河北省沧州市吴桥县吴桥中学2023-2024学年高二年级下学期3月月考生物试题【含答案】

吴桥中学高二第一次月考生物试卷姓名：_____班级：_____考号：_____一、单选题（每题1．5分，共30题，共45分）1.我们的生活离不开传统发酵技术制作的食品，酸奶、果酒、果醋、泡菜等极大地满足了人们对饮食多元化的需求。下列相关叙述错误的是（）A.制作酸奶与制作泡菜控制发酵的气体条件是一致的B.酿果酒时无需对葡萄严格消毒，原因是缺氧、酸性的发酵液抑制了其他微生物的生长C.变酸的酒表面和制作泡菜的坛内都会有白膜出现，都是醋酸菌大量繁殖形成的D.家庭制作的泡菜因早期亚硝酸盐含量高而不宜过早食用，需等到亚硝酸盐含量较低后食用【答案】C【解析】【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。3、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌；在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。【详解】A、制作酸奶和泡菜都是利用乳酸菌，乳酸菌是厌氧菌，故制作泡菜与制作酸奶控制发酵的气体条件和原理是一致的，A正确；B、由于在缺氧、呈酸性的发酵液中，绝大多数微生物无法适应这一环境而受抑制，因此酿制果酒时，不需要对葡萄严格消毒，B正确；C、变酸的酒的表面观察到的菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖形成的，而制作泡菜时形成的白膜是酵母菌繁殖形成的，C错误；D、泡菜腌制初期，亚硝酸盐的含量先是升高，因此家庭中制作的泡菜不宜过早食用，后来亚硝酸盐含量会降低并稳定在低水平，D正确。故选C。2.镇江香醋是一种通过固态发酵工艺制作的小曲醋，酿造的工业流程示意如下图所示。下列相关叙述正确的是（）A.冷却的目的是为酒精发酵提供适宜的温度环境B.制醅过程中需添加琼脂等凝固剂形成固态发酵醅基C.碳源不足且氧气充足时，醋酸菌可利用酒精进行发酵D.醋酸发酵中经常翻动发酵物，利于控制发酵温度和通气状况【答案】D【解析】【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【详解】A、根据图示，将糯米蒸熟后冷却是为了降低温度，防止杀死酒曲中的酵母菌，A错误；B、根据图示，制醅过程中需添加麸皮和糠以形成固态发酵醅基，B错误；C、当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，C错误；D、醋酸菌为好氧菌，经常翻动发酵物，利于控制发酵温度和通气状况，D正确。故选D3.我国早在9000年前就可以运用发酵技术获得产品，为生活增添丰富的色彩。下列说法正确的是（）A.制作果酒时，可通过控制发酵的温度、发酵液pH等措施降低杂菌使果酒变质的概率B.利用酵母菌进行传统酿酒过程中，需一直保持无氧的条件C.泡菜坛装八成满可以防止发酵过程中酵母菌、乳酸菌等产生的CO2使发酵液溢出D.腐乳鲜美的味道主要由曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸引起【答案】A【解析】【分析】1、制作泡菜的注意事项：（1）盐水煮沸，一是为了消除杂菌，二是为了除去水中的氧气，冷却再用是为了避免高温杀死坛中蔬菜表面的乳酸菌；（2）加水密封是为了阻止外面的空气再进入泡菜坛，为乳酸菌发酵制作泡菜创造无氧的环境条件。若此过程中进入大量氧气，可能导致乳酸菌死亡而好氧菌大量繁殖，使菜腐烂；（3）菜料只能装八成满的原因：初期会有气体产生；要往坛中加盐水没过菜料，所以不能加菜料太满。2、制作果酒和果醋的注意事项：（1）发酵瓶和榨计机都要用体积分数为70%的酒精消毒；（2）葡萄要先冲洗再去枝梗，以免去枝梗时葡萄破碎，增加被杂菌污染的风险；（3）瓶中留有1/3空间为酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖提供氧气。果酒发酵过程中会产生大量CO2导致瓶内气压升高，需拧松瓶盖放气，但不要完全打开，否则可能会被杂菌污染。【详解】A、制作果酒时，果酒中除了酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等微生物；乳酸菌可能分解果酒中的糖、甘油、酒石酸等，从而使果酒变质；可通过控制发酵的温度、发酵液的pH等措施降低乳酸菌使果酒变质的概率，A正确；B、利用酵母菌酿制果酒时，初始阶段可往装置中通入一定量空气，使酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，后期再密封发酵使酵母菌进行无氧呼吸，产生酒精，B错误；C、泡菜发酵时，发酵初期酵母菌等的活动会产生气体，使体积膨胀，故泡菜坛装八成满可防止发酵液溢出，乳酸菌只进行无氧呼吸（乳酸发酵）不产生二氧化碳，C错误；D、多种微生物参与了豆腐的发酵，如酵母、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉通过分泌脂肪酶和蛋白酶将豆腐块中的大分子物质分解为小分子肽和氨基酸，D错误。故选A。4.某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得到了单菌落。下列叙述正确的是（）A.培养基pH需偏碱性B.筛选得到的微生物不一定是乳酸菌C.需在有氧条件下培养D.泡菜汁需多次稀释后才能划线接种【答案】B【解析】【分析】培养基的营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或弱碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。【详解】A、乳酸菌为细菌，培养基PH需调至中性或弱碱性，A错误；B、参与泡菜发酵的微生物有乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等，所以分离得到的微生物除了乳酸菌，还会有其他耐高盐的微生物，B正确；C、乳酸菌是厌氧菌，需要在无氧条件下培养，C错误；D、平板划线接种时不需要稀释，D错误。故选B。5.在一些传统食品的制作过程中，灭菌、消毒、防腐等是控制有害微生物的常用方法。下列说法正确的是（）A.葡萄制作果酒过程中，葡萄用清水冲洗后需用70%的酒精消毒B.金华火腿制作过程中盐腌等防腐措施能抑制微生物生长繁殖C.制作泡菜时泡菜坛要密封，主要目的是避免外界杂菌的污染D.泡菜腌制过程中，通常用加入抗生素的方法来抑制杂菌【答案】B【解析】【分析】1、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。2、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；反应中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。3、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。【详解】A、发酵瓶需要用70%的酒精消毒，葡萄制作果酒过程中，葡萄用清水冲洗后沥干即可，A错误；B、金华火腿制作过程中盐腌等防腐措施能抑制微生物生长繁殖，这是因为食盐主要成分是NaCl，外界环境盐浓度过高导致微生物细胞失水，B正确；C、制作泡菜时泡菜坛要密封，主要目的是提供无氧环境，使得乳酸菌无氧呼吸产生乳酸，C错误；D、制作泡菜时，泡菜水中含有乳酸菌、硝酸盐还原菌和其他杂菌。乳酸菌可使蔬菜发酵，能有效控制发酵过程，抑制其他菌类和微生物生长，它保存有大量维生素C、L-乳酸菌，使泡好的蔬菜中的营养易被人体吸收利用。盐浓度高以及酒精可抵制杂菌生长，防止泡菜发霉、变质，所以我们在泡菜水中要加盐和白酒来抑制杂菌而非添加抗生素，D错误。故选B。6.培养基是按照微生物、植物和动物组织对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。下列叙述正确的是（）A.配制马铃薯琼脂培养基时，可不在酒精灯火焰旁B.基本培养基中可能不含有氮源，但一定含有碳源C.脱分化培养基中含有蔗糖、无机盐和植物激素等营养物质D.传代培养杂交瘤细胞时，培养基中需加胶原蛋白酶以分散细胞【答案】A【解析】【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。【详解】A、在配制配制马铃薯琼脂培养基时，可不在酒精灯火焰旁操作，因为之后有灭菌处理，A正确；B、基本培养基可能不含有氮源，如培养固氮菌的培养基，也可能不含有碳源，如培养自养微生物的培养基，B错误；C、脱分化是指失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞的过程，脱分化培养基中含有蔗糖、无机盐等营养物质，植物激素不是营养物质，C错误；D、因为杂交瘤细胞没有接触抑制现象，所以传代培养杂交瘤细胞时，培养基中不需加胶原蛋白酶以分散细胞，D错误。故选A。7.下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方，下列叙述正确的是（）成分蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4指示剂琼脂含量(g)10.05.05.02.00.212.0将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mLA.根据物理性质划分，该培养基属于液体培养基B.蛋白胨可为目标微生物提供氮源C.该培养基也可用来筛选土壤中的尿素分解菌D.该培养基的制备流程为灭菌→加入琼脂→倒平板【答案】B【解析】【分析】选择培养基是将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基;鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物的培养基。【详解】A、从配方上看，该培养基有琼脂，因此为半固体培养基，A错误；B、蛋白胨（含有蛋白质成分等）可为目标微生物主要提供氮源，B正确；C、若要筛选出土壤中的尿素分解菌，需要以尿素作为唯一氮源，需要将蛋白胨改为尿素才能用来筛选土壤中的尿素分解菌，C错误；D、该培养基制备流程为加入琼脂→灭菌→倒平板，D错误。故选B。8.乳酸菌在盐胁迫条件下生存、生长和代谢的能力在食品发酵过程中是非常重要的。为筛选耐高盐乳酸菌，某研究小组将酱油原培样品划线接种于不同浓度梯度NaCl的培养基中，从而培养得到耐高盐的单菌落。下列叙述正确的是（）A.培养乳酸菌的培养基和器具都要进行灼烧灭菌B.划线接种前，无须对酱油原培样品进行稀释C.乳酸菌培养时必须提供无氧、高盐且偏碱性条件D.培养基中得到的单菌落均由乳酸菌繁殖形成【答案】B【解析】【分析】泡菜是利用附生在蔬菜表面的植物乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等发酵制成的。这些微生物一般为厌氧、兼性厌氧或微好氧菌。它们的发酵产物不仅有乳酸，还会有醇、酯等，因而使泡菜具有特殊的风味。【详解】A、培养乳酸菌的培养基配制后需要高压蒸汽灭菌，所用器具需要干热灭菌，且操作过程中接种环需要灼烧灭菌，A错误；B、由于是从酱油原培样品取样，并且采用平板划线法分离培养，所以划线接种前，无须对酱油原培样品进行稀释，B正确；C、乳酸菌是厌氧生物，培养时需要提供无氧环境，因为是筛选耐高盐乳酸菌，所以培养基设置了不同浓度梯度NaCl，需要酸性培养基，C错误；D、培养基中得到的单菌落可能包含酵母菌等其他菌落，D错误。故选B。9.在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如下图。有关叙述错误的是（）A.接种前应对培养基进行高压蒸汽灭菌B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落C.接种过程中至少需要对接种环灼烧5次D.甲中a区域为划线的起始位置【答案】D【解析】【分析】平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞，用接种环在平板表面上作多次由点到线的划线稀释而获得较多独立分布的单个细胞，并让其成长为单菌落的方法。【详解】A、接种前必须对培养基进行高压蒸汽灭菌，杀死培养基内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子，A正确；B、连续划线的目的是逐渐稀释细胞，以获得单个细菌形成的菌落，B正确；C、平板划线接种过程中需在接种前、每次划线后对接种环进行灼烧灭菌，图中共接种4个区域，故接种环至少需要进行5次灼烧灭菌处理，C正确；D、甲中a区域为划线的终止位置，D错误。故选D。10.无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中正确的是（）A.紫外线照射前，适量喷洒苯酚等消毒液，可以加强消毒效果B.不耐高温的牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是能够杀死全部微生物，保留牛奶风味C.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落D.在微生物接种实验中，用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒【答案】A【解析】【分析】无菌技术的概念：无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。灭菌与消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。【详解】A、用紫外线照射30min，可以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可以加强消毒效果，A正确；B、不耐高温的牛奶可使用巴氏消毒法，其优点是可以杀死牛奶中的绝大多数微生物，并且基本不会破坏牛奶的营养成分，B错误；C、为了防止污染，接种环经火焰灭菌、冷却后才可以快速挑取菌落，C错误；D、在微生物接种的实验中，一般用75%酒精对实验者的双手进行消毒，用紫外线照射30min对超净工作台进行灭菌，D错误。故选A。11.培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。下列关于培养基的叙述错误的是（）A.制作固体培养基时可加入琼脂作为凝固剂 B.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素C.培养霉菌时需要将培养基调至碱性 D.对培养基进行灭菌可以采用湿热灭菌【答案】C【解析】【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物种和氧气的要求。【详解】A、向液体培养基中加入琼脂可以制作成固体培养基，A正确；B、培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，B正确；C、培养霉菌时需要将培养基调至酸性环境，C错误；D、对培养基进行灭菌可以利用高压蒸汽灭菌，属于湿热灭菌，D正确。故选C。12.下列关于微生物培养的叙述，正确的是（）A.纯化培养时，在培养皿皿盖做标记后倒置在恒温培养箱中静置培养B.涂布接种时，将涂布器浸酒精后在酒精灯外焰上引燃直接使用C.实验室常用的灭菌方法有干热灭菌、湿热灭菌及灼烧灭菌等D.用平板划线法对微生物进行分离计数，也可直接用显微镜对某些微生物计数【答案】C【解析】【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、纯化培养时，培养皿应倒置放在恒温培养箱内静止培养，故应在培养皿的额皿底做标记，A错误；B、涂布接种时，需将涂布器沾酒精后在酒精灯外焰上引燃，冷却后再使用，以免高温将部分微生物杀死，B错误；C、常用的灭菌方法主要包括干热灭菌、湿热灭菌、灼烧灭菌等，C正确；D、平板划线法只能对微生物进行分离，不能计数，D错误。故选C。13.微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤。下列关于酵母菌的纯培养的叙述错误的是（）A.采用平板划线法和稀释涂布平板法均可分离酵母菌B.可用湿热灭菌法对培养酵母菌的马铃薯琼脂培养基进行灭菌C.通过接种环连续蘸取菌液在固体培养基表面划线的操作，可将菌种逐步稀释D.完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，再将接种后的平板进行培养【答案】C【解析】【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、对于微生物进行分离的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，A正确；B、可用湿热灭菌法（通常是高压蒸汽灭菌法）对培养酵母菌的马铃薯琼脂培养基进行灭菌，B正确；C、通过接种环在固体培养基表面连续划线连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，该过程中只蘸取一次菌液，C错误；D、完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板（和一个未接种的平板）倒置培养，D正确。故选C。14.一次性口罩的主要成分为聚丙烯纤维（PP），某科研团队准备从土壤中筛选出高效降解一次性口罩的细菌。下列操作正确的是（）A.培养基中应以PP作为唯一碳源B.挖取的土壤和装土壤的纸袋都无需灭菌C.只能使用平板划线法进行接种D.培养时恒温箱的温度控制在50℃【答案】A【解析】【分析】微生物常见的接种的方法①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。【详解】A、实验目的是获得高效降解一次性口罩的细菌，而一次性口罩的主要成分为聚丙烯纤维（PP），故应用以PP作为唯一碳源的选择培养基，这样其他微生物便无法生存，A正确；B、为了防止杂菌污染，挖取土壤的铁铲和装土壤的纸袋都需灭菌，土壤不用灭菌，B错误；C、可以用稀释涂布平板法和平板划线法进行接种，C错误；D、培养时恒温箱的温度控制在30～37℃，可以每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，D错误。故选A。15.刚果红是一种染料，可以与纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。从落叶较多的腐质土取10g土壤，用无菌水稀释106后，取0．1mL涂布到三个平板中（培养基配方：纤维素钠盐5~10g、酵母膏1g、土豆汁100mL、KH2PO40．25g、琼脂15g、蒸馏水1000mL）培养，菌落数目稳定后加入刚果红染色，洗去浮色后对纤维素分解菌进行分离与计数，三个平板菌落数无显著差异，平均值为200个，出现透明圈的菌落数平均值为30，下列叙述正确的是（）A.上述实验中使用的培养基为选择培养基B.所取土样和培养基均需要灭菌后使用C.涂布的0．1mL培养液中活菌数可能高于200个D.10g土样中纤维素分解菌的数目约为3．0×108个【答案】C【解析】【分析】1、实验室中筛选微生物的原理是：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。通过选择培养的目的是增加目的菌的浓度，以确保能够从样品中分离得到所需要的微生物。刚果红可与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维素水解后的纤维二糖和葡萄糖发生颜色反应；当纤维素被纤维素酶水解后，刚果红纤维素复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，据此可筛选出纤维素分解菌。2、用稀释涂布平板法测定同一样品中的细菌数时，为了保证结果准确，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，确定对照组无菌后，选择菌落数在30～300的平板进行记数，求其平均值。【详解】A、要从土壤中将纤维素分解菌分离出来，应该将它们接种在以纤维素为唯一碳源的选择培养基上，根据上述实验中培养基的成分可知，该培养基不属于选择培养基，应该属于鉴别培养基，A错误；B、所取土样不需要灭菌，B错误；C、涂布的0．1mL培养液中活菌数可能高于200个，因为记数的菌落中可能含有由聚集在一起的两个或两个以上的细胞长成的菌落，C正确；D、题意显示，三个平板菌落的平均值为200个，其中出现透明圈的菌落数平均值为30，即铀30个纤维素分解菌，则10g土样中纤维素分解菌的数目约为30÷0.1×106×10＝3．0×109个，D错误。故选C。16.下列对发酵工程及其应用的叙述，正确的有几项（）①生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉②发酵工程的产品主要包括微生物的代谢物及菌体本身③利用发酵工程生产的根瘤菌肥作为微生物肥料可以促进植物生长④啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成⑤可用诱变育种或基因工程等方法选育出性状优良的菌种并进行扩大培养⑥用单细胞蛋白制成的微生物饲料，可通过发酵工程从微生物细胞中提取A.4项 B.3项 C.2项 D.5项【答案】A【解析】【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等步骤。【详解】①生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉，从而提高柠檬酸的产量，①正确；②发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身，②正确；③根瘤菌肥作为微生物肥料，可以通过根瘤菌的固氮作用，增加土壤中的氮肥量，促进植物生长，③正确；④啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，但酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，主发酵结束后在低温、密闭环境下储存一段时间属于后发酵，因此酒精主要在主发酵阶段产生积累，④错误；⑤诱变育种或基因工程等方法都能够改变微生物的遗传性状，进而可以从中选育出性状优良的菌种，并进行扩大培养，⑤正确；⑥单细胞蛋白即微生物菌体，不需要从微生物细胞中提取，⑥错误；①②③⑤正确。故选A。17.下列有关啤酒工业化生产的叙述，正确的是（）A.工业化啤酒生产中，焙烤的目的是使淀粉酶失活B.糖的分解及代谢物的生成在后发酵阶段完成C.在啤酒的酿造过程中，适时打开发酵装置有利于提高啤酒产量D.啤酒的发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段【答案】D【解析】【分析】主发酵又称“前发酵”，是啤酒发酵的主要过程，在这个过程中，酵母完成了增殖、厌氧发酵及其沉淀回收等，消耗了大部分可发酵性糖等成分，排出的发酵代谢产物即啤酒的主要组分。主发酵一般需要6-8天，长的达8-10天。下酒以后，由于嫩啤酒还含有少量的可发酵性糖类，在贮酒罐内会再次出现一个较为旺盛的发酵过程，这个过程即称为“后发酵”。后发酵是传统发酵方式的一个必然过程，依靠这个后发酵过程，可以完成驱除生酒味、溶解与饱和二氧化碳的作用，同时可以形成适量的酯，并有益于酵母、蛋白质凝固物的沉降，达到啤酒成熟的目的。【详解】A、焙烤杀死种子胚但不使淀粉酶失活，A错误；B、啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，但酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，主发酵结束后在低温、密闭环境下储存一段时间属于后发酵，B错误；C、啤酒酿造的原理是酵母菌无氧呼吸生成酒精，需要提供无氧环境，因此不能打开发酵装置，C错误；D、啤酒的生产包括主发酵和后发酵两个阶段，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒，D正确；故选D。18.南方水果基地为了快速培养甘蔗，拟采用植物组织培养技术，下图是该过程中出现的不同结果。下列有关叙述正确的是（）A.切取甘蔗的茎尖进行组织培养，获得脱毒苗具有抗病毒特性B.整个培养过程需要适宜的温度和一定的营养条件，不需要光照C.B先通过再分化得到C，再通过再分化得到AD.生根、生芽时，培养基只需要α-苯乙酸生长素类调节剂【答案】C【解析】【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，该技术依据的原理是植物细胞具有全能性。【详解】A、由于茎尖、芽尖等分生组织病毒极少，甚至无病毒，因此可切取甘蔗的茎尖进行组织培养获得脱毒苗，但获得的脱毒苗不具有抗病毒特性，仍具有感染病毒的可能，A错误；B、整个培养过程需要适宜的温度和一定的营养条件，其中脱分化过程为避免形成维管组织，一般需要避光处理，而再分化过程中需要光照诱导叶绿素的合成，B错误；C、诱导愈伤组织形成试管苗的过程，需要将生长良好的愈份组织先转接到诱导生芽的培养基上，长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导生根，因为先诱导生芽有利于生根，C正确；D、诱导生芽或生根时，需要生长素与细胞分裂素的比例适合，其中生长素和细胞分裂素的比值大于1时有利于根的形成，比值小于1时，则促进芽的形成，因此诱导生根、生芽时，培养基中需要加入生长素类调节剂、细胞分裂素类调节剂等，D错误。故选C。19.人参皂苷是人参的次级代谢产物，具有增强免疫力、改善心血管功能、抗氧化、抗肿瘤等功能。如图为利用植物细胞培养技术工业化生产人参皂苷的流程。下列相关叙述正确的是（）A.过程①不需要光照，细胞不发生基因的选择性表达B.可利用培养的动物癌细胞来检测人参皂苷的抗癌活性C.人参皂苷属于次级代谢产物，为人参生命活动所必需D.过程②利用了细胞分裂的原理，体现了细胞的全能性【答案】B【解析】【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织），愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。【详解】A、过程①为脱分化，不需要光照，细胞发生基因的选择性表达，A错误；B、分析题意，人参皂苷具有抗肿瘤等功能，可利用培养的动物癌细胞来检测人参皂苷的抗癌活性，B正确；C、人参皂苷属于次级代谢产物，但不是人参基本生命活动所必需，C错误；D、细胞全能性是发育为完整植株或分化为其他各种细胞的能力，过程②利用细胞分裂的原理，但未体现细胞具有全能性，D错误。故选B。20.中药藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述不正确的是（）A.组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生不定向突变B.过程①在接种前，外植体常用无水乙醇和次氯酸钠溶液消毒C.②③④过程添加的植物激素浓度和比例不相同D.筛选出目标突变株后可利用植物组织培养技术生产药用成分【答案】B【解析】【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，主要包括脱分化和再分化两个步骤。【详解】A、植物组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生突变，但突变是不定向的，A正确；B、消毒通常使用体积分数为70%的酒精，不用无水乙醇，B错误；C、②③④过程添加的植物激素种类相同，但浓度和比例不同，C正确；D、筛选出目标突变株后可利用植物组织培养技术进行细胞产物的工厂化生产，培养生产药用成分，D正确。故选B。21.土壤盐渍化是目前制约农业生产的全球性问题，我国科学家用普通小麦（）与耐盐偃麦草（）体细胞杂交获得耐盐新品种“山融3号”，培育过程如下图所示，序号代表过程或结构。下列分析正确的是（）A.“山融3号”与普通小麦之间存在生殖隔离，为不同物种B.①和“山融3号”体细胞均含有两个染色体组，每个染色体组含56条染色体C.由愈伤组织到②适当提高培养基中生长素/细胞分裂素的比例有利于促进芽的形成D.土壤盐渍化可能是导致偃麦草出现耐盐性的根本原因【答案】A【解析】【分析】1、植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成杂种植株的技术;2、植物体细胞杂交技术：（1）原理：细胞膜的流动性、植物细胞的全能性。（2）过程：去壁的方法：酶解法；诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电激等。化学法是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（3）意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。【详解】A、“山融3号”是有四个染色体组（异源四倍体），与普通小麦（2N=42）之间存在生殖隔离，为不同物种，A正确；B、①是普通小麦（2N=42）的原生质体和耐盐偃麦草（2N=70）的原生质体融合而成的，有四个染色体组（异源四倍体），“山融3号”是融合后的原生质体经植物组织培养得到的，其体细胞也含有四个染色体组（异源四倍体），一个染色体组含21或35条染色体，B错误；C、由愈伤组织到②幼苗，适当提高培养基中生长素/细胞分裂素的比例，促进根的形成，C错误；D、土壤盐渍化只能对偃麦草耐盐性进行选择，偃麦草出现耐盐性的根本原因是变异，D错误。故选A。22.下列关于植物体细胞杂交技术的描述不正确的是（）A.可用物理法和化学法诱导原生质体融合B.不需要考虑亲本间的生殖隔离问题C.此技术没有利用植物细胞的全能性D.此技术可获得“番茄一马铃薯”植株【答案】C【解析】【分析】植物体细胞杂交技术的过程：取植物甲和植物乙的体细胞，先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体甲、原生质体乙，再用化学诱导剂聚乙二醇诱导融合形成杂种细胞；最后借助植物组织培养技术，让杂种细胞先经过脱分化培养形成愈伤组织，再经过再分化形成根、芽，进而长成完整植株。【详解】A、诱导原生质体融合可采用物理法，如振荡、离心等方法，也可以采用化学法，如PEG诱导，A正确；B、植物体细胞杂交可以克服远缘杂交不亲和的障碍，不需要考虑亲本间的生殖隔离问题，B正确；C、植物体细胞杂交技术中需要将融合的杂种细胞培育成植株，所以利用了植物细胞的全能性，C错误；D、运用植物体细胞杂交技术可获得“番茄—马铃薯”植株，D正确。故选C。23.如图表示植株A（杂合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的过程，下列说法正确的是（）A.培育植株①的过程为单倍体育种，获得的植株为纯合子B.选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，未体现细胞的全能性C.需要通过植物组织培养技术获得的植株只有①③④D.植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0（不考虑基因突变）【答案】D【解析】【分析】分析题图可知：对植株A的花粉经过离体培养得到的植株①单倍体植株，而后对该单倍体幼苗经秋水仙素处理得到的植物②是纯合二倍体，该过程属于单倍体育种。植株③的获得采用了植物组织培养技术，该植株的获得利用了诱变育种方法。植株④采用了植物组织培养技术，属于细胞工程育种；植株⑤的培育采用了植物体细胞杂交技术。【详解】A、对植株A（杂合子Aa）的花粉（A或a）经过离体培养得到的植株①单倍体植株（A或a），秋水仙素处理单倍体植株①，获得的植株②（AA或aa）为纯合子，A错误；B、选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，通过组织培养技术获得植株③，体现了细胞的全能性，B错误；C、图中需要通过植物组织培养技术获得的植株是①③④⑤，该过程中利用了细胞的全能性，植株②是秋水仙素处理植株①的幼苗得到，没有用到植物组织培养技术，C错误；D、植株①是通过花药离体培养获得的单倍体植株（A或a），秋水仙素处理得到植株②（AA或aa）；植株③④是通过植物组织培养获得的，其基因型为Aa；植株⑤是通过植物体细胞杂交的方法获得的，其遗传物质是由植株A和植株B组成的，与植株A的基因型不同，因此植株①②④⑤与植株A基因型相同的概率分别是0、0、1、0，D正确。故选D。24.为拯救珍稀植物红豆杉，并同时获得高抗癌活性物质——紫杉醇，科研小组设计了如下图所示的实验流程。下列相关叙述正确的是（）A.诱导红豆杉茎尖经过再分化过程形成愈伤组织B.培养过程中添加的生长素比例应高于细胞分裂素C.由愈伤组织提取紫杉醇可大大提高紫杉醇的生产效率D.由同一植株的细胞培养获得的子代其基因型是相同的【答案】C【解析】【分析】据图分析，红豆杉茎尖分生组织通过脱分化过程形成愈伤组织，一方面愈伤组织通过再分化形成胚状体，进而培养成红豆杉植株；另一方面，愈伤组织培养增殖产生更多的愈伤组织细胞，从愈伤组织细胞中提取紫杉醇。【详解】A、诱导红豆杉茎尖经过脱分化过程形成愈伤组织，A错误；B、愈伤组织培养产生愈伤组织，生长素和细胞分裂素含量一样多，B错误；C、由愈伤组织提取紫杉醇可大大提高紫杉醇的生产效率，C正确；D、由同一植株的体细胞培养获得的子代其基因型是相同的，但是如果杂合子的花粉细胞培养的子代基因型可能不同，D错误。故选C。25.海拉细胞是一种人工培养的具有无限增殖能力的细胞，广泛应用于科学研究，极大程度地推动了医学发展。如图是海拉细胞培养部分过程，下列说法正确的是（）A.丙和丁的过程不一定会出现细胞接触抑制的现象B.甲→乙过程需要用胃蛋白酶或胶原蛋白酶等处理C.丙、丁过程中通常会通入O2和CO2的混合气体刺激细胞呼吸D.为避免培养过程中的杂菌污染，丙、丁过程中培养瓶盖必须旋紧不漏气【答案】A【解析】【分析】1、动物细胞培养过程：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中(原代培养)→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液(传代培养)→放入二氧化碳培养箱培养。2、图示为肾脏上皮细胞培养过程示意图，图中甲表示剪碎肾脏组织块，乙表示制成细胞悬液，丙表示原代培养，丁表示传代培养。【详解】A、丙表示原代培养，丁表示传代培养，海拉细胞是一种具有无限增殖能力的细胞，其在原代培养和传代培养的过程中不会出现细胞接触抑制的现象，A正确；B、在动物细胞培养过程中，需要用胶原蛋白酶，而不用胃蛋白酶的原因是在多数动物细胞培养液适宜的pH范围内，胃蛋白酶已失去活性，B错误；C、丙、丁过程中通常会通入95%空气和5%的CO₂的混合气体，前者（O2的主要作用是）维持细胞进行有氧呼吸，后者（CO2的主要作用是）维持培养液适宜的pH，C错误；D、为避免培养过程中的杂菌污染，保证其气体需要，丙、丁过程中需松动培养瓶盖，将其置于含95%空气和5%CO2的混合气体的培养箱中培养，D错误。故选A。26.如图为动物细胞培养的基本过程示意图。下列相关叙述错误的是（）A.容器甲中放入的一般是健康幼龄动物的组织，原因是其细胞分裂能力强B.图中丙和丁分别表示的是原代培养和传代培养，其培养原理相同C.制备乙可用胰蛋白酶处理，且处理时间越长越好D.动物细胞培养需要提供O2和CO2等气体环境，CO2的主要作用是维持培养液的pH【答案】C【解析】【分析】动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。【详解】A、幼龄动物的细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，易于培养，A正确；B、图中丙和丁分别表示的是原代培养和传代培养，其培养原理都是细胞增殖，B正确；C、制备乙可用胰蛋白酶处理，但是处理时间要适当，不是越长越好，C错误；D、动物细胞培养需要提供95%的空气和5%的CO2等气体环境，其中氧气的作用是动物细胞有氧呼吸需要消耗的，而CO2的主要作用是维持培养液的pH，D正确。故选C。27.小鼠（2N=40）是常用的实验动物。研究人员通过下图所示的流程培育出了雄性小鼠A和小鼠B．在不考虑基因突变的情况下，下列叙述错误的是（）A.卵巢的卵母细胞被采集后可以直接用于体外受精B.动物细胞应置于含95%空气和5%CO2的培养箱中培养C.小鼠A通过克隆技术培养出小鼠B利用了细胞核的全能性D.小鼠A的性状与小鼠B的性状可能不完全相同【答案】A【解析】【分析】据图可知，小鼠A通过体外受精、胚胎移植获得，为有性生殖，小鼠B通过克隆技术获得，为无性生殖。【详解】A、小鼠为高等哺乳动物，卵巢采集的卵母细胞应培养到减数第二次分裂中期的次级卵母细胞再用于体外受精，A错误；B、动物细胞培养箱中的气体环境为95%空气和5%CO2，B正确；C、小鼠A通过克隆技术培育出小鼠B是利用了动物细胞细胞核的全能性，C正确；D、小鼠A的性状与小鼠B的性状受细胞质基因、环境、变异等因素影响，性状可能不完全相同，D正确。故选A。28.DHA（二十二碳六烯酸）俗称脑黄金，是神经系统细胞生长及维持的一种主要成分，是构成大脑和视网膜的重要脂肪酸。某科研团队以富含DHA的自养微藻绿色巴夫藻和生长迅速的异养微藻四鞭藻两种二倍体单细胞藻类为材料，通过体细胞杂交技术成功培育出了生长迅速且DHA含量高的单细胞藻（X藻）。下列说法正确的是（）A.植物体细胞杂交成功的标志是细胞核的融合B.X藻是绿色巴夫藻和四鞭藻通过体细胞杂交获得的二倍体藻C.培育X过程中还可能获得四倍体绿色巴夫藻和四倍体四鞭藻D.培育X藻的技术和生产单克隆抗体的技术所采用的原理相同【答案】C【解析】【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。在进行体细胞杂交之前，必须先利用纤维素酶和果胶酶去除这层细胞壁，获得原生质体。杂交过程中的一个关键环节，是原生质体间的融合，这必须要借助一定的技术手段才能实现。人工诱导原生质体融合的方法基本可以分为两大类——物理法和化学法。物理法包括电融合法、离心法等；化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等。融合后得到的杂种细胞再经过诱导可形成愈伤组织，并可进一步发育成完整的杂种植株。【详解】A、植物体细胞杂交成功的标志是杂种细胞再生去细胞壁，A错误；B、由于绿色巴夫藻和四鞭藻藻都是二倍体，因此X藻是绿色巴夫藻和四鞭藻通过体细胞杂交获得的四倍体藻，B错误；C、由于原生质体融合的过程具有随机性，因此培育X过程中还可能出现绿色巴夫藻两两融合，四鞭藻两两融合的现象，所以可能获得四倍体绿色巴夫藻和四倍体四鞭藻，C正确；D、培育X藻的技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性，而生产单克隆抗体的技术所采用的原理是细胞膜的流动性，所以两者的原理不完全相同，D错误。故选C。29.抗体—药物偶联物(ADC)通过将细胞毒素与单克隆抗体结合，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC组成及作用机制如图，下列叙述正确的是（）A.细胞毒素的特异性是ADC能选择性作用于肿瘤细胞的关键B.ADC进入肿瘤细胞的运输方式为协助扩散C.ADC中抗体的作用是与肿瘤细胞特异性结合，将细胞毒素带到肿瘤细胞D.ADC中药物的作用是通过诱发肿瘤细胞坏死而杀死肿瘤细胞【答案】C【解析】【分析】据图分析，抗体上带有细胞毒素，抗体与靶细胞膜上的特异性受体结合通过胞吞的方式把细胞毒素一并带进靶细胞，引起靶细胞溶酶体膜的破裂，最后导致细胞凋亡。【详解】A、细胞毒素杀伤肿瘤细胞没有特异性，能与肿瘤细胞膜上的受体发生特异性结合的是抗体，A错误；B、ADC通常由抗体、接头和药物（如细胞毒素）三部分组成，ADC进入肿瘤细胞的方式是胞吞，B错误；C、肿瘤细胞相当于抗原，ADC中，抗体可以特异性的和肿瘤细胞结合，将细胞毒素带到肿瘤细胞，C正确；D、图示显示，ADC中药物的作用是通过诱发肿瘤细胞凋亡而杀伤肿瘤细胞，D错误。故选C。30.人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。已知在缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶的培养液（HAT培养液）中，骨髓瘤细胞不能正常合成DNA。如图为制备抗HCG单克隆抗体的流程图。下列说法错误的是（）A.过程①表示注射HCG使小鼠发生免疫反应，a表示B淋巴细胞B.诱导a、b细胞融合可以采用灭活病毒诱导法C.用HAT培养液对c细胞进行筛选时，融合细胞均能大量增殖D.过程②的目的是筛选既能大量增殖又能产生所需抗体的细胞【答案】C【解析】【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详解】A、过程①表示注射HCG使小鼠发生免疫反应，a表示B淋巴细胞，A正确；B、诱导动物细胞融合可以采用灭活病毒诱导的方法，B正确；C、已知在缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶的培养液（HAT培养液）中，骨髓瘤细胞不能正常合成DNA，故用HAT培养液对c细胞进行筛选时，B细胞和B细胞融合的细胞不能大量增殖，骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞融合的细胞不能增殖，只有B细胞和骨髓瘤细胞融合的细胞能大量增殖，C错误；D、过程②的目的是筛选既能大量增殖又能产生所需抗体的细胞，D正确。故选C。二、多选题（每题3分，共5题，共15分）31.如图所示，科研人员利用诱变方式选育可高产β-胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌。未突变菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长。随β-胡萝卜素含量增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色。图甲为选育菌种及获得β-胡萝卜素的流程。下列说法正确的是（）A.要得到图乙所示的菌落，可用稀释涂布平板法进行②操作，然后培养B.经过程①紫外线照射的三孢布拉氏霉菌有的不能在含β-紫罗酮的培养基上生长C.进行③操作时，应选择黄色菌落中的菌株继续接种培养D.能在添加β-紫罗酮的培养基上长成菌落的细菌，其遗传物质不一定发生改变【答案】AB【解析】【分析】微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，这就是纯化的菌落。稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂适体培养基的表面，进行培养。【详解】A、要得到乙培养基中的分布均匀的菌落，可用稀释涂布平板法接种，A正确；B、过程①紫外线照射的作用是利用物理因素诱导基因突变，由于突变具有低频性和不定向性，被照射的三孢布拉氏霉菌有的突变，有的没有，且突变的方向也不一定，故有的三孢布拉氏霉菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长，B正确;C、随β-胡萝卜素含量增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色，橙红色的菌体为高产菌，进行③操作时，应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养，C错误；D、根据题干可知，未突变的三孢布拉霉负菌不能在含有β-紫罗酮的培养基上生长，因此能在添加β-紫罗酮的乙培养基上长成菌落的细菌，发生了突变，其遗传物质一定发生了改变，D错误。故选AB。32.为了研究氮源对真菌产纤维素酶的影响，研究人员分别选牛肉膏（B）、酵母提取物（Y）及硫酸铵（N）作为培养基的氮源对CB04菌株进行优化，28℃下培养一定的时间后，分别测定对应的相对酶活性，结果如图所示。下列相关说法正确的是（）A.对降解纤维素的微生物进行筛选时，应该以纤维素为唯一碳源B.本系列实验的自变量包括氮源种类、pH以及培养时间C.为进一步确定酶的最适pH，应该在pH为7和8之间设定梯度进一步测定酶活性D.CB04菌株产纤维素酶的最佳条件初步确定为pH为7，培养天数为4天，且以酵母提取物作为氮源【答案】ABD【解析】【分析】分析题图可知：本系列实验的自变量包括氮源种类、pH以及培养时间，因变量为酶活性的大小。【详解】A、纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，降解纤维素的微生物能够很好地生长，其他微生物则不能生长，故对降解纤维素的微生物进行筛选时，应该以纤维素为唯一碳源，A正确；B、分析题图可知：本系列实验的自变量包括氮源种类、pH以及培养时间，因变量为酶活性的大小，B正确；C、分析题图可知，为进一步确定酶的最适pH，应该在pH为6和8之间（pH为6和8酶活性大小相当，且中间存在一系列pH梯度中可能存在对应的最高酶活性）设定梯度进一步测定酶活性，C错误；D、分析题图可知，CB04菌株产纤维素酶的最佳条件初步确定为pH为7，培养天数为4天，且以酵母提取物作为氮源，此时酶活性相对值最大，D正确。故选ABD。33.CD47在多种肿瘤细胞中高表达，通过与巨噬细胞表面SIRPα互作使肿瘤细胞逃避吞噬清除。研究者将CD47鼠源单克隆抗体与表达CD47的非肿瘤细胞共孵育后，加入荧光标记的SIRPα，检测细胞表面的荧光强度，结果如图。相关说法正确的是（）A.研究抑制CD47基因表达的靶向药可为肿瘤治疗提供新思路B.制备鼠源单克隆抗体需将鼠的B细胞与瘤细胞融合C.CD47鼠源单克隆抗体必须达到一定浓度才能发挥作用D.CD47通过与SIRPα互作降低了机体免疫防御能力【答案】ABC【解析】【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详解】A、抑制肿瘤细胞过度表达CD47基因，可避免肿瘤细胞逃避吞噬清除而起到治疗作用，A正确；B、制备鼠源单克隆抗体需将小鼠B细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，B正确；C、据图可知，CD47单克隆抗体在较低浓度范围内，与无关抗体的荧光强度一致，抗体浓度达到一定值后细胞表面的荧光强度显著下降，说明CD47鼠源单克隆抗体必须达到一定浓度才能发挥作用，存在剂量依赖效应，C正确；D、分析题意可知，CD47通过与巨噬细胞表面SIRPα互作使肿瘤细胞逃避吞噬清除，肿瘤细胞的CD47与SIRPα相互作用降低了机体免疫监视能力，D错误。34.甘薯长期营养繁殖会导致病毒蔓延，我国科研人员利用甘薯茎尖培养获得脱毒苗，使甘薯的产量和品质大幅度提高，脱毒流程如下图，下列相关叙述错误的是（）A.茎尖材料消毒时，用次氯酸钠溶液处理30s后需再用无菌水冲洗B.诱导组织培养时需更换培养基，通常使愈伤组织先生根再出芽C.病毒检测时可用抗毒血清进行免疫检测，呈阳性反应则为带毒苗D.生根试管苗在温室炼苗后，应连带培养基栽植于肥沃疏松基质中【答案】ABD【解析】【分析】植物组织培养依据的原理是细胞的全能性。培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞，脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽最终形成植物体。病毒在作物体内逐年积累，就会导致作物产量降低，品质变差。早在20世纪50年代，科学家就发现植物顶端分生区附近（如茎尖）的病毒极少，甚至无病毒。因此，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗。【详解】A、茎尖材料消毒时，用次氯酸钠溶液处理30min后需再用无菌水冲洗，A错误；B、脱分化和再分化使用的培养基不同，通常使愈伤组织先生芽再生根，B错误；C、病毒含有特定的蛋白质抗原，可利用抗毒血清进行检测，C正确；D、生根试管苗在培养箱内生长几日，用流水清洗掉根部的培养基后，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中，待其长壮后再移栽入土，D错误。故选ABD。35.为了快速检测某病毒，以该病毒外壳蛋白A为抗原来制备单克隆抗体，主要技术路线如图所示。下列叙述错误的是（）A.步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射的是抗原和抗体B.步骤②所用的SP2/0细胞的生长特点是能在体外无限增殖C.已免疫的B淋巴细胞可通过原代培养扩大其细胞数量D.利用多次克隆化培养和抗体检测筛选特定的杂交瘤细胞【答案】AC【解析】【分析】单克隆抗体的制备：用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，将多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，利用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。【详解】A、步骤①是注射特定抗原，步骤⑤是将分泌抗体的杂交瘤细胞注入小鼠体内培养，以获得大量单克隆抗体，A错误；B、步骤②所用的SP2/0细胞是骨髓瘤细胞，特点是能在体外无限增殖，B正确；C、单克隆抗体过程中，不需要单独对已免疫的B淋巴细胞进行原代培养扩大其细胞数量，C错误；D、抗原能和抗体特异性结合，所以利用多次克隆化培养和抗体检测筛选特定的杂交瘤细胞，D正确。故选AC。三、非选择题（除标注外，每空1分，共40分）36.黄曲霉素是由黄曲霉产生的代谢产物，具行极强的毒性和致癌性。科研人员用黄曲霉毒素B（AFB1）的结构类似物——豆香素（C9H6O2）筛选出能高效降解AFB1的菌株，实验过程如下图中的①~④所示。已知菌体对有机物的降解途径有胞外分泌物降解和菌体吸附降解两种。对降解菌的培养液进行离心，发现上清液中AFB1的残留率明显低于菌悬液中AFB1的残留率。检测发现上清液中含有蛋白质K，为验证蛋白质K是降解AFB1的有效成分，科研人员进行了实验⑤：在A中加入水解蛋白质K的酶，B为对照组，充分反应后在两试管中加入等量的豆香素（C9H6O2）。据图回答下列问题：（1）该实验中的目的菌是_____，科研人员在采样前应将_____置于采样处，这样能保证所采集的样品中富含该菌种。（2）将稀释液转移至1号培养基中进行培养的目的是_____。将1号培养基中的目的菌接种到2号培养基中的方法是_____，该方法不仅适用于筛选某种菌株，还适用于_____。（3）上清液中降解有机物的途径是_____。实验⑤中的实验结果是_____。【答案】（1）①.能高效降解黄曲霉毒素B（AFB1）的菌株②.豆香素（2）①.增加目的菌的数量②.稀释涂布平板法③.对菌株进行计数（3）①.胞外分泌物降解②.A中的豆香素残留率（显著）高于B中的【解析】【分析】1、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。2、筛选能高效降解AFB1的值的菌株的一般步骤是：取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。筛选时需要使用以香豆素为唯一碳源的选择培养基。【小问1详解】由题意可知，该实验中的目的菌是能高效降解黄曲霉毒素B（AFB1）的菌株，科研人员用豆香素（C9H6O2）筛选，所以在采样前应将豆香素置于采样处，这样能保证所采集的样品中富含该菌种。【小问2详解】将稀释液转移至1号培养基（以香豆素为唯一碳源）中进行培养，其目的是扩大培养以增加目的菌的数量。将1号培养基中的目的菌接种到2号固体培养基中培养进一步筛选能高效降解AFB1的值的菌落。由图可知该处的接种方法是稀释涂布平板法，该方法不仅适用于筛选某种菌株，还适用于对菌株进行计数。【小问3详解】由题意可知，上清液中不含菌体，但是含有蛋白质K，所以降解有机物的途径是胞外分泌物降解。实验⑤中，自变量是有无蛋白质K，因变量是豆香素的含量，A中的蛋白质K被水解蛋白质K的酶水解掉了，所以实验结果是A中的豆香素残留率（显著）高于B中的。【点睛】本题主要考查微生物的培养和应用的相关知识，解题关键是能理解生物实验的目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能。37.磷是植物生长的重要元素，施入土中的磷大多数与Ca2+等离子结合形成难溶性磷酸盐。科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程见下图，请回答下列问题：（1）步骤③将土壤悬浮液稀释了_____倍。经步骤③最后一次稀释之后若在3个平板上分别接入0．1mL稀释液，经适当培养后，得到的结果是：39、38、37，则每克土样中的活菌数为_____个。运用这种方法统计的结果往往较实际值_____（偏低或偏高）；还可以用显微镜直接观察法进行微生物计数，这种方法统计的结果往往较实际值_____（偏低或偏高），原因是_____。（2）步骤④中待菌落长好后挑出溶磷圈直径（D）与菌落直径（d）比值较_____的菌落。通常情况下，对获得的纯菌种可以依据_____对细菌进行初步的鉴定和分类。（3）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基中，并在37℃、200r·min-1摇床培养，定期取上清液，测定溶液中可溶性磷含量，得到如图所示曲线。结果表明最优良的解磷菌株是_____。【答案】（1）①.1000②.3．8×106③.偏低④.偏高⑤.统计的是死菌和活菌的总数（2）①.大②.菌落（的形状、大小、颜色等）特征（3）M-3-01【解析】【分析】微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等。筛选目的微生物必须使用选择培养基。从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株常用的接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法。【小问1详解】步骤③进行了3次稀释，每次稀释了10倍，则共将土壤悬浮液稀释了1000倍。（39+38+37）÷3÷0.1×104=3.8×106个。由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，因此该数值与活菌的实际数目相比偏低。还可以用显微镜直接观察法进行微生物计数，这种方法统计的结果往往较实际值偏高，原因是统计的是死菌和活菌的总数。【小问2详解】溶磷圈直径（D）与菌落直径（d）比值较大，说明细菌分解磷酸盐的能力较强，所以选择溶磷圈直径（D）与菌落直径（d）比值较大的菌落。不同的微生物具有特定的菌落特征，所以可通过观察菌落的形状、大小、颜色等特征对细菌进行初步的鉴定和分类。【小问3详解】根据实验曲线图，培养相同时间后，M-3-01的上清液中可溶性磷含量较高，可知M-3-01实际溶解磷能力最强。38.现有染色体数目相同的两种二倍体植物A和B，某研究小组拟培育同时具有两者优良特性的新型植物，实验流程如图所示。（1）过程①用____酶和____酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体。（2）在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到____种不同的原生质体，当观察到____时可判断该原生质体是由植物A和植物B的原生质体融合而成的。杂种细胞培育成的“A—B”植株为____倍体。（3）若A与B有性杂交的后代是不育的，而杂种植物“A—B”是可育的，则造成这种差异的原因可能是____。杂种植株往往并没有同时表现出两种植物的所有性状，其原因是____。【答案】（1）①.纤维素②.果胶（2）①.3②.融合细胞表面有红色和绿色两种荧光③.四倍体（3）①.前者染色体联会异常，不能形成正常配子，而后者染色体联会正常，能形成正常配子②.基因的表达并不是孤立的，两个物种的遗传物质表达受到相互干扰【解析】【分析】植物体细胞杂交技术：1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。2、过程：（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。（4）杂种植株的特征：具备两种植物的遗传特征，原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质。3、意义：克服了远缘杂交不亲和的障碍。【小问1详解】过程①去除细胞壁时，常用纤维素酶和果胶酶。【小问2详解】在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面的荧光的不同可观察到3种不同的原生质体，分别是A细胞所带的红色荧光，B细胞所带的绿色荧光以及融合后的杂种细胞所带的红色、绿色荧光。所以当观察到细胞表面有红色和绿色两种荧光时，可判断该原生质体是由植物A和植物B融合而成的；杂种细胞培育成的“A-B”植株为四倍体（2+2）。【小问3详解】虽然A与B有性杂交的后代是不育的，但是杂种植物“A-B”是可育的，造成这种差异的原因是在减数分裂过程中，前者染色体联会异常，而后者染色体联会正常；基因的表达并不是孤立的，两个物种的遗传物质表达受到相互干扰，因此杂种植株往往并没有同时表现出两种植物的所有性状。39.我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①～