具有重要意义。LAMP（环介导等温扩增）是一种新型的DNA扩增技术，其具有快速、高效和低成本的特点，在食品安全领域得到了广泛应用。LAMP技术通过特异性的引物和酶，在恒温条件下扩增目标DNA的特定区域，形成大量产物，从而实现对靶标物的快速检测。鉴于LAMP技术的优势，我们希望通过建立LAMP技术检测金黄色葡萄球菌的方法，提供一种快速、准确的检测手段，以保障食品安全。材料与方法：1.实验菌株：采集冻鸡肉中的金黄色葡萄球菌菌株并进行纯化培养。2.DNA提取：采用商业化DNA提取试剂盒进行金黄色葡萄球菌DNA的提取。3.LAMP反应体系：混合反应物质，包括引物、酶及相关试剂，组成LAMP反应体系。4.LAMP扩增条件优化：通过不同温度、时间和引物浓度等参数优化LAMP扩增条件。5.LAMP产物检测：通过目测或荧光反应等方法检测LAMP反应产物。结果与讨论：通过对LAMP反应体系的优化，得到了优化后的LAMP扩增条件：温度为65°C，反应时间为60分钟，引物浓度为8μM。在优化条件下，LAMP反应对金黄色葡萄球菌的检测灵敏度为10CFU/g，而对其他相关食源细菌的特异性较好。与传统的文化方法相比，LAMP技术在金黄色葡萄球菌的快速检测上具有明显的优势。传统方法需要对菌落进行纯化、培养和鉴定，耗时较长。而LAMP技术能够在短时间内完成目标菌的快速检测，且可进行定量分析。此外，LAMP技术在实验操作上相对简单易行，不需要复杂的仪器设备和专业技能，适用于食品安全监测现场的快速检测。结论：本研究成功建立了一种基于LAMP技术的冻鸡肉中金黄色葡萄球菌的快速检测方法。该方法具有检测灵敏度高、特异性好、反应快速、操作简便等优点，适用于食品安全领域的快速检测。未来的研究可以进一步扩大样本量和检测范围，以验证该方法的可行性和应用性。参考文献：[1]何杨,王丽.金黄色葡萄球菌污染鸡蛋产品的检测及分析[J].农资信息,2014(01):263-264.[2]刘鹤,张庆涛,许淼,等.