SNT 3730.7-2013 食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法 第7部分水牛成分检测 实时荧PCR法_第1页
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中华人民共和国出入境检验检疫行业标准食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法第7部分：水牛成分检测实时荧光PCR法I——第1部分：貂成分检测实时荧光PCR法；——第2部分：狗成分检测实时荧光PCR法；——第5部分：马成分检测实时荧光PC——第8部分：猪成分检测实时荧光PCR法。本部分为SN/T3730的第7部分。1食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法第7部分：水牛成分检测实时荧光PCR法SN/T3730的本部分规定了食品和饲料中水牛成分的实时荧光PCR检测方法。本部分适用于食品和饲料中水牛成分的定性检测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T27403实验室质量控制规范食品分子生物学检测3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号的积累实时监控整个PCR扩增过程。每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。4缩略语下列缩略语适用于本文件。PCR:聚合酶链式反应(polymerasechainrDNA:脱氧核糖核酸(deoxyribonuleicacid)CTAB:十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrithylammoniumbromide)Tris:三(羟甲基)氨基甲烷[tris(hydroxymethyl)aminomethane]EDTA:乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraaceticacid)Tag:水生栖热菌(Thermusaquat5方法提要2序列(5'-3')目的基因水牛线粒体ATPase8基因6.970%乙醇。6.10CTAB提取缓冲液：20g/LCTAB,1.4mol/LNaCl,0.1mol/LTris-HCI,Na₂EDTA,pH8.0。~0.4mmol/LdUTP、400nmol/LROX染料(某些荧光PCR仪不需要ROX校正)。如果具有等效的3效的DNA提取方法提取模板DNA。使用核酸蛋白分析仪或紫外分光光度计分别检测260nm和280nm处的吸光值Azo和Az。c=A×N×50/1000410结果判定及表述10.1结果判定在符合第9章的情况下，被检样品进行检测时：a)如Ct值≤35.0,则判定为被检样品阳性，扩增靶标序列参见附录A;b)如Ct值≥40.0,则判定为被检样品阴性；c)如35.0<Ct值<40.0,则重复一次。如再次扩增后Ct值仍为<40.0,则判定被检样品阳性；如再次扩增后Ct值≥40.0,则判定被检样品阴性。10.2.1结果为阳性者，表述为“

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