洗涤产品皮肤刺激性评价方法－改良Duhring小室法

1洗涤用品皮肤刺激性评价方法－改良Duhring小室法本标准规定了洗涤用品的皮肤刺激性评价方法。本标准适用于洗衣液，洗衣粉等洗涤用品的皮肤刺激性评价。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T26396洗涤用品安全技术规范GB/T13173表面活性剂，洗涤剂试验方法FroschPJ,KligmanAM.JAmAcadDermatol.1979Jul;1(1):35-41.Thesoapchambertest.Anewmethodforassessingtheirritancyofsoaps.PeterJ.Frosch,etal.,ContactDermatitis,pp.73-81,“AnImprovedTechniqueforEpicutaneousTestingofIrritantandAllergicReactions”,1979.KreskenJ,EckertJ,WassilewSW.DermBerufUmwelt.1989Mar-Apr;37(2):63-6.Evaluatingskintolerance.StudyofskincleansingagentsinmodificationsoftheDuhringchambertest3方法原理洗涤用品对人体皮肤的损害主要是由于反复接触皮肤引起的刺激性反应，这种刺激性低、弱，并非致敏性。《化妆品安全技术规范》（2015年版）中的“人体皮肤斑贴试验”和“人体试用试验安全性评价”，主要是针对人体皮肤安全性评价，尤其是化妆品的致敏性，并不能很好地评价产品的刺激性大小。改良Duhring小室法也是封闭型斑贴试验的一种，基于经典的肥皂小室试验作了一部分改良，以0.5％十二烷基硫酸钠溶液作为阳性对照，通过加大受试物的剂量、延长贴敷时间来放大其刺激性，并通过多次贴敷模拟使用过程中的反复刺激，有效地解决了上述方法的缺陷，可有效地评价洗手液的人体皮肤刺激性大小，并适用于多个产品的刺激性的比较。4材料和方法4.1被测物为待测样品原物或视使用状况的稀释物4.1.1建议稀释浓度产品类型活性物含量稀释浓度洗洁精浓缩类：活性物≥252.5％待测样品水溶液普通类：活性物＜255％待测样品水溶液洗衣粉浓缩类：活性物≥202.5％待测样品水溶液普通类：活性物≥135％待测样品水溶液洗衣液普通类：活性物≥155％待测样品水溶液浓缩类：活性物≥252.5％待测样品水溶液2产品类型活性物含量稀释浓度浓缩+类：活性物≥451.7％待测样品水溶液4.2对照物4.2.1阳性对照物：0.5％十二烷基硫酸钠（SDS）水溶液4.2.2稀释剂（如蒸馏水）4.2.3客户指定竞品4.3受试者的选择4.3.118～65岁健康志愿受试者，男女均可。4.3.2皮肤对洗涤类产品敏感（5％SDS水溶液人体皮肤斑贴试验结果为阳性）。4.3.3前臂屈侧皮肤无色素沉着、炎症、瘢痕、色素痣、多毛等。4.3.4受试者人数最少有效例数为20例。4.3.5不能选择有下列情况者作为受试者：1）近一周使用抗组胺药或近一个月内使用免疫抑制剂者；2）近两个月内受试部位应用任何抗炎药物者；3）受试者患有炎症性皮肤病临床未愈者；4）胰岛素依赖性糖尿病患者；5）正在接受治疗的哮喘或其他慢性呼吸系统疾病患者；6）在近6个月内接受抗癌化疗者；7）免疫缺陷或自身免疫性疾病患者；8）哺乳期或妊娠妇女；9）双侧乳房切除及双侧腋下淋巴结切除者；10）在皮肤待试部位由于癜痕、色素、萎缩、鲜红斑痣或其它瑕疵而影响试验结果的判定者；11）参加其它的临床试验研究者；12）非志愿参加者或不能按试验要求完成规定内容者。4.4检测方法4.4.1仪器设备：选择直径18mm斑试器。4.4.2将100µL受试物放入斑试器内滤纸片上。4.4.3连续5天将加有受试物的斑试器用无刺激胶带贴敷于前臂屈侧皮肤上，持续6小时后去除，用自来水清洗受试部位，以纸巾轻轻拍干（不要擦干）。每天必须在同一时间进行贴敷。红斑评分超过2分，应随时中止试验。4.4.4受试者在实验室静坐30min后对受试部位进行评估，评估指标：红斑（R）、鳞屑（S）、裂隙（F）评分之和（记为X）、总贴敷时间（记为h）皮肤刺激反应分级标准（见下表）红斑（R）评分皮肤反应0无1轻微发红、点状或弥漫性红斑2轻度、均匀的红斑3严重红斑4红斑，伴有水肿鳞屑（S）评分皮肤反应0无1轻微小片状脱屑2小片状中有大片脱屑（>0.05mm）3大片状脱屑为主（>1mm）4受试区域全是大片的脱屑裂隙（F）评分皮肤反应0无1单一浅表皲裂2一个或多个浅表皲裂，较“1”深3同2，但皲裂更深4裂隙宽而深，伴有出血或渗出4.5皮肤刺激性评价标准 4.5.1皮肤刺激性用A值表示，通过以下公式计算：A=h x其中x为n例受试者R、S、F评分之和的平均值，h为该产品在n例受试者涂抹时间的平均值。4.5.2阳性对照物0.5％SDS水溶液皮肤刺激性A值须小于13，本测试有效。5结果记录表组别平均贴敷时间（h）平均得分皮肤刺激性（A值，取整数部份）被测物0.5％