药物分析：第四章 药物定量分析与分析方法验证

药物分析：第四章药物定量分析与分析方法验证前处理的目的：满足所选用的分析方法对试样的要求。前处理方法分类：（1）不经有机破坏的分析方法；（2）不经有机破坏的分析方法。经有机破坏的分析方法（了解）：湿法破坏：适用于含氮有机合成药物分析的前处理，在生物制品分析中用于氮（包括蛋白质）、磷、硫柳汞及氯化钠的测定法的前处理。另外，本法亦用于生物样品中金属元素测定时生物基质的去除。本法主要使用硫酸作为分解剂，常加入氧化剂作为辅助分解剂。如硫酸——硫酸盐法为基础的含氮有机药物定量分析方法——凯氏定氮法干法破坏：本法主要适用于含卤素、硫、磷等有机药物分析的前处理，亦用于某些药物中硒和砷盐的检查，根据破坏方式的不同，干法破坏可分为高温炽灼法和氧瓶燃烧法。药品分析方法的验证内容及内容表示方法：准确度：用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用回收率(%)表示。原料药：回收率(%)=测得量/加入量*100%制剂：测定制剂中其他组分及辅料对含量测定方法的影响。回收率(%)=测得量-本底量/加入量*100%精密度：在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。用偏差(d)、标准偏差(SD)、相对标准偏差(RSD)表示，用ｓ或RSD表示时，至少６次结果进行评价。重复性：在较短时间间隔内，在相同的操作条件下由同一分析人员测定所得结果的精密度，也称批内精密度。中间精密度：在同一实验室内，由于实验室内部条件的改变，不同时间不同分析人员用不同设备测定所得结果的精密度。重现性：在不同实验室由不同分析人员测定结果的精密度。专属性：是在其他成分可能存在下，采用的方法能准确测定出被测物的特性。鉴别反应、杂质检查、含量测定方法均应考察其专属性。检测限(LOD)：指试样中被测物能被检测出的最低浓度或量常用方法：目视法；信噪比法(S/N=3或2时的相应浓度或注入仪器的量确定)。定量限(LOQ)：样品中被测物能被定量的最低量，其测定结果应有一定的准确度和精密度。计算信噪比S/N=10的相应浓度或注入仪器的量而确定。线性：在设计的范围内，测试结果（响应值）与试样中被测物浓度或量直接呈正比关系的程度。应列出回归方程、相关系数和线形图。范围：能达到一定精密度、准确度和线性、测试方法适用的高低限浓度或量地区间。根据分析方法的具体应用和精密度、准确度和线性结果和要求确定。耐用性：在测定条件有小的变化时，测定结果不受影响的承受程度，为使方法可用于常规检验提供依据。蛋白质的去除：加入与水混溶的有机溶剂；加入中性盐；加入强酸；加入含锌盐及铜盐的沉淀剂；酶解法定量分析方法的验证：（注：与药物分析方法验证的不同点）特异性：必须证明所测定的物质是原形药物或特定的活性代谢物，内源性物质和相应的代谢物及同时服用的其他药物不得干扰样品的测定。标准曲线和线性范围：必须至少6个浓度建立标准曲线，不许外延。建立标准曲线时应随行空白生物样品，但标准曲线不包括零点。精密度与准确度：RSD<15%，准确度在85%—115%定量下限：是标准曲线的最低浓度点，要求至少能满足测定3—5个半衰期时样品中的药物浓度，或Cmax的1/10—1/20时的药物浓度。样品的稳定性：根据具体情况，对含药生物样品在室温、冰冻和冻融条件下以及不同存放时间进行稳定性考察，以确定生物样品的存放条件和时间。提取回收率：一般低于100％，须稳定。应考