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文档简介
1怒江金丝猴种群遗传档案建立技术规程个体识别、种群遗传档案内容和种群遗传档案数据的管本标准适用于云南省高黎贡地区怒江金丝猴种群遗传件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本线粒体控制区mitochondrialcontrol2指利用动物组织或粪便提取的基因组DNA,本标准中是指利用怒江金丝猴组织(如毛发、血液、4基本要求5粪便样品采集5.1采样工具铅笔、标签纸、无菌眼科剪刀、镊子、注射器、酒精棉、北斗定位系统、罗盘、地形5.2粪便新鲜程度判断5.3样品选取原则5.3.2若遇到疑似怒江金丝猴母幼粪便样品,应分开采集,根据粪便大小做出判断,并在采样记录表5.4样品采集方法35.4.2采集时,选取远离地面一侧的粪便,尽量不采集与地面接触的粪便,避免污染。用干净的镊子5.5样品记录与编号5.6样品的临时保存野外样品采回后,仔细检查核对样品标签和采样记录表,补充粪便DNA保存液至样品完全浸没。粪便DNA保存液中的样品可于室内常温保存,有条件时可进行5.7样品的运输粪便DNA保存液泄露;样品应尽量使用冰盒(泡沫盒+干冰+冰袋)盛装,以保证运输过程中的低温5.8样品实验室保存使用商品试剂盒从怒江金丝猴粪便中进行总DNA提取,提过10ng/ul,琼脂糖凝胶电泳有明4将7.1规定的怒江金丝猴线粒体标记序列送),列后去除序列末端测序质量较差的序列(多峰、杂峰序5利用NCBI(美国国立生物技术信息中心)的GenBank数据库的Blast搜索程序对9.4.2应使用相同型号的设备和分子内标对所有样品进行基因分型,获得的数据应使用同一用Cervus软件对10个微卫星序列的分型数据进行个体识别,最小匹配位点数进行PCR扩增(2-3次)和基因分型,若两个样品多次基因分型的结果都相同,则判断为同一个体;若两个样品多次基因分型的结果都不相同,则判定两个样品来自610.1采样数据包括采样时间、采样人、样品编号、样品地理坐标等,见附录A。包括样品编号、微卫星序列编号、分型图、个体识别微卫星分型11种群遗传档案数据的管理和使用繁殖状况,避免近亲交配,保持怒江金丝猴的遗7A集管数、种群、采集地点、采集日期、采集人、经纬度、海表A.1怒江金丝猴粪便样品采集记录表8本文件用商用试剂盒进行总DNA样品的提取,提取步骤如下(按照说明书图B.1怒江金丝猴DNA琼脂糖凝胶电泳检测图。1号样品DNA条带单一,为较完整样品;8号样品条带轻微弥撒,为轻微降解样品;11号样品条带弥散,为严重降解样品。C5‘-3’℃1
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