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2012-12-07发布2013-03-01实施中华人民共和国农业部发布I本标准按照GB/T1.1给出的规则起草。本标准由农业部农垦局提出。芒果细菌性黑斑病原菌分子检测技术规范本标准规定了芒果细菌性黑斑病原菌[Xanthomonascampestrispv.mangiferaeindicae(Patel,件。凡是不注日期的引其最本(包插所有的修改单)用于SN/T1193基检测夹验室芒果细菌pv.mangife疫性细菌病HrpB基病害模板基因序列好高遢变酶的作用下以四种脱氧和核酸(dN一循环，使欲扩增的基因片几何倍数建短的I聚合酶作用和适宜的反应,根据模板序列设底物使物得以延伸，然后不魔复变性、退火和延伸这27.2PCR反应缓冲液(Mg²+Plus)2.5μL,脱氧核糖核苷酸(dNTP)混合物2μL,特异性引物(见表1)各0.5μL,Taq引物名称引物序列反应条件：95℃预变性3min,后30个循环为95℃变性30s至60s;58℃退火45s至60s;72℃见B.4.2。将整块琼脂糖凝胶置于紫外凝胶成像仪系统观察窗内，根据DNA分子量标准估计扩增条带的大进行样品的PCR检测，具体操作按照7.2～73 2~3,5~6和8——阳性样品；判断该样品为阳性。对初步判断为阳性的原始样品应用甘蓝黑腐黄单胞杆菌选择性培养基(SX培养基)对病原菌进行分离纯化，对纯化的疑似病原细菌进行PCR检测，4Xanthomonascampestrispv.mangiferaeindicae(Patel,Moniz&Kulkarni1948)Robbs,RibieroXanthomonascitripv.mangiferaeindicae。细菌域(DomainBacter52——叶片反面。图A.1芒果叶片症状6B.2试剂B.2.31mol/LEDTA-Na₂(p称取372.2g乙二铵四乙酸二钠(EDTA-Na₂),加入70mL超纯水中，再加入适量NaOH称取81.9g氯化钠(NaCl)溶解于800mL超纯水中，缓慢加入20g十六烷基三甲基溴化铵在800mL超纯水中加入酵母膏1g,牛肉浸膏3g,蛋白胨5g,葡萄糖10g,用NaOH溶液

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