QBT 2583-2003 纤维素酶制剂

中华人民共和国轻工行业标准2003-09-13发布2003-09-13发布素酶中的多组分酶系包括外切β-1,4-葡产品分类中酸性纤维素酶、中性纤维素酶是按酶制剂在使用时的最适pH划分；而表1中的pH系录C所述方法，是以标准酶为对照，通过测定底物1后，精制提纯制得的酸性(或中性)纤维素酶制剂。主要用于食品、纺织、造纸等工业。食品级纤维素修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究GB/T4789.2食品卫生微生物学检验菌落总GB/T4789.3食品卫生微生物学检验大肠菌GB/T4789.4食品卫生微生物学检验GB/T5009.11食品中总砷的测定方法GB/T5009.12食品中铅国家质量技术监督局[1995]第43号令定量包装商品计量监督规定lg固体酶(或1mL液体酶),在(50±0.1)℃、指定pH条件下(酸性纤维素酶pH4.8,中性纤维素酶pH6.0),1h水解滤纸底物，产生出相当于1mg葡萄糖的还原糖量，为1个酶活力单位，以u/g 羧甲基纤维素酶活力Sodiumca还原糖法1g周体酶(或1mL液体酶),在(50±0.1)℃、指定pH条件下(酸性纤维素酶pH4.8,中性纤维素酶pH6.0),1h水解羧甲基纤维素钠底物，产生出相当于1mg葡萄糖的还原糖量，为1个酶活力单位，以u/g(或u/mL)表示。简2粘度法1g固体酶(或1mL液体酶),在(40±0.1)℃、指定pH条件下(酸性纤维素酶pH6.0,中性纤维素酶pH7.5),水解羧甲基纤维素钠底物，使底物粘度降低而得到的相对于标准品对酶活力。简写为CMCA-VIS。4.1按适用pH按国家质量技术监督局[1995]第43号令执行。表1纤维素酶的理化指标u/g(或u/mL)≥ 食品级产品也可用作饲料添加剂。用作饲料添加剂的纤维素酶制剂还应符合其他相关标准法规的要6工业级产品不得用于食品工业及饲料添加剂(食用酒精和蒸馏酒类除外)。卫生指标应符合表2的规定。工业级°重金属(以Pb计),mg/kg≤ 5533 沙门氏菌(25g样)不得检出不得检出35.5.1在25℃以下，固体酶制剂保质期不少于180d,保质期内酶活力应不低于标示的酶活力。5.5.2在25℃以下，液体酶制剂保质期不少于90d,保质期内酶活力应不低于标示的酶活力。取样品10g(或mL),观察、嗅闻，作出判断，做好记录。6.3酶活力6.3.2羧甲基纤维素(还原糖法)酶活力，CMCA-DNS6.3.3羧甲基纤维素(粘度法)酶活力，CMCA-VIS按QB/T1803-1993第9章测定。按GB/T8451测定。按GB/T4789.2测定。按GB/T4789.4检验。7.2食品级纤维素酶制剂，应在标签(或质量证明)上标注“食品级”字样。7.3除上述提及条款外，均按QB/T1804执行。4A.3.4分析天平感量0.1mg5A.3.8具塞刻度试管25mL按表A.1规定的量，分别吸取葡萄糖标准使用溶液(A.试剂(A.2.1)于各管中(每管号平行作3个样),混匀。将标准管同时置于沸水浴中，反应10min。取出，迅速冷却至室温，用水定容至25mL,盖塞，混匀。用10mm比色杯，在分光光度计波长540nm处测量吸光度。以葡萄糖量为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，获得线性回归方程，线性回归系数应在0.9990以上时方可使用(否则须重做)。表A.1葡萄糖标准曲线0123456称取固体酶样1g,精确至0.1mg(或吸取液体酶样1mL,精确至0.01mL),用水溶解，磁力搅拌混匀，准确稀释定容(使试样液与空白液的吸光度之差恰好落在0.3～0.4范围内),放置10min,待测。——将待用滤纸放入(硅胶)干燥器中平衡24h:——将水分平衡后的滤纸制成宽1cm、质量为(50±0.5)mg的滤纸条，折成M型，备用。A.4.3操作程序——将折成M型的滤纸条，分别放入每支试管的底部(沿1cm方向竖直放入)。—-分别向四支管中，准确加入相应pH的缓冲溶液(A.2.2或A.2.3)1.50mL。——分别准确加入稀释好的待测酶液(A.4.2.1)0.50mL于三支样品管中(空白管不加),使管内溶——将四支试管同时置于(50±0.1)℃水浴中，准确计时，反应60min,取出。——立即准确地向各管中加入DNS试剂(A.2.1)3.0mL。再液(A.4.2.1)0.50mL,摇匀。将四支管同时放入沸水浴中，加热10min,取出，迅速冷却至室温，加水定容至25mL,摇匀。——以空白管(对照液)调仪器零点，在分光光度计波长540nm下，用10mm比色杯，分别测量6FPA酶活力按式(A.1)计算。X₁——样品的滤纸酶活力(FPA),u/g(或u/mL);A——根据吸光度在标准曲线上查得(或计算出)的还原糖量，mg;1/0.5——换算成酶液1mL;同一试样两次测试结果的绝对差值，不得超过算术平均值的10%。变异系数不超过10%。7 8浓度mg/mL01234569CMCA-DNS酶活力，按式(B.1)计算。X₁——羧甲基纤维素(还原糖法)酶活力(CMCA-DNS),u/g(或u/mL);A——吸光度在标准曲线上查得(或计算出)的还原糖量，mg;1/0.5——换算成酶液1mL;同一试样两次测试结果的绝对差值，不得超过算术平均值的10%。变异系数不超过5%。(规范性附录)羧甲基纤维素(粘度法)酶活力(CMCA-VIS)测定方法酶样的相对酶活力(以内切酶活力为主)。分别称取一水磷酸二氢钠121.0g和二水磷酸氢二钠21.89g,将其溶解在去离子水10L中。调节溶液的pH到(6.0±0.05)备用。C.2.2磷酸缓冲液，0.1mol/LpH7.5(中性纤维素酶适用)分别称取一水磷酸二氢钠22.49g、二水磷酸氢一钠148.98g和PEG6000(聚乙二醇)10.0g,将其溶解在去离子水10L中。调节溶液的pH到(7.5土0.05)备用。溶液在室温下可保存一个月。BLANOSE7LF(HerculesIncorporated)在25℃,取代度65%～90%,2%水溶液，粘度20mPa·s~称取35gCMC-Na,精确至1mg,缓缓加入相应的缓冲液(C.2.1或C.2.2)约700mL并加热至80℃~90℃。边加热边磁力搅拌，直至CMC-Na全部溶解。冷却后用相应的缓冲液(C.2.1或C.2至950mL,用2mol/L的盐酸或氢氧化钠调节溶液的pH到(6.0±0.05)(酸性纤维素酶)或(7.5±0.05) (中性纤维素酶),最后定容到1000mL缓冲液，搅拌均匀，贮存于冰箱中备用。在冰箱中的贮存使用期，最长为3d。C.2.5标准酶(酸性或中性)C.3.1振荡粘度计MIVI8004(SofrasC.3.3漩涡混合器C.3.410mL塑料试管(100mm×13mm)使用标准粘度样品校准粘度计。100mPa·s,数值显示在(1800±50)mV;10mPa·s,数值显示在后将该贮备液梯度按表C.1或表C.2稀释到最终浓度作为酶标准使用溶液备用。酶标准贮备液和使用1234567中性标准品酶活力1234567称取一定量的标准对照酶样，精确至1mg,用与溶解相应标准酶同样的缓冲液(C.2.1或C.2.2)标准对照酶样溶液的浓度，应根据配制的酶标准使用溶液的浓度范围进行调整，称取少量酶样，用相应的缓冲液(C.2.1或C.2.2)溶解，磁力搅拌15min,并稀释到一定体积，使C.4.5操作程序取若干支专用试管。按表C.3规定，